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RELATÓRIO DE PRÁTICA 01 Beatriz de Nazaré Baia Souza 04080615 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: Microbiologia Clínica DADOS DO(A) ALUNO(A): NOME: Beatriz de Nazaré Baia Souza MATRÍCULA: 04080615 CURSO: Farmácia POLO: Parque Shopping PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): Fabio Coelho TEMA DE AULA: TÉCNICAS DE SEMEIO EM BACTERIOLÓGIA CLÍNICA; COLORAÇÃO DE ZIEHL-NEELSEN; COPROCULTURA E IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS; TESTE DE DIFUSÃO EM DISCO DE PAPEL-ANTIBIOGRAMA RELATÓRIO: 1. TÉCNICAS DE SEMEIO EM BACTERIOLÓGIA CLÍNICA A. Qual a finalidade da técnica de esgotamento na rotina da microbiologia clínica? A finalidade de isolar e identificar diferentes microorganismos presentes em uma amostra, permitindo um diagnóstico preciso das infecções bacterianas ou fúngicas e orientando o tratamento adequado para cada caso. B. Descreva como deve ser realizada a técnica de semeio em rede e para qual cultura é destinada na bacteriologia. É realizada através da distribuição de uma pequena quantidade de uma amostra biológica em um meio de cultura sólido, usando uma alça em formato de "L" para espalhar o material de forma homogênea. Essa técnica é destinada principalmente para o cultivo de bactérias aeróbias e anaeróbias facultativas, permitindo o crescimento e isolamento de diferentes cepas bacterianas para posterior identificação e testes de sensibilidade a antibióticos. C. Adicione uma ou mais fotos do resultado do semeio em estrias. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ D. Para qual cultura microbiológica deve ser utilizado o semeio em tapete com swab estéril. É utilizado principalmente para a coleta e cultivo de microorganismos presentes em superfícies, tais como bancadas, equipamentos médicos, maçanetas, entre outros. Essa técnica permite a detecção e quantificação de bactérias, fungos e outros patógenos presentes nessas superfícies, sendo amplamente utilizada na vigilância epidemiológica e controle de infecções hospitalares. 2. COLORAÇÃO DE ZIEHL-NEELSEN A. Discutir qual a finalidade da técnica de coloração de Ziehl-Neelsen, bem como apresentar qual a estrutura dessas bactérias que as torna evidentes apenas quando submetidas a técnicas de colorações especiais. A técnica é utilizada para a identificação de bactérias álcool-ácido resistentes, especialmente o Mycobacterium tuberculosis, agente causador da tuberculose. Essas bactérias possuem uma parede celular rica em lipídios, como o ácido micólico, que as torna impermeáveis a corantes comuns, como o cristal violeta. Portanto, a coloração de Ziehl-Neelsen utiliza o corante fucsina básica, que é retido pela parede celular lipídica das bactérias álcool-ácido resistentes e são evidenciadas na coloração pelo uso do álcool-ácido. Assim, as bactérias ficam coradas em vermelho vívido, facilitando sua visualização ao microscópio. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ B. Descrever as etapas do método de Ziehl-Neelsen para a coloração de BAAR. Envolve as etapas: Preparação da Amostra: Fixar a amostra em uma lâmina. Coloração Primária: Aplicar o corante fucsina fenólica e aquecer suavemente para facilitar a penetração do corante. Descoloração: Lavar a lâmina com álcool ou ácido para remover a fucsina das células não resistentes. Contracoloração: Aplicar um corante de contraste, como azul de metileno, para colorir as células não BAAR. Observação: Examinar ao microscópio; os BAAR aparecerão em vermelho, enquanto as outras células ficarão em azul. Essas etapas ajudam a destacar e identificar a presença de micobactérias resistentes, como o Mycobacterium tuberculosis, facilitando o diagnóstico da tuberculose. C. Como as bactérias BAAR e NÂO-BAAR se apresentam após essa coloração. Após a coloração para BAAR (Bacilo Álcool-Ácido Resistente), as bactérias como o Mycobacterium tuberculosis se apresentam coradas de vermelho, enquanto as bactérias não-BAAR não são coradas por essa técnica. Isso ocorre devido à presença da parede celular espessa e lipídica nas bactérias BAAR, que as torna resistentes à descoloração pelo álcool utilizado no procedimento. Já as bactérias não-BAAR não possuem essa resistência e acabam se corando de outra cor durante a coloração diferencial. