Bioquímica hepática

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Bioquímica Hepática
Circulação do fígado
Sangue arterial
Sangue venoso da 
veia porta
Funções 
do fígado
Funções do fígado
• Albumina
• Proteínas transportadoras
• Lipoproteínas
• Fatores de coagulação
• Proteínas da fibrinólise
• Proteínas de fase aguda
• Sistema Complemento
Síntese de proteínas 
• Colesterol
• Fosfolipídeos
• Triglicerídeos
• Lipoproteínas
Metabolismo de lipídeos
Avaliação laboratorial da função hepática
Como examinar o fígado?
Devido à notável diversidade do fígado, a disfunção hepática 
pode resultar em diversas anormalidades laboratoriais.
Testes 
Laboratoriais
Testes Laboratoriais
SANGUE
Doença hepática
• Distúrbios que lesionam os hepatócitos ou causam colestase
• Hipoxia
• Doenças metabólicas
• Intoxicação
• Inflamação
• Neoplasia
• Traumatismo mecânico
• Obstrução de ducto biliar extra-hepática ou intra-hepática
• Doenças primárias como doença intestinal inflamatória e pancreatite.
Doença hepática
• Colestase
• Comprometimento do fluxo da bile.
• Consequências: 
• Retenção dos componentes da bile no sangue e tecidos e redução da bile no intestino.
Insuficiência hepática
• Insuficiência dos hepatócitos em depurar o sangue das substâncias normalmente 
excretadas pelo fígado e falha na síntese das substâncias normalmente 
produzidas pelo fígado. 
• Pode ser decorrente de doença hepática.
• A doença hepática nem sempre resulta em insuficiência hepática:
• O fígado tem grande capacidade de reserva;
• Deve ocorrer perda de 70 a 80% da massa hepática funcional antes que se instale a 
insuficiência hepática.
Avaliação laboratorial da função hepática
• Testes para diagnóstico de doença hepática ou de insuficiência hepática: 
• Mensuração da atividade sérica de enzimas que indicam que há lesão de hepatócitos
• Mensuração da atividade sérica de enzimas que indicam que há colestase
• Testes que avaliam a função hepática 
Enzimologia diagnóstica
• Diferentes órgãos, tecidos ou células contêm diferentes enzimas. Poucos órgãos 
ou tecidos contêm determinada enzima; essa enzima “tecido-específica” tende a 
ser mais útil como teste diagnóstico.
• Interpretação do aumento sérico de enzima - o aumento da enzima no sangue é 
tão proporcional ao seu extravasamento a partir de células lesionadas ou a partir 
do aumento de sua produção:
• Sugere lesão ou estimulação dessas células.
• A enzimologia diagnóstica é um meio de localizar o tecido lesionado ou o local 
em que ocorreu o estímulo para a maior produção da enzima.
Enzimologia diagnóstica
• O que é enzima?
• As enzimas catalisam reações bioquímicas por meio 
da transformação de um substrato em um produto.
Enzimologia diagnóstica
• Como mensurar a atividade enzimática?
Volume 
padrão de 
soro (contém 
a enzima) 
Solução 
substrato
Reação que 
gera um 
produto
Quantificar a taxa de 
desaparecimento do 
substrato ou taxa de 
formação do produto 
Quanto mais rapidamente ocorre a reação, maior é a 
atividade sérica da enzima na amostra do paciente.
Considera-se que a atividade sérica de uma enzima é 
diretamente proporcional à sua concentração.
Interpretação da mensuração enzimática
• Diferença entre enzimas de “extravasamento” e enzimas “de indução”;
• Tempo de atividade da enzima após sua entrada no sangue (meia-vida biológica da enzima);
• Especificidade tecidual das enzimas;
• Manuseio e armazenamento da amostra de soro.
- Enzimas de extravasamento e indução -
Extravasamento:
• Enzimas liberadas quando há lesão na 
membrana celular ou por vesículas;
• As enzimas passam para o espaço 
extracelular e, em seguida, para o sangue;
• Ocorre quando há lesão subletal ou letal 
da célula (necrose);
• Liberação rápida (horas após lesão).
Indução:
• Maior liberação da enzima pelas células 
devido a algum tipo de estímulo;
• Aumento da atividade dessa enzima no 
soro sanguíneo;
• Estão presentes na membrana celular;
• Liberação lenta (dias).
- Enzimas de extravasamento e indução -
As enzimas de extravasamento saem da célula por causa das 
alterações na membrana plasmática. Algumas enzimas de 
extravasamento, como a AST, também estão presentes em 
organelas. Para o extravasamento dessas enzimas de organelas, há 
necessidade de lesão mais grave. 
O aumento da atividade sérica das enzimas de indução deve-se, em 
parte, à maior produção dessas enzimas, com subsequente 
aumento de secreção. Esse aumento da produção é provocado por 
algum tipo de indutor. 
- Meia vida da enzima -
• Uma vez no soro, as enzimas são degradas e/ou excretadas pelo organismo. 
• E ao longo do tempo algumas enzimas podem perder sua atividade. 
• Meia-vida biológica da enzima – corresponde ao tempo necessário para que 
metade da atividade da enzima desapareça do soro.
