Aula 4- Diagnosticos laboratorial Cocos gram possitivos

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Profa. Dra. Melyna C. Leite de Andrade
Bacteriologia Clínica
Aula 4. Cocos Gram positivos de interesse clínico: Staphylococcus. 
Principais provas de identificação.
Cocos Gram positivos
Gênero Staphylococcus
• Família: Micrococacceae;
• Morfologia no Gram: células
esféricas que se arranjam em
cachos;
• São anaeróbios facultativos;
• Mesófilos (18 a 40°C);
• São imóveis;
• Não formam esporos;
• Não possuem cápsulas (exceto S.
aureus cápsula polissacarídica);
• Demais espécies: camada
mucoide/limosa.
Gênero Staphylococcus
• Em meio de cultura sólido: colônias medindo 1mm de diâmetro;
• Crescimento rápido em condições aeróbicas ou microaerófilas;
• Colônias cremosas, pigmentadas, variando de brancas a amareladas:
- S. aureus: acinzentadas e amarelo dourado;
- S. epidermidis: cinza a branca.
• Odor característico (queijo);
• Apresentam sensibilidade variável a muitos antimicrobianos, produção
de B-lactamases e resistência à meticilina/oxacilina.
Gênero Staphylococcus
Staphylococcus spp. em ágar nutrientes
Staphylococcus spp. em ágar sangue de carneiro a 
5%
Gênero Staphylococcus
• O gênero compreende cerca de 35 espécies;
• Microbiota normal: colonizam pele e mucosas (tratos respiratório,
urogenital e gastrointestinal);
• Podem ser encontrados no solo, água, plantas e objetos;
Staphylococcus aureus
Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus saprophyticus
Staphylococcus haemolyticus
Staphylococcus lugdunensis
Espécies 
associadas a 
doenças em 
humanos: 
Gênero Staphylococcus
Staphylococcus aureus
•Espécie mais importante do gênero;
• “aureus”: cor do pigmento característico das
colônias;
• Microbiota normal: pele, especialmente nariz e
períneo;
•Pode causar uma variedade de processos
infecciosos em seres humanos: bacteremia,
sepse, etc.;
•Sítios de infecção: orofaringe, sangue, feridas
cirúrgicas, pontas de cateter, dreno, abcessos,
furúnculos, etc.
Fatores de virulência: Toxinas e Manifestações clínicas:
• Exotoxinas (superantígenos):
- Estimulam células T à liberar citocinas;
• Enterotoxinas:
- Contamina os alimentos;
- Estimula o centro do vômito (tronco encefálico), ligando-se a
receptores neurais no intestino;
• Citotoxinas:
- α-toxina: lise de leucócitos e hemólise. Mais comum em amostras de
origem humana;
- Leucocidina: destrói leucócitos e tem ação hemolítica;
Staphylococcus aureus
• Toxina da Síndrome do Choque Tóxico (TSST-1):
Síndrome do Choque Tóxico
- Condição rara;
- Antigamente: uso de absorventes internos;
- Atualmente: outros focos infecciosos
(ex.: feridas operatórias)
- TGI (Infecções do trato gastrointestinal), sistemas:
muscular, nervoso, renal, hepático e hematológico.
Fatores de virulência: Toxinas e Manifestações clínicas:
Staphylococcus aureus
• Toxina esfoliativa: Síndrome da Pele
Escaldada:
- Eritema (vermelhidão) localizado que
cobre o corpo inteiro em dois dias;
- Degrada moléculas de adesão do epitélio
cutâneo, causando a separação da derme
e epiderme.
Fatores de virulência: Toxinas e Manifestações clínicas:
Staphylococcus aureus
Outras manifestações clínicas:
• Infecções cutâneas:
- Impetigo bolhoso: infecção
superficial, que começa com mácula
e evolui para vesículas, as quais
sofrem ruptura, formando uma
crosta.
- Foliculite: infecção nos folículos
pilosos. Lesões avermelhadas e
dolorosas. Ex.: terçol.
Staphylococcus aureus
Outras manifestações clínicas:
- Infecções no trato urinário;
- Pneumonia e empiema: a pneumonia pode
ocorrer por aspiração ou através de um
foco distante. O empiema ocorre pela
presença de exsudato no espaço pleural.
