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TRANSCRIÇÃO E PROCESSAMENTO DE RNA PROFª ISABELA VASCONCELOS Expressão gênica • Refere-se ao processo em que a informação codificada por um determinado gene é decodificada em uma proteína. Teoricamente, a regulação em qualquer uma das etapas desse processo pode levar a uma expressão gênica diferencial. A natureza química do RNA A natureza química do RNA Em solução – apresenta estrutura tridimensional definida e complexa (dobramento da molécula) Regiões de dupla hélice – atividades biológica RNA transportadores e ribossômicos Classes de RNA • RNA mensageiro – Contém informações genéticas para a síntese de ptn • RNA funcionais – Exercem funções biológicas – RNA ribossômico (RNAr) – RNA transportador (RNAt) – Pequenos RNA nucleares (snRNA) – microRNA – RNA de interferência (siRNA) – RNA não codificadores (IncRNA) Atuam no processo de tradução Expressão gênica e inibição de elementos de transposição Splicing Polimerases do RNA Polimerases do RNA • Polimerases de bactérias: – contém 4 subunidades: • Alfa (α) • Beta (β) • Beta’ (β’) • ômega (Ω) – Enzima completa (holoenzima) Núcleo enzimático - polimerização Fator sigma (δ) – reconhecimento do local para transcrição Polimerases do RNA • A subunidade sigma (s) da RNA polimerase é fundamental para o reconhecimento específico da região promotora. Ela, juntamente ao cerne da enzima, desliza ao longo do DNA à procura do promotor. Polimerases do RNA • Polimerases de eucariotos: – mais complexa – Possuem 3 tipos: I, II, e III – RNA polimerase I: • RNA pré ribossomal (pré rRNA) – RNA polimerase II: • Síntese de mRNA – RNA polimerase III: • tRNA, rRNA e outros RNAs especializados e pequenos. Polimerases do RNA • O que é? • processo de cópia do DNA em RNA • Pra quê serve? – Para ativação e desativação diferencial de genes – Define o repertório de genes ativos a cada instante, o transcriptoma – Muda de acordo com o tecido, alimentação, estímulos ambientais – Um entendimento fino e preciso da regulação da transcrição gênica define a adaptação do indivíduo ao meio, diferenciação celular, embriogênese, etc... E onde fica o RNA? • É feito no núcleo e depois vai pro citoplasma • Mas procarioto não tem núcleo... – Por isso se diz que sua transcrição é acoplada com a tradução O acoplamento transcrição-tradução Atenção: só em procariotos Claro, eles não têm núcleo Eucariotos O RNA vai para o citoplasma Etapas da Transcrição - procariotos • Iniciação • Alongamento • Término Etapas da Transcrição - procariotos Etapas da Transcrição - procariotos • Término – 2 tipos: – Terminação direta (intrínseca) – Dependente de Rho • Proteína (40 mil daltons) Etapas da Transcrição - procariotos • Dependente de Rho - Hipóteses: – Empurra RNApolimerase liberando o RNA transcrito da polimersase. – Induz uma modificação conformacional na polimerase, levando-a a pausar. Etapas da Transcrição - eucariotos Etapas da Transcrição - eucariotos RNAm Policistrônico Monocistrônico Splicing Os spliceossomos são grandes arranjos formados por snRNPs e precursores de mRNA. RNAt RNAr Conclusão • A transcrição é um processo de produção de RNA que define quais genes estão ativos na célula a cada instante • O processo é precisamente regulado – Abertura do DNA – Scanneamento do DNA pela RNA pol + sigma – Produção e processamento do RNA – Exportação do RNA Exercício 1) Defina transcrição e gene. 2) Onde estão localizadas as regiões promotoras? 3) Ilustre a organização dos genes em procariotos e eucariotos. 4) Construa um mapa de conceitos relacionando os seguintes termos: DNA/ polimerase do RNA/holoenzima/fator sigma/ transcrição do DNA/ promotor/sequência terminadora/ transcrito