• Interpretação – o conhecimento da meia-vida da enzima é útil para avaliar o quão 
recentemente ocorreu seu extravasamento ou o aumento de produção, bem 
como para verificar se a doença é ativa.
- Especificidade tecidual da enzima -
• Origem tecidual mais provável da enzima.
• A enzima ideal para uso diagnóstico seria a específica para apenas um tecido. 
Porém, quase nenhuma enzima utilizada como teste diagnóstico é encontrada 
apenas em um tecido.
• A magnitude da atividade sérica das enzimas não é um indicador confiável do 
tipo ou do grau de lesão tecidual:
• Células necrosadas liberam todas as suas enzimas e não mais sintetizam.
• Células com lesão subletal liberam apenas uma parte de suas enzimas e continuam a 
sintetizar (possivelmente em uma taxa maior).
- Manuseio da amostra - 
• Amostra: soro sanguíneo. Obtido e analisado o mais rápido possível.
• Porém, a maioria das enzimas é estável quando o soro é mantido refrigerado por 24 h.
• Consequência de erros no manuseio:
• A atividade da enzima pode se alterar (sua concentração é mensurada por sua atividade).
• Estão sujeitas à degradação ou à desnaturação pelo calor, por alteração de pH, e pela 
exposição a vários produtos químicos.
- Manuseio da amostra -
• Interferência na amostra:
• Hemólise e Lipemia: risco potencial de suas interferências nos testes espectrofotométricos;
• Aumento da concentração sérica de bilirrubina interfere nesses testes, mas não é evitável. 
Testes para detecção de lesão de hepatócitos
• Alanina aminotransferase – ALT
• Aspartato aminotransferase – AST
• Sorbitol desidrogenase – SDH 
PODE SER PEDIDO CK 
PARA AVALIAR LESÃO 
MUSCULAR
Alanina aminotransferase (ALT) 
• Anteriormente denominada transaminase glutâmico-pirúvica (TGP);
• ALT é muito mais hepatoespecífica do que a AST;
• Em cães e gatos, a maior concentração de ALT é verificada em hepatócitos;
• Em equinos e bovinos, a concentração de ALT em hepatócitos é baixa;
• Doença ou lesão muscular grave pode causar aumento da atividade sérica de ALT:
• Como diferenciar lesão hepática x lesão muscular?
• Quando há aumento da atividade de ALT, é importante mensurar a atividade sérica de uma enzima 
mais específica para lesão muscular (creatinoquinase [CK])
Alanina aminotransferase (ALT) 
• Intepretação do aumento da atividade de ALT
• Aumento acentuado em 1 ou 2 dias, após lesão aguda grave;
• Se a lesão não progredir, ocorrerá diminuição lenta ao longo de várias semanas;
• Meia-vida sérica estimada em 17 a 60 h (cães), e em 3,5 h (gatos);
• Pode estar aumentada durante a fase de recuperação de lesão hepática.
Alanina aminotransferase (ALT)
• Intepretação do aumento da atividade de ALT
• É possível notar aumento da atividade sérica de ALT em cães com hiperadrenocorticismo ou 
que receberam corticosteroides. 
• O aumento pode ser discreto.
• Patogênese do aumento:
• Indução da produção da enzima por esteroide
• Verdadeira lesão da membrana dos hepatócitos
• Obs. as alterações morfológicas nos hepatócitos se desenvolvem em poucos dias após o 
início da terapia esteroide e regridem lentamente após cessar o tratamento.
Aspartato aminotransferase (AST)
• Anteriormente denominada transaminase glutâmico-oxalacética(TGO);
• AST não é uma enzima hepatoespecífica;
• É mais sensível para a detecção de alguns tipos de lesão de hepatócitos do que a ALT;
• Está presente em maior concentração nos hepatócitos e nas células musculares 
(esqueléticas e cardíacas) de todas as espécies;
• Meia-vida em cães e gatos é menor do que a de ALT, sendo estimada em 4 a 12 h em 
cães, e 77 min em gatos. Em equinos, a meia-vida foi estimada em 7 a 8 dias.
Aspartato aminotransferase (AST)
• Equinos e ruminantes
• Determina-se a atividade de AST como teste de detecção de rotina da lesão de hepatócitos.
• Devido a baixa concentração de ALT nos hepatócitos.
• Para confirmação de lesão de hepatócitos em grandes animais pode ser utilizada a 
mensuração de enzimas de maior hepatoespecificidade nessas espécies (como a sorbitol 
desidrogenase [SDH]).
Sorbitol desidrogenase (SDH)
• É uma enzima hepatoespecífica – sua concentração em outros tecidos é baixa;
• Está presente em alta concentração nos hepatócitos de cães, gatos, equinos e 
ruminantes;
• Cães e gatos
• A mensuração da atividade de SDH não é um teste superior ao da ALT na detecção de lesão de 
hepatócitos nessas espécies, não sendo comumente utilizada
• Equinos e ruminantes
• A SDH é muito mais específica na detecção de lesão de hepatócitos do que a AST
• Meia-vida: é muito breve (