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ 3. COPROCULTURA A. Qual a finalidade da coprocultura e qual material biológico é utilizado? É um exame laboratorial que tem como finalidade identificar bactérias patogênicas presentes no trato gastrointestinal, causadoras de infecções intestinais. Para realizar o exame, é utilizado o material biológico das fezes do paciente, que contém informações importantes sobre a presença de agentes infecciosos no intestino. A análise da coprocultura ajuda no diagnóstico e tratamento adequado de infecções bacterianas intestinais, permitindo a identificação do agente causador e a escolha do antibiótico mais eficaz para o tratamento. B. Cite os principais meios de cultura utilizados para realização do isolamento e identificação das bactérias. Os principais meios de cultura utilizados para o isolamento e identificação de bactérias são: Ágar sangue: rico em nutrientes e utilizado para o crescimento de uma grande variedade de bactérias, permitindo também a identificação de padrões de hemólise. Meio seletivo: contém substâncias que inibem o crescimento de certos tipos de bactérias, permitindo o crescimento de um grupo específico de microrganismos. Meio diferencial: permite distinguir entre diferentes tipos de bactérias com base em características bioquímicas, como a fermentação de açúcares ou produção de determinadas enzimas. Meio enriquecido: contém nutrientes extras para favorecer o crescimento de bactérias fastidiosas ou que necessitam de condições específicas para se desenvolverem. Esses meios de cultura são fundamentais para o crescimento e identificação das bactérias presentes em uma amostra clínica, auxiliando no diagnóstico e tratamento adequado de infecções bacterianas. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ C. Adicione uma ou mais fotos do resultado. D. Cite quais os principais enteropatógenos que são pesquisados nos quadros de gastroenterites. Os principais pesquisados incluem: Bactérias: como Escherichia coli enteropatogênica, Salmonella, Shigella, Campylobacter e Yersinia. Vírus: como norovírus, rotavírus e adenovírus. Parasitas: como Giardia lamblia, Cryptosporidium e Entamoeba histolytica. Esses agentes causam infecções no trato gastrointestinal, levando a sintomas como diarreia, vômito, febre e dor abdominal. A identificação desses patógenos é essencial para o diagnóstico correto e o tratamento adequado das gastroenterites. 4. TESTE DE DIFUSÃO EM DISCO DE PAPEL-ANTIBIOGRAMA A. Qual a finalidade do teste de difusão em disco de papel- Antibiograma? Cite os critérios de interpretação dos resultados segundo BrCAST. Também conhecido como antibiograma, é utilizado para determinar a sensibilidade de bactérias a diferentes antibióticos. Os critérios de interpretação dos resultados segundo o BrCAST (Brazilian Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing) levam em consideração a formação de zonas de inibição ao redor dos discos de antibióticos, classificando as cepas testadas como sensíveis, intermediárias ou resistentes com base nos diâmetros das zonas de inibição. Estescritérios auxiliam na escolha do tratamento antibiótico mais eficaz contra a infecção bacteriana. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ B. Descreva as etapas para realização da técnica de antibiograma. A técnica de antibiograma envolve as seguintes etapas: primeiro, isola-se a bactéria de interesse em meio de cultura; em seguida, prepara-se uma suspensão bacteriana padronizada. Em placas de ágar, espalha-se a suspensão, criando uma camada uniforme. Depois, coloca-se discos de papel impregnados com diferentes antibióticos sobre o ágar. A placa é incubada por 18 a 24 horas a 35-37 °C. Após a incubação, observa-se a formação de halos de inibição ao redor dos discos, medindo-se seus diâmetros para determinar a sensibilidade ou resistência da bactéria a cada antibiótico testado. C. Adicione uma ou mais fotos do resultado D. Qual meio de cultura de escolha para realização do antibiograma? Utilizado para determinar a sensibilidade de bactérias a diferentes antibióticos. O meio de cultura de escolha para realização do antibiograma é o agar Mueller-Hinton, que possui composição e pH específicos que garantem um crescimento uniforme das bactérias e resultados confiáveis durante o teste de sensibilidade aos antibióticos. