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Utilização dos métodos CLAE-DAD, UV e análise multivariada no controle de qualidade de plantas medicinais e fitoterápicos. Métodos analíticos integrados para garantir a segurança e eficácia de plantas medicinais comercializadas no Brasil. Acadêmicas: Geovana Rezende Soares, Letícia Pereira Ganoza, Ravilla Patricia de Oliveira M.Godoy, Samara Jazz da Silva Gomes. O Papel Global da Fitoterapia no Cuidado à Saúde Dependência Global da Fitoterapia Aproximadamente 80% da população mundial em países em desenvolvimento depende de plantas medicinais para cuidados primários à saúde, demonstrando a importância biológica e cultural dessas práticas. Biodiversidade Brasileira O Brasil possui a maior biodiversidade de plantas medicinais do planeta, tornando-se estratégico na pesquisa e desenvolvimento de fitoterápicos. Indústria Incipiente Apesar do potencial, a indústria brasileira de fitoterápicos ainda é pouco desenvolvida, limitada pela falta de padrões de qualidade. Biopirataria A exploração ilegal de plantas e conhecimentos tradicionais representa um desafio significativo para a soberania nacional. Problema de Qualidade e Objetivos da Pesquisa Objetivo Principal Desenvolver metodologia analítica por CLAE para obtenção de impressão digital (fingerprint) de material vegetal comercializado. Controle de Qualidade Estabelecer critérios de autenticação e controle de qualidade para garantir a segurança e eficácia de produtos fitoterápicos. Validação Científica Validar a metodologia conforme parâmetros técnicos da ANVISA (Resolução RE nº 899/2003) para aplicação regulatória Irregularidades no Mercado Pesquisas científicas identificaram adulterações, contaminações e irregularidades em fitoterápicos comercializados, comprometendo tanto a eficácia terapêutica quanto a segurança do consumidor. Métodos Analíticos Integrados para Caracterização Completa CLAE-DAD/UV-VIS Separação cromatográfica em modo reverso com detecção simultânea por arranjo de fotodiodos e espectroscopia UV/VIS. ● Identificação de compostos por tempo de retenção ● Quantificação de metabólitos secundários ● Obtenção de perfis cromatográficos únicos Espectrometria de Massa (LC-MS) Acoplamento de cromatografia líquida com espectrometria de massa para identificação estrutural precisa de compostos. ● Confirmação de identidade molecular ● Determinação de massa molecular exata ● Análise de fragmentação e estrutura Análise Multivariada (PCA e HCA) Aplicação de técnicas quimiométricas para análise estatística e classificação de amostras de forma supervisionada e não supervisionada. ● PCA: Redução de dimensionalidade dos dados ● HCA: Agrupamento hierárquico de amostras ● Detecção de padrões e anomalias Validação Analítica Conforme Parâmetros ANVISA Parâmetros de Validação A metodologia foi desenvolvida e validada seguindo rigorosamente os critérios estabelecidos pela ANVISA na Resolução RE nº 899, de maio de 2003. Todos os parâmetros técnicos foram avaliados e aprovados, garantindo a confiabilidade e aplicabilidade do método. Critérios Aprovados Repetibilidade: Consistência de resultados em análises sucessivas das mesmas amostras. Recuperação Satisfatória, Seletividade e Robustez: O método resistiu a variações de condições e identificou corretamente os analitos em matrizes complexas. Análise Multivariada: Fluxograma de Processamento de Dados Análise de Componentes Principais (PCA) ● Redução de dimensionalidade mantendo máxima variância ● Identificação de componentes principais e padrões ● Visualização de agrupamentos naturais de amostras Pré-processamento de Dados ● Normalização e padronização de dados experimentais ● Remoção de ruídos e valores atípicos (outliers) ● Preparação para aplicação de métodos estatísticos Cinco Espécies Vegetais Selecionadas para Análise Cáscara-sagrada ● Nome científico: Rhamnus purshiana ● Uso: Laxante natural ● Espécie amplamente comercializada Aroeira ● Nome científico: Schinus terebinthifolius ● Uso: Anti-inflamatória e antimicrobiana ● Nativa da América do Sul Isoflavona de Soja ● Nome científico: Glycine max ● Uso: Fitoestrógeno e antioxidante ● Principal fonte de isoflavonas Plantago ● Nome científico: Plantago ovata ● Uso: Laxante natural e prebiótico ● Sementes ricas em mucilagem Sene ● Nome científico: Cassia angustifolia ● Uso: Laxante potente ● Folhas contêm antraquinonas Importância da Seleção ● Espécies amplamente comercializadas ● Grande demanda no mercado ● Alto risco de adulteração Sistema CLAE: Componentes Essenciais para Análise Arquitetura do Cromatógrafo O sistema de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE/HPLC) integra seis componentes fundamentais que operam em conjunto para a separação e a detecção de compostos em amostras complexas. Cada módulo — desde o reservatório até o registrador de dados — desempenha um papel crítico no controle do fluxo, na injeção precisa, na resolução da coluna e na aquisição confiável do sinal do detector, garantindo resultados reprodutíveis e sensíveis. O DAD-HPLC proporciona aquisição espectral em múltiplos comprimentos de onda, permitindo identificação mais robusta de analitos, detecção de picos sobrepostos e análise qualitativa baseada no perfil espectral. Impressões Digitais Cromatográficas e Detecção de Adulterações Achados Principais As análises cromatográficas revelaram perfis únicos (fingerprints) para cada espécie vegetal. Aroeira e cáscara- sagrada apresentaram picos divergentes em amostras comercializadas comparadas ao padrão autêntico, indicando possíveis adulterações. A soja comercializada apresentou variabilidade significativa nas concentrações de isoflavonas. ● Fingerprint: Método eficaz para autenticação vegetal ● Irregularidades: Picos divergentes indicam adulterações potenciais ● Variabilidade: Concentrações distintas de metabólitos no mercado Metodologia Validada para Garantir Qualidade e Segurança de Fitoterápicos O controle de qualidade rigoroso através de CLAE-DAD, análise multivariada e parâmetros ANVISA é fundamental para fortalecer a indústria brasileira de fitoterápicos e proteger a saúde do consumidor.