Staphylococcus aureus
• Cocos Gram-positivos dispostos em cachos;
• Cor das colônias: branca;
• Microbiota normal da pele (90% microbiota da pele e mucosas).
S. epidermidis
S. aureus
Staphylococcus epidermidis
• Fatores de virulência:
- Toxinas: hemolisina: ajuda na aderência para produção do biofilme;
- Enzimas:
*Cisteína protease (elastase): degrada componentes do sistema
imune;
*Metaloprotease extracelular (SepA): degrada dermacidina;
*Lipases (GenC e GenD): papel na colonização da pele.
Staphylococcus epidermidis
• Colônias de cor branca;
• Habitat: microbiota normal da pele e
mucosa geniturinária (vagina);
• Doenças mais comuns:
- Mulheres: cistite (20 a 40 anos com
vida sexual ativa);
- Homens: ITU;
• Diferencia-se das demais cepas de
Staphylococcus spp. por apresentar
resistência intríseca à novobiocina.
Staphylococcus saprophyticus
Gênero Staphylococcus
Gênero Staphylococcus
Identificação laboratorial:
• 1º passo: Identificar as características de crescimento em diferentes
meios de cultura;
S. epidermidis em ágar 
sangue
S. aureus S.epidermidis
S. saprophyticus (ágar CLED)
Ágar Sangue
Diagnóstico
Identificação laboratorial:
• 2º passo: Teste da catalase;
- Pode ser realizado em lâmina, placa ou tubo;
- Todos os Staphylococcus spp. são catalase positivos.
2 H2O2 2 H2O + ↑O2
Catalase
Diagnóstico
Identificação laboratorial:
• 3º passo: Teste da coagulase
- S. aureus é coagulase positivo.
- Os demais Staphylococcus spp. são coagulase negativos.
- Outro teste: Aglutinação para Proteína A: aglutinação com látex
(partículas recobertas de fibrinogênio e IgG). Positivo para S. aureus
Diagnóstico
-
+/-
Diagnóstico Cocos Gram positivos
Gênero Streptococcus 
• Do grego STREPTOS, “dobrado, retorcido”, e
KOKKOS, “grão, semente, pequeno fruto”;
• Microbiota normal: mucosas do trato
respiratório superior, trato urogenital inferior e trato
digestório;
• Importância clínica: grupo heterogêneo que
causa diferentes doenças, principalmente de pele e
tecidos;
• Bactérias esféricas ou ovoides;
• Cocos Gram-positivos;
• Gram: arranjo celular em forma 
de cadeias ou duplas;
• Catalase-negativos.
Gênero Streptococcus 
• Família Streptococcaceae: Cocos Gram-positivos
- Catalase negativos
• Espécies pertencentes a essa família:
- Streptococcus spp.
- Enterococcus spp.
- Helcococcus spp. (pele humana);
- Lactococcus spp., Pediococcus spp. e Leuconostoc spp. (alimentos e
no trato intestinal);
- Aerococcus spp. (pele humana);
- Outros (Vagococcus spp., Weissella spp., Tetragenococcus spp.,
Gemella spp., Alloiococcus spp. e Facklamia spp.).
Gênero Streptococcus 
• Nutricionalmente exigentes
(fastidiosos) necessitam de sangue ou
líquidos teciduais para seu crescimento
(exceto Enterococcus spp.);
• Anaeróbios facultativos;
• Não esporulados e imóveis;
• Algumas espécies podem crescer em
microaerofilia e em anaerobiose.
Gênero Streptococcus 
• Crescem bem em ágar sangue e em
caldo nutriente com glicose;
• Formam colônias puntiformes e/ou
pequenas (0,5 a 0,75 mm);
• Colônias transparentes a branco-
acinzentadas, geralmente translúcidas;
• As colônias podem ser alfa (α), beta (β)
ou gama (γ) hemolíticas em ágar sangue.