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ FOTOS AULA PRATICA 01 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ RELATÓRIO DE PRÁTICA 02 Beatriz de Nazaré Baia Souza 04080615 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: Microbiologia Clínica DADOS DO(A) ALUNO(A): NOME: Beatriz de Nazaré Baia Souza MATRÍCULA: 04080615 CURSO: Farmácia POLO: Parque Shopping PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): Fabio Coelho TEMA DE AULA: CONFECÇÃO DE ESFREGAÇOS (GRAM .BAAR) E PREPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA; IDENTIFICAÇÃO LABORATORIAL DE COCOS GRAM-POSITIVOS e IDENTIFICAÇÃO LABORATORIAL DE ENTEROBACTÉRIAS; UROCULTURA E IDENTIFICAÇÃO DOS PRINCIPAIS AGENTES RELATÓRIO: 1. CONFECÇÃO DE ESFREGAÇOS (GRAM.BAAR) E PREPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA A. No que se baseia a técnica de coloração de Gram em relação a classificação das bactérias? É utilizada na microbiologia para classificar as bactérias com base em suas características de parede celular. A coloração de Gram envolve a aplicação de corantes violeta de cristal e safranina para diferenciar as bactérias em Gram-positivas e Gram-negativas. As bactérias positivas retêm o corante violeta, aparecendo roxas sob o microscópio, devido à espessa camada de peptidoglicano em sua parede celular. Porém, as bactérias negativas perdem o corante violeta durante o processo de coloração e são coradas de rosa pela safranina, devido à camada fina de peptidoglicano e presença de uma membrana externa. Essa diferenciação é crucial na identificação e tratamento de infecções bacterianas RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ B. Qual a estrutura bacteriana permite que após a coloração essa diferenciação tintorial ocorra? E descreva como esta estrutura se apresenta em ambos os tipos bacterianos. A estrutura bacteriana que permite a diferenciação tintorial na coloração de Gram é a parede celular. Nas bactérias Gram-positivas, a parede celular é espessa, composta principalmente por peptidoglicano, retendo o corante violeta e resultando em coloração roxa. Já nas bactérias Gram-negativas, a parede celular é fina, com camada de peptidoglicano externa à membrana lipídica, o que permite a perda do corante violeta e a coloração rosa pela safranina. Essas diferenças estruturais permitem a classificação das bactérias com base na coloração de Gram. C. Descreva as etapas para preparação dos meios de cultura. Qual a classificação dos meios quanto consistência? A preparação de meios de cultura consiste em etapas como a pesagem dos componentes, dissolução em água destilada, ajuste do pH, esterilização e solidificação (se necessário). Os meios de cultura podem ser classificados quanto à consistência em líquidos, semi-sólidos e sólidos. Os líquidos não contêm agentes solidificantes, os semi- sólidos têm baixo teor de agentes solidificantes e os sólidos possuem agentes solidificantes em concentração mais alta para formar uma consistência firme. D. Adicione uma ou mais fotos dos resultados. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ 2. IDENTIFICAÇÃO LABORATORIAL DE COCOS GRAM-POSITIVOS A. Qual a prova inicial para diferenciação dos Staphylococcus e Streptococcus? Descreva no que se baseia a técnica. A prova inicial para diferenciar os Staphylococcus dos Streptococcus é a prova de catalase. Essa técnica baseia-se na capacidade dos Staphylococcus de produzir a enzima catalase, que converte peróxido de hidrogênio em água e oxigênio, gerando efervescência. Os Streptococcus, por sua vez, são catalase-negativos, ou seja, não produzem essa enzima e não geram efervescência quando expostos ao peróxido de hidrogênio. Assim, a presença ou ausência de efervescência na amostra bacteriana permite diferenciar os Staphylococcus dos Streptococcus de forma rápida e simples. B. Esquematize a identificação dos Staphylococcus e dos Streptococcus. Prova de Catalase: Staphylococcus: Positiva (produzem efervescência) e negativa (não produzem efervescência). Teste de Coagulase: Staphylococcus aureus: Positivo (coagulase positiva) e outras espécies: Negativo (coagulase negativa). Hemólise em Ágar Sangue: Staphylococcus: Podem ser alfa, beta ou não hemolíticos. Podem ser alfa, beta ou gamma hemolíticos. Esses testes combinados podem ajudar na diferenciação entre Staphylococcus e Streptococcus de forma eficaz e precisa. C. Adicione uma ou mais fotos dos resultados. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ D. Analise as seguintes características sobre determinado microrganismo: são cocos Gram-positivos, não produzem a enzima catalase nem a coagulase; produzem alfa hemólise, hidrolisam a esculina em bile e crescem em uma concentração de 6,5% de NaCl. Essas características estão associadas a qual coco Gram positivo? As principais características que o identificam são: cocos Gram-positivos, ausência de catalase e coagulase, produção de alfa hemólise, hidrólise da esculina em bile e crescimento em uma concentração de 6,5% de NaCl. Essas particularidades são consistentes com as propriedades do Streptococcus bovis. 