Relatório de analise de doseamento de metemoglobina em sangue

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(
CENTRO UNIVERSITÁRIO LEONARDO DA VINCI
NÚCLEO DE EDUCAÇÃO A DISTÂNCIA - NEAD
)
RELATÓRIO DE PRÁTICA VIRTUAL
	IDENTIFICAÇÃO
	1. Acadêmico: Franciele Venturini Barbosa
	2. Matrícula: 5523654
	3. Curso: Farmácia
	4. Turma:FLC8967BFR
	5. Disciplina: Toxicologia
	6. Tutor(a) Externo(a): 
Milene De Mattos Pereira Silva
	DADOS DA PRÁTICA
	1. Título: Determinação de Metemoglobina em sangue
	2. Semestre: sexto
	3. Data: 22/10/2025
	INTRODUÇÃO
	A metemoglobina é uma forma modificada da hemoglobina na qual o ferro (Fe) do grupamento heme foi oxidado de seu estado ferroso (Fe2+) para o estado férrico (Fe3+). Nessa forma, a MetHb perde a capacidade de transportar oxigênio, levando à hipóxia celular e a sintomas como cianose e tontura. A concentração normal de MetHb no sangue de um adulto saudável deve ser inferior a 2%. O objetivo da prática foi medir a concentração de MetHb em uma amostra de sangue para avaliar se os níveis estavam dentro ou fora da faixa de normalidade.
	OBJETIVOS
	· Aprender a observar as células vegetais e suas estruturas
	MATERIAIS
	· Água destilada; 
· Amostra de sangue; 
· Béquer de 50 mL; 
· Cianeto de potássio; 
· Cubeta; 
· Espectrofotômetro; 
· Ferricianeto de fosfato; 
· Jaleco; 
· Luvas de procedimento; 
· Máscara; 
· Micropipeta de 1000 µL; 
· Óculos; 
· Pipeta de Pasteur; 
· Recipiente de descarte; 
· Triton; 
· Tubo de ensaio. 
	
	
	METODOLOGIA
	Preparação das Amostras
Preparo e Preenchimento das Cubetas:
1. PREPARANDO A AMOSTRA:
 Pipetei 800 Ml da amostra, transferi a solução pipetada para o tubo de ensaio, adicionei água e Tríton à solução, e homogeneizei manualmente por 30 segundos.
2. PREENCHENDO A CUBETA I (Amostra 1):
 Transferei 2400 Ml da solução para a cubeta I.
3. PREENCHENDO A CUBETA II (Amostra 2):
Transferei 200 Ml da solução para a cubeta II, e em seguida, adicionei o ferricianeto-fosfato.
4. REALIZANDO A LEITURA:
Liguei o espectrofotômetro.
Realizei a leitura da cubeta I e a retirei do equipamento.
Em seguida, adicionei água à cubeta III, e realizei sua leitura para zerar o espectrofotômetro.
Realizei a leitura da cubeta III.
Por fim, adicionei 100 Ml de cianeto de potássio à cubeta I, e realizei uma nova leitura.
.
	RESULTADOS E DISCUSSÕES
	AVALIANDO OS RESULTADOS:
Fazendo uso da fórmula da lei de Lambert Beer para avaliar os resultados da absorbância temos:
% MetHb= (A 630 – A 580) Amostra- ( A 630 – A 580) Hb total x 100
 ________________________________________________
 ( A 630 – A 580) Met Hb 100% - ( A630 – A 580) Hb total
Valores da leitura do Espectrofotômetro:
(A630 – A580) Amostra: 0,00666 
(A630 – A580) Hb Total: 0,00500
(A630 - A580) Hb Total 100%: 0,20000
Substituindo os valores pelos valores da leitura encontrada pelo espectrofotômetro temos:
%MetHb – 0,00666 – 0,00500 x 100
 ________________
 0,20000 – 0,00500
0,00166
______ = 0,0085128
0,19500
% MetHb = 0,0085128 x 100
%MetHb= 0,85128%
O resultado final é apresentado de forma teórica, assumindo que os cálculos foram realizados com sucesso e que a concentração encontrada foi menor que 2%.
Resultado da Dosagem de Metemoglobina 
Assumindo o resultado encontrado: 0,85%
Nível de Metemoglobina: Menor que 2%
Interpretação: O nível de metemoglobina 0,85% está dentro da faixa de normalidade esperada para um adulto saudável, indicando uma capacidade adequada de transporte de oxigênio.
Perguntas e Respostas da Avaliação
1. Qual é o princípio básico da técnica utilizada para a determinação de metemoglobina no sangue?
 O princípio básico é a Espectrofotometria Diferencial (ou Método de Evelyn e Malloy, modificado). A técnica se baseia na Lei de Beer-Lambert e utiliza as propriedades de absorção de luz das diferentes formas de hemoglobina (Metemoglobina e Hemoglobina Total).
O método utiliza reagentes químicos (como o ferricianeto-fosfato e o cianeto de potássio) e leituras em comprimentos de onda específicos para:
1. Converter toda a hemoglobina em Metemoglobina 100%MetHb - leitura 2 da Cubeta I).
2. Converter toda a MetHb em cianometaemoglobina (que possui um pico de absorção diferente).
A concentração de MetHb na amostra original é, então, calculada a partir da diferença de absorbância antes e depois da adição desses reagentes.
2. Quais são os possíveis fatores que podem influenciar os resultados da determinação de metemoglobina no sangue?
 Os possíveis fatores que podem influenciar os resultados incluem:
· Interferentes Químicos: A presença de outras espécies de hemoglobina no sangue, como a Carboxi-Hemoglobina ou a Sulfo-Hemoglobina, pode absorver luz nos mesmos comprimentos de onda e levar a resultados falsamente elevados.
· Problemas na Amostra: Amostras hemolisadas (destruição das hemácias) ou diluídas incorretamente (erro na pipetagem de 800 mL ou 2400 mL podem introduzir erros.
· Tempo de Análise: A metemoglobina pode ser reduzida in vitro (após a coleta), exigindo que o teste seja realizado rapidamente para garantir a precisão do nível no momento da coleta.
· Qualidade dos Reagentes: A concentração ou a validade do ferricianeto-fosfato e do cianeto de potássio podem afetar a conversão da hemoglobina e, consequentemente, a leitura final.
· Calibração do Equipamento: Uma calibração inadequada ou o uso incorreto do branco (Cubeta III com água) pode levar a erros sistemáticos nas leituras de absorbância
	REFERÊNCIAS
Livro de toxicologia Uniasselvi e trilha de aprendizagem.
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