Gênero Streptococcus 
• Classificação dos Streptococcus:
•
1) Produção de hemolisinas;
α-hemólise: 
- Hemólise incompleta
Exemplos: S. pneumoniae, S. do 
grupo viridans
β-hemólise: 
- Hemólise completa
Exemplos: S. pyogenes, S. 
agalactiae
2) Propriedades sorológicas: ausência/presença de antígenos 
específicos: Grupos de Lancefield;
3) Testes bioquímicos: catalase, Teste PYR, Fator CAMP, etc.
Gênero Streptococcus 
• Classificação dos estreptococos:
Rebecca Craighill Lancefield:
- Classificação sorológica é baseada na presença
de carboidratos antigênicos na superfície celular
das bactérias:
Classificação de Lancefield
Grupos A, B, C, F Grupo D + Enterococcus spp.
polissacarídeos ou ácidos lipoteicoicos
Rebecca Craighill Lancefield
(1895-1981)
- Técnicas imunológicas: precipitação em tubo capilar e aglutinação
pelo látex;
- Grupos de Lancefield: A, B, C, D, E, F, G, H, K, L, M, N,O, P, Q, R, S,
T, U e V;
Obs.: Essa classificação só tem utilidade para os Streptococcus
β-hemolíticos.
Aglutinação pelo látex
Classificação de Lancefield
- São β-hemolíticos;
- Patógeno humano: mais frequente na
pele e mucosas;
- Infecções das vias aéreas superiores(faringo-amigdalites), febre reumática,
glomerulonefrite estreptocócica e doenças
da pele (piodermites e erisipela);
- Transmissão: vias aéreas ou contato;
- Tratamento: penicilina ou amoxicilina.
Se alérgico: eritromicina ou azitromicina.
Grupo A: S. pyogenes
Fatores de virulência: Toxinas e enzimas
1) Estreptolisina S:
- Não-imunogênica; porém, tóxica às células
(morte de leucócitos que fagocitam a bactéria);
- Hemolisina responsável pela β-hemólise em ágar sangue.
2) Estreptolisina O:
- antigênica anticorpos antiestreptolisina-O (ASLO);
- [ASLO]: diagnóstico de infecções estreptocócicas recentes;
- Inibe a fagocitose;
- Lisa hemácias e leucócitos.
Grupo A: S. pyogenes
Fatores de virulência: Toxinas e enzimas
3) Estreptoquinase (fibrinolisina): dissolve coágulos. Sua ação é bloqueada
pelo anticorpo antiestreptoquinase;
4) Desoxirribonuclease (antigênica): degrada o DNA;
5) Hialuronidase (antigênica): degrada ácido hialurônico poder invasivo.
Grupo A: S. pyogenes
Fatores de virulência: Toxinas e enzimas
5) Toxina eritrogênica, escarlatínica, pirogênica ou de Rick:
- Produzidas por estreptococos isolados de escarlatina (doença
infecciosa aguda exantema);
- A língua mostra-se com uma cor muito avermelhada e aspecto
inchado e com as papilas vermelhas (língua em framboesa).
Grupo A: S. pyogenes
Resumo das principais manifestações clínicas:
• Faringite: adesão das proteínas F e M à faringe;
• Febre reumática: formação de ASLO (anti-estreptolisina O);
• Escarlatina e choque: complicação decorrente das exotoxinas;
• Bacteremia supurativa;
• Glomerulonefrites;
• Erisipela;
Febre reumática –
eritema marginado e nódulos
Faringite
Grupo A: S. pyogenes
• Incolor no ágar sangue;
• Todos do grupo B são encapsulados;
• Microbiota normal da vagina;
• Colonização reto-vaginal da mulher grávida
(adere ao epitélio vaginal, placenta, células da
mucosa bucal e faríngea);
• Neonatal: Meningite e sepse;
• Maior causa de ITU em grávidas;
• Cistite e pielonefrite.
Grupo B: S. agalactiae
• Infecções em RN - ruptura prematura da placenta favorece a colonização
da criança;
• Pode penetrar nas células pulmonares → corrente sanguínea (meninges,
ossos e articulações) → Sepse
• Tratamento: Sensível - Penicilina, cefalosporinas e eritromicina.
Resistente - Cloranfenicol. Penicilina/ Gentamicina (infecção grave).