3. IDENTIFICAÇÃO LABORATORIAL DE ENTEROBACTÉRIAS A. Quais as três características gerais que classificam uma bactéria pertencente a família Enterobacteriaceae? As três características gerais que classificam uma bactéria da família Enterobacteriaceae são: são bacilos gram-negativos, geralmente fermentadores de glicose, e apresentam a capacidade de reduzir nitratos a nitritos. Além disso, muitas espécies dessa família são móveis devido à presença de flagelos. B. Quais são as principais provas bioquímicas para a identificação de enterobactérias? As principais para a identificação de enterobactérias incluem: Teste de fermentação da glicose. Teste de produção de indol. Teste de produção de gás a partir da glicose (fermentação gasosa). Teste de produção de ácido a partir de carboidratos (teste de citrato, teste de Voges-Proskauer,teste da urease, entre outros). RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ C. No que se baseia a prova de fermentação de açúcares através do meio TSI (Ágar açúcar triplo ferro). Descreva as principais reações neste meio. Baseia-se na capacidade das bactérias de fermentar glicose, lactose e sacarose, além de produzir gás e sulfeto de hidrogênio. O meio contém três açúcares (glicose, lactose e sacarose), um indicador de pH (fenol vermelho) e ferro. As principais reações incluem a fermentação dos açúcares, que resulta na produção de ácidos, alterando a cor do meio de vermelho para amarelo. A fermentação da glicose, que ocorre primeiro, provoca uma mudança de cor na parte inferior do tubo (onde o meio é mais anaeróbico). Se a bactéria fermentar a lactose ou sacarose, a mudança de cor se estende até a superfície. A produção de gás é indicada pela formação de bolhas ou levantamento do meio, enquanto a produção de sulfeto de hidrogênio resulta em uma coloração preta devido à formação de sulfeto ferroso. Assim, a interpretação dos resultados permite a identificação de diferentes grupos de bactérias. D. Adicione uma ou mais fotos dos resultados. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ 4. UROCULTURA E IDENTIFICAÇÃO DOS PRINCIPAIS AGENTES A. Qual a diferença entre exame de urina tipo I e urocultura? O exame de urina tipo I, também conhecido como EAS (Elementos Anormais do Sedimento), é um teste laboratorial que analisa a composição física, química e microbiológica da urina, buscando identificar possíveis alterações, como presença de células sanguíneas, proteínas, glicose, cristais, entre outros. Já a urocultura é um exame específico para detectar a presença de bactérias na urina, sendo indicado principalmente para o diagnóstico de infecções do trato urinário. Enquanto o exame de urina tipo I fornece informações amplas sobre a condição da urina, a urocultura é mais direcionada para identificar a presença de agentes infecciosos, como bactérias, permitindo um diagnóstico mais preciso de infecções urinárias. B. Descrever as principais bactérias associadas a infecções do trato urinário (ITU). As (ITU) podem ser causadas por diferentes tipos de bactérias, sendo as principais a Escherichia coli (E. coli), que normalmente habita o intestino, mas pode migrar para o trato urinário; Staphylococcus saprophyticus, mais comum em mulheres jovens; Proteus mirabilis, que pode formar cálculos renais; Klebsiella pneumoniae, associada a infecções hospitalares; Enterococcus faecalis, presente no intestino e frequentemente relacionado a infecções urinárias nosocomiais; e Serratia spp., geralmente encontrada em ambientes hospitalares. Essas bactérias são as mais comumente associadas a infecções do trato urinário e podem causar sintomas como dor ao urinar, urgência urinária, frequência aumentada de micção e desconforto na região pélvica. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ C. Cite os principais meios utilizados para realização da urocultura. Descrever no que se baseia os meios cromogênicos. Os principais meios incluem: Meio CLED (Cystine Lactose Electrolyte Deficient): Permite a diferenciação entre lactose fermentadoras e não fermentadoras. Meio MacConkey: Isola bactérias gram-negativas e diferencia lactose fermentadoras e meio XLD (Xilose Lisina Desoxicolato): Usado para identificar enter. D. Adicione uma ou mais fotos dos resultados. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ FOTOS AULA PRATICA 2 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 02 DATA: ______/______/______ REFERENCIAS https://bvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/manual_microbiologia_completo.pdf O M. tuberculosis, a coloração de Ziehl-Neelsen e a interpretação do BAAR. ([s.d.]). Com.br. 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