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CENTRO UNIVERSITÁRIO LEONARDO DA VINCI NÚCLEO DE EDUCAÇÃO A DISTÂNCIA - NEAD RELATÓRIO DE PRÁTICA - ACADÊMICO IDENTIFICAÇÃO 1. Acadêmico: Julia do Amaral Santos 2. Matrícula: 4793498 3. Curso: Farmácia 4. Turma: fl214048sau 5. Disciplina: Parasitologia clínica 6. Tutor(a) Externo(a): Juliana Ayres Pellizzaro DADOS DA PRÁTICA 1. Título: Método de Hoffmann 2. Local: Laboratório virtual 3. Período: Noturno 4. Semestre: 1/2025 5. Data: 01/04/2025 INTRODUÇÃO Este método de análise parasitológica visa a identificar a presença de parasitos intestinais em uma amostra de fezes. A técnica baseia-se na concentração da amostra por sedimentação espontânea. A utilização da técnica de Hoffmann permite concentrar e agregar formas parasitárias encontradas em pequenas quantidades nas amostras, possibilitando sua detecção. A técnica pode ser realizada com amostras tanto frescas como preservadas, sendo frequentemente empregada na pesquisa de ovos de helmintos e de cistos de protozoários, que, por serem pesados, sedimentam com facilidade, depositando-se no fundo. Como parte do experimento, você deverá aprender as etapas para realizar a sedimentação do material e a confecção de lâminas com o sedimento para pesquisa de formas parasitárias ao microscópio óptico. OBJETIVOS Ao final deste experimento, você deverá ser capaz de: -Manipular diferentes equipamentos de laboratório;´ -Preparar as amostras fecais por meio do método de Hoffmann (sedimentação espontânea); -Confeccionar lâminas de microscopia com o sedimento; -Pesquisar a presença de ovos e larvas de helmintos e cistos de protozoários em lâminas com sedimento. MATERIAIS -Jaleco; -Luvas de procedimento; -Máscara; -Óculos; -Amostra de Fezes; -Solução Salina 0,85%; -Bastão de vidro; -Hipoclorito de sódio; -Lâmina; -Lamínula; -Pipeta de Pasteur; -Proveta de 150 mL com água destilada; -Funil; -Gaze; -Cálice 250 mL; -Béquer de 250 mL; -Microscópio; -Lugol. METODOLOGIA Higienize as mãos e coloque os equipamentos de proteção individual localizados no “Armário de EPIs”. Identifique o coletor e a lâmina, depois abra o coletor e coloque a amostra no béquer. Coloque 50 mL de água destilada no béquer e homogeneíze com auxílio do bastão de vidro. Mova o funil de vidro e gaze para o cálice. Filtre a solução no cálice, em seguida coloque 50 mL de água destilada. Deixe o cálice em decantação por duas horas. Pingue uma gota do sedimento formado na lâmina, com auxílio da pipeta Pasteur e cubra com a lamínula. Direcione a lâmina de vidro para o microscópio. Ligue o microscópio e posicione a lâmina sobre a platina. Visualize a lâmina na objetiva de 40 X. Atente-se à instrução que, para movimentação do revólver ou para efetuar as configurações de posicionamento dos parafusos, condensador ou diafragma, deve-se clicar com o botão esquerdo do mouse sobre a área desejada e movimentar o cursor do mouse para direita ou esquerda. Retire a lâmina da platina. Siga para a seção “Avaliação dos Resultados”, deste roteiro, e responda de acordo com o que foi observado nos experimentos, associando também com os conhecimentos aprendidos sobre o tema. FOTOS Durante a prática realize 3 registros fotográficos. Insira a Imagem 1 aqui. Legenda Descreva a Imagem 1 aqui. Insira a Imagem 2 aqui. Legenda Descreva a Imagem 2 aqui. Insira a Imagem 3 aqui. Legenda Descreva a Imagem 3 aqui. RESULTADOS E DISCUSSÃO 1.Para quais ovos é mais indicado esse método? O método de sedimentação espontânea por Hoffman, Pons e Janner é indicado principalmente para pesquisa de ovos de Schistosoma mansoni. Ele também é eficaz para o diagnóstico de cistos de amebídeos, cistos de Giardia duodenalis, larvas de Strongyloides stercoralis e ovos de Ascaris lumbricoides e Trichuris trichiura. 2.Há diferença no tipo de ovo encontrado se a amostra estiver diarreica? Nao. 3.Quais formas evolutivas podem ser identificadas através do método de Hoffmann? Suas formas evolutivas de parasitos pesados como ovos de média a grande densidade, embora tenha boa sensibilidade para diagnóstico de formas evolutivas de helmintos e protozoários. 4.Faça um resumo da técnica analisada e cite dois benefícios da sua aplicação. A técnica de Hoffmann consiste em dissolver uma quantidade de fezes (frescas ou fixadas) em água em um béquer, com ajuda de um bastão de vidro, e posteriormente filtrar a mistura. A filtração é feita com auxílio de uma gaze cirúrgica dobrada em quatro ou em um parasitofiltro direto em um cálice. O filtrado, então, é mantido em repouso por um período de 2 horas (Figura 1). Ao se manter a solução em repouso, os sedimentos fecais vão se depositando no fundo do cálice de maneira espontânea. Após o tempo de repouso, já é possível realizar o esfregaço, mas antes é importante analisar o sobrenadante. Caso o sobrenadante apresente-se turvo, é necessário retirá-lo cuidadosamente, colocar novamente água e aguardar mais 60 minutos de repouso, a fim de limpar os detritos fecais. Se o aspecto do sobrenadante for límpido, o sedimento pode ser coletado com auxílio de uma pipeta e colocado entre uma lâmina e uma lamínula para confecção do esfregaço e posterior observação ao microscópio óptico. Para a visualização e identificação dos cistos de protozoários e larvas de helmintos, pode-se realizar a etapa opcional de corar as lâminas com lugol. Em tempos superiores a 24 horas de sedimentação espontânea, cistos de protozoários e larvas de helmintos podem ser detectados mais facilmente. Alem de ser simples e de baixo custo e alta sensibilidade. REFERÊNCIAS Este relatório foi elaborado com base no livro, sumario teórico do laboratório e sala de aula virtual. image1.png