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BIOLOGIA CELULAR DE MICROORGANISMOS Prof. Marcelo Pilonetto Curitiba, 2011 Prof. Marcelo Pilonetto 2 Tópicos de estudo • O mundo microbiano • Classificação Microbiana • História da Microbiologia • Anatomia celular procariota e eucariota Prof. Marcelo Pilonetto 3 O mundo microbiano • É animal,vegetal ou mineral ? • Seres microscópicos: – Bactérias, algas, fungos, protozoários e vírus • Tendência natural à associação com danos: – Doenças infecciosas, alimentos estragados, decomposição Prof. Marcelo Pilonetto 4 O mundo microbiano • Contudo são essenciais ao equilíbrio ambiental e ao ser humano: – Fixação de nitrogênio, decomposição e reabsorção de nutrientes, fotossíntese; – Microbiota normal (proteção), síntese de vitaminas e de antibióticos; – Alteração benéfica de alimentos (fermentação alcoólica, láctica, acética...) – Síntese de enzimas e substâncias químicas Prof. Marcelo Pilonetto 5 O mundo microbiano • Manipulação gênica: – Síntese de novos produtos (insulina, antígeno Hbs, hGH...) • Conhecimento dos microorganismos: – Prevenção de doenças; – Controle de epidemias; – Tratamento antimicrobiano; • Nomenclatura: – Binome científico, seg. Carolus Linnaeus (1735) 6 Classificação Microbiana Reino Fungii (leveduras) Reino Animal (helmintos) Reino Vegetal Reino Protista (protozoários) Reino Monera (bactérias e algas) Prof. Marcelo Pilonetto 7 Classificação Microbiana Prof. Marcelo Pilonetto 8 Diferenciação dos Microorganismos Parede celular Membrana celular Material genético Membrana Nuclear VIRUS Acelular Acelular DNA ou RNA Ausente BACTÉRIAS Peptideoglicano Bicamada lipídica DNA e RNA Ausente FUNGOS Quitina Bicamada lipídica DNA e RNA Presente PROTOZOA Ausente Bicamada lipídica DNA e RNA Presente Prof. Marcelo Pilonetto 9 Diferenciação dos Microorganismos Nº de células Reprodução Organelas Locomoção VIRUS Acelular Intracelular obrigatória Ausentes Ausente BACTÉRIAS Unicelular Assexuada Ribossomos Flagelos FUNGOS Uni/Pluricelular Assex/sexuada Várias Imóveis PROTOZOA Uni/Pluricelular Assex/sexuada Várias Flagelos,cílios, pseudópodos Prof. Marcelo Pilonetto 10 Diferenciação dos Microorganismos Tamanho (diâmetro) VIRUS 0,02 a 0,20 µM BACTÉRIAS 0,50 a 2,00 µM FUNGOS 2,00 a 10,00 µM PROTOZOA 10,00 a 50,00 µM Prof. Marcelo Pilonetto 11 História da Bacteriologia • 4 bilhões de anos atrás- origem da vida? – Oparin • 8.000 a 3000 A.C.: vinho, cerveja e pães • 1000 A.C.: M. tuberculosis e H. pylori em múmias • 1665 – Robert Hooke: cortiça - células • 1673 – Leeuwenhoek: animalículos • 1668-1861 – Abiogênese X Biogênese – Redi, Needham, Spallanzani, Virchow e Pasteur Prof. Marcelo Pilonetto 12 História da Bacteriologia • 1798 – Jenner: vacinas • 1840 – Semmelweis: febre puerperal e mãos • 1860-80 – Pasteur: biogênese, fermentação, estabelecimento de doenças, vacinas • 1876 – Koch: postulados • 1910 – Erlich: qumioterapia (arsênico) • 1928 – Fleming: Penicillium – penicilina • 1930-45 – Era dos antibióticos Prof. Marcelo Pilonetto 13 História da Bacteriologia • 1940 – Invenção do microscópio ótico • 1953 – Watson e Crick: estrutura do DNA • 1971 – Nathans, Smith, Arber: enzimas de restrição • 1982 – Warren e Marshal: H. pylori • 1983 – Mc Clintok: