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1. Reação de Benzidina O princípio da técnica baseia-se na decomposição da água oxigenada (peróxido de hidrogênio) pela atividade da peroxidase do sangue. O oxigênio liberado oxida a benzidina, formando um composto de cor azul ou verde. Se presentes, remover as gorduras das fezes com éter, pela possibilidade de resultados falso-positivos. A metodologia consiste em espalhar uma pequena quantidade de fezes sobre um papel de filtro de boa qualidade, gotejando 2 ou 3 gotas de água oxigenada sobre o mesmo. Adicionar igual volume de solução de benzidina, observando o desenvolvimento de cor. Interpretação do exame • Sem desenvolvimento de cor: reação negativa; • Coloração esverdeada: traços de sangue; • Coloração verde-clara: +; • Coloração verde-escura: ++; • Coloração verde-azulada: +++; • Coloração azul: ++++. Reagentes Peróxido de hidrogênio a 3% Solução de benzidina Ácido acético glacial 25 ml Benzidina em pó (especial para sangue) 5 g Deixar em repouso por uma noite e filtrar; acondicionar em frasco âmbar. É importante limpeza rigorosa da vidraria, pois resíduos de detergentes podem falsear os resultados. 2. Reação de Meyer-Johannesen O princípio desta técnica baseia-se na redução da fenolftaleína pelo zinco a anidrido ftálico, que, oxidado pela água oxigenada, desprende oxigênio pela ação do sangue, transformando-se novamente em fenolftaleína, assumindo uma coloração avermelhada no meio alcalino. A metodologia consiste em realizar uma suspensão de fezes de aproximadamente 5%; transferir 5 ml da suspensão para um tubo de ensaio e adicionar 1 ml de reativo de Meyer-Johannesen. Inverter várias vezes e acrescentar 3 a 4 gotas de água oxigenada. Interpretação do exame A positividade da reação é considerada quando uma coloração vermelha é desenvolvida imediatamente após a realização do ensaio. Reagentes Peróxido de hidrogênio a 3% Solução de Meyer-Johannesen Fenolftaleína 2 g Hidróxido de potássio anidro 20 g Água destilada q.s.p. 100 ml Aquecer os reativos até a fervura, acrescentando de 10 a 30 g de zinco em pó até descoloração completa. Filtrar e acondicionar em frasco âmbar, com um pouco de zinco em pó, no fundo do frasco. 3. Reativo de Guáiaco O princípio desta técnica baseia-se na oxidação do complexo guáiaco e desenvolvimento de um composto de coloração azul. A metodologia consiste em realizar um esfregaço das fezes em um papel de filtro, gotejando 2 a 3 gotas de ácido acético glacial e 2 a 3 gotas de uma solução preparada recentemente de álcool etílico, saturado com goma guáiaco em pó. Adicionar igual quantidade de peróxido de hidrogênio a 3%. Misturar com um bastão de vidro e observar o desenvolvimento de coloração ao fim de cinco minutos. É conveniente realizar paralelamente um controle negativo e outro positivo para validar os exames dos pacientes. Interpretação do exame A positividade da reação é considerada quando uma coloração azulada é desenvolvida. Uma coloração esverdeada é indicativa de reação negativa. Reagentes Peróxido de hidrogênio a 3% Solução de guáiaco Álcool etílico a 95% Goma guáiaco em pó Pulverizar e agitar até saturação; preparar somente no momento do uso. 4. Imunocromatografia O teste de imunocromatografia utiliza a combinação de anticorpos monoclonais conjugados e anticorpos policlonais anti-hemoglobina humana de fase sólida, com elevada especificidade e sensibilidade. Em virtude da utilização de anticorpos específicos para a hemoglobina, não há necessidade de realização de dietas, já que os anticorpos reconhecem somente a molécula de hemoglobina (sangue). A hemoglobina presente nas fezes liga-se ao anticorpo monoclonal, formando um complexo estável, o qual flui pela área adsorvente do kit e se liga aos anticorpos policlonais na área de reação positiva, surgindo uma banda com coloração rosa-clara (teste semelhante ao de gravidez comercializado pelas farmácias e drogarias). Na ausência da hemoglobina, não haverá o desenvolvimento de banda na área de reação, indicando resultado negativo. Quem deve realizar o exame? A pesquisa de sangue oculto deve ser realizada por homens e mulheres a partir dos 40 anos, com periodicidade anual ou a critério médico. Indivíduos que possuem histórico familiar de câncer colo-retal, especialmente os parentes de primeiro grau, como pai, mãe e irmãos, devem realizar anualmente o exame independente da idade que possuam. Caso o exame seja positivo, deve-se proceder à colonoscopia para localizar o motivo do sangramento. Informações úteis aos pacientes A pesquisa de sangue oculto deve ser realizada em amostras fecais recentemente emitidas. A análise de três amostras aumenta a sensibilidade do exame, já que algumas lesões possuem sangramentos intermitentes. Caso o exame não seja realizado por meio de ensaios imunocromatográficos, os pacientes deverão ser submetidos a uma dieta rígida, com restrição da utilização de alguns medicamentos ou vitaminas que poderão interferir nos resultados do exame, ocasionando, muitas vezes, resultados falso- positivos e preocupações desnecessárias. Os principais interferentes são alguns tipos de carne (principalmente a vermelha), nabos, rabanetes, vitaminas (particularmente a vitamina C), ferro, ácido acetilsalicílico e outros anti-inflamatórios não esteroidais, como o ibuprofeno, utilizado no tratamento da artrite reumatóide e outras doenças inflamatórias. Até mesmo a utilização de cremes dentais clorofilados pode favorecer resultados errôneos. O consumo desses interferentes deve ser suspenso em três a cinco dias previamente à coleta da amostra. Carne branca (peixe e frango), enlatados, pipoca, amendoim e farelos de cereais (trigo e aveia) podem ser consumidos em pequenas quantidades. Já os demais vegetais (crus ou cozidos), alface, espinafre, milho e frutas como uvas, ameixas e maçãs podem ser consumidos livremente. Caso o procedimento seja realizado por meio de ensaios imunocromatográficos, não há necessidade da realização de dietas nem de restrição ao consumo de medicamentos e outros interferentes, já que utilizam uma metodologia que não sofre interferência dos mesmos. Considerações importantes A colonoscopia examina toda a extensão do intestino. Todos os pólipos encontrados serão retirados durante o procedimento, já que 90% deles podem ser removidos sem dor e com segurança, sendo posteriormente analisados microscopicamente por médicos patologistas. Caso algum tumor seja encontrado, uma biópsia será realizada. Lembre-se que, quanto mais cedo o câncer for encontrado, maior será a chance de cura. A prevenção é a melhor forma de evitar o desenvolvimento de câncer colo-retal. Portanto, todos se beneficiam ao realizar a pesquisa de sangue oculto anualmente. Aliado a esse fato, um estilo de vida saudável através da realização de atividades físicas regulares, dieta rica em fibras (vegetais, frutas e saladas), com menor ingestão de carnes, manutenção do peso adequado para a idade do paciente (estipulado pelo cálculo do Índice de Massa Corporal, o IMC), o consumo moderado de bebidas alcoólicas e a não-utilização do fumo contribuem para uma vida mais saudável.