Infecção em recém-nascido por S. agalactiae
Grupo B: S. agalactiae
Teste de CAMP
• Por serem α-hemolíticos, apresentam-se
esverdeados em ágar sangue;
• Microbiota normal: trato respiratório,
principalmente da garganta;
• Doenças: pneumonia, otite, meningite, sepse;
• Tratamento: Penicilinas.
α-hemolíticos: S. pneumoniae
Fatores de virulência:
1) Cápsula:
- Principal fator de virulência dos pneumococos, 
confere resistência à fagocitose.
2) Parede celular:
- Possuem ácido teicoico e lipoteicoico: adesina.
3) Pneumolisina (Ply):
- Liberada quando o pneumococo sofre autólise;
- Tem ação hemolítica e é tóxica para quase todos os 
tipos de células eucarióticas.
Cápsula
α-hemolíticos: S. pneumoniae
• Doenças: endocardite;
• Microbiota normal: trato respiratório e urogenital;
• Transmissão: Sangue através de exodontia;
• S. mutans, S. salivarius, S. saguinis, S.mitis e S. anginosus;
• Tratamento: Penicilinas
Streptococcus do Grupo Viridans: 
α ou γ hemolíticos
Diagnóstico Cocos Gram positivos
Diagnóstico Cocos Gram positivos
Diagnóstico Cocos Gram positivos
Gênero Enterococcus
• Anteriormente: estreptococos do grupo D - características fisiológicas e
susceptibilidade a agentes físicos e químicos;
• Há mais de 30 espécies conhecidas;
- E. faecium e E. faecalis;
• Amplamente distribuídos na natureza (solo, água, plantas);
• Microbiota gastrointestinal;
• Doenças: ITU, endocardite e sepse;
• Tratamento: Penicilinas + Aminoglicosídeos.
Gênero Enterococcus
• Bactérias não-fastidiosas, crescem em
ágar CLED e ágar sangue ou em altas
concentrações de sais;
• Colônias: α, β ou γ-hemólise em ágar-
sangue;
• Não esporulados e imóveis.
Enterococcus faecalis em ágar CLED 
Enterococcus spp. em ágar sangue 
Gênero Enterococcus
Fatores de virulência:
1) Citolisina/hemolisina;
2) Substância de agregação:
- Proteína de superfície bacteriana (adesina filamentar);
- Adesão a células epiteliais.
3) Esp (Proteína de superfície celular):
- Adesão ao epitélio do trato urinário;
- Encontrada em cepas isoladas de bacteremias e endocardites;
- Facilita a formação de biofilmes.
Gênero Enterococcus
Diagnóstico Cocos Gram positivos
Sulfametoxazol + trimetropim: 
- Teste incubado ao ar ambiente, a 
35°C por 24horas;
- Qualquer halo indica sensibilidade 
grupos C e G.
• São β-hemolíticos;
• Oportunistas: pele, nariz, garganta, vagina e TGI;
• Podem causar: faringite, sinusite, otite, meningite, bacteremia,
endocardite.
Grupos C e G
Profa. Dra. Melyna C. Leite de Andrade
Bacteriologia Clínica
Aula 6. Cocos Gram positivos de interesse clínico: Staphylococcus e 
Streptococcus. Principais provas de identificação.
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	Slide 2: Cocos Gram positivos
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	Slide 4
	Slide 5
	Slide 6
	Slide 7
	Slide 8: Staphylococcus aureus
	Slide 9: Staphylococcus aureus
	Slide 10: Staphylococcus aureus
	Slide 11: Staphylococcus aureus
	Slide 12: Staphylococcus aureus
	Slide 13: Staphylococcus aureus
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	Slide 16
	Slide 17
	Slide 18
	Slide 19: Diagnóstico
	Slide 20: Diagnóstico
	Slide 21: Diagnóstico
	Slide 22: Diagnóstico Cocos Gram positivos
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	Slide 24
	Slide 25
	Slide 26
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	Slide 41: Diagnóstico Cocos Gram positivos
	Slide 42: Diagnóstico Cocos Gram positivos
	Slide 43: Diagnóstico Cocos Gram positivos
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	Slide 45
	Slide 46
	Slide 47
	Slide 48: Diagnóstico Cocos Gram positivos
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