transposons • 1993 – Kary Mullis: reação de polimerase em cadeia • 1997 – Prusiner: prions Anatomia Celular Procariota e Eucariota Prof. Marcelo Pilonetto 15 Procariotos x Eucariotos Prof. Marcelo Pilonetto 16 Citologia bacteriana Prof. Marcelo Pilonetto 17 Prof. Marcelo Pilonetto 18 Membrana citoplasmática Prof. Marcelo Pilonetto 19 fosfolipídios proteínas transmembrânicas proteínas não-transmembrânicas espaço inter-lamelar Prof. Marcelo Pilonetto 20 Prof. Marcelo Pilonetto 21 Prof. Marcelo Pilonetto 22 Mesossomo Prof. Marcelo Pilonetto 23 DNA cAMP ADP ATP Prof. Marcelo Pilonetto 24 Prof. Marcelo Pilonetto 25 Parede celular de bactérias Prof. Marcelo Pilonetto 26 Prof. Marcelo Pilonetto 27 Parede celular de gram-positivos Prof. Marcelo Pilonetto 28 1 5 -5 0 n m 8 n m LTA Prof. Marcelo Pilonetto 29 Prof. Marcelo Pilonetto 30 Prof. Marcelo Pilonetto 31 Prof. Marcelo Pilonetto 32 Parede celular de gram-negativos Prof. Marcelo Pilonetto 33 Prof. Marcelo Pilonetto 34 8 n m 8 n m 1 2 n m membrana plasmática periplasma membrana externa Prof. Marcelo Pilonetto 35 porinas Prof. Marcelo Pilonetto 36 lipopolissacarídio (LPS, endotoxina) Prof. Marcelo Pilonetto 37 lipopolissacarídio (LPS, endotoxina) Prof. Marcelo Pilonetto 38 Coloração diferencial de Gram Prof. Marcelo Pilonetto 39Gram + Gram - Prof. Marcelo Pilonetto 40 Parede celular de micobactérias Prof. Marcelo Pilonetto 41 Prof. Marcelo Pilonetto 42 Cápsula e camada limosa Prof. Marcelo Pilonetto 43 cápsula camada limosa Prof. Marcelo Pilonetto 44 cápsula camada limosa Prof. Marcelo Pilonetto 45 Prof. Marcelo Pilonetto 46 Flagelos Prof. Marcelo Pilonetto 47 Prof. Marcelo Pilonetto 48 Importância do..... Prof. Marcelo Pilonetto 49 Em Gram-negativos Prof. Marcelo Pilonetto 50 Em espiroquetas Prof. Marcelo Pilonetto 51 Pili ou fímbrias Prof. Marcelo Pilonetto 52 porção adesina pilina Prof. Marcelo Pilonetto 53 Prof. Marcelo Pilonetto 54 Prof. Marcelo Pilonetto 55 Prof. Marcelo Pilonetto 56 F-pilus Prof. Marcelo Pilonetto 57 pilina Prof. Marcelo Pilonetto 58 conjugação Prof. Marcelo Pilonetto 59 conjugação Prof. Marcelo Pilonetto 60 Ribossomos Prof. Marcelo Pilonetto 61 Prof. Marcelo Pilonetto 62 sítio E sítio Asítio P sub-unidade 50S 60% proteína (35 proteínas) 40% rRNA (23S+5S) sub-unidade 30S 60% proteína (21proteínas) 40% rRNA (16S) 5’ 3’ MORFOLOGIA BACTERIANA Tamanho dos microorganismos • Protozoários – 15 a 30 µM • Fungos – 5 a 15 µM • Bactérias – 0,5 a 2,0 µM – 1.000 bactérias igual a 1 milímetro – 1.000.000 de bactérias igual a um metro • Vírus – 0,02 a 0,20 µM Avaliação da Morfologia • Propriedades: – Forma •coco, •bacilo (reto, curvo, vírgula...), •cocobacilo, •espirilo, •espiroqueta Avaliação da Morfologia • Propriedades: – Arranjo • isolado, • dois a dois, • tétrade (4 a 4), • sarcina (8 a 8), • cadeia, • cacho – Propriedade tintorial • Gram Positivo – Roxo • Gram Negativo – vermelho-róseo Microscopia - Finalidades • Observar a presença de microorganismos • Quantificar • Avaliar propriedades morfotintoriais • Identificação presuntiva do microorganismo • Visualizar outros elementos figurados Princípio do Método de Gram Ultra-estrutura bacteriana Ultra-estrutura da parede bacteriana
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