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Identificação do material genético CENTRO UNIVERSITÁRIO FRASSINETTI DO RECIFE- UniFAFIRE DISCIPLINA: GENÉTICA HUMANA ROTEIRO Identificação do Material Genético 1. Transformação genética em pneumococos 2. Infecção de bactérias por fagos 3. Infecção virótica do fumo Transformação genética em pneumococos • Frederick Griffith (1928) • Streptococcus pneumoniae – Bactéria causadora de pneumonia em humanos; – Normalmente letal em camundongos; – Algumas linhagens evoluíram para serem menos virulentas. • Utiliza duas linhagens distinguíveis pelo aparecimento de suas colônias cultivadas em culturas de laboratório; – Linhagem S (virulenta e mortal) • Encapsuladas (capa de polissacarídeos) • Colônia possui um aspecto liso – Linhagem R (não virulento mutante) • Não encapsuladas • Colônia com aspecto rugoso Transformação genética em pneumococos Restos celulares das células S (virulentas inativadas pelo calor) converteram células R vivas em células S vivas. TRANSFORMAÇÃO Qual componente químico das células doadoras mortas causaram a transformação? • Mudado o genótipo da linhagem receptora; • Candidato: material genético?!? • 1944 - Oswald Avery, Colin MacLeod e Mclyn MacCarty – Destruíram quimicamente todas as principais categorias de substâncias químicas no extrato bacteriano morto; – Destruição foi uma de cada vez. DNase A demonstração de que o DNA é o princípio transformante foi a primeira demonstração de que os genes (o material hereditário) são compostos de DNA. Como uma molécula de tão baixa complexidade como o DNA podia codificar a diversidade de vida do planeta? • 1952: Alfred Hershey e Martha Chase • Fago T2 – Vírus que infecta bactéria; – Estrutura do Fago: cápsula proteica com o DNA dentro da bainha; – Marcaram diferencialmente o DNA e as proteínas usando radioisótopos (rastrear os dois materiais durante a infecção). Marcação da cápsula proteica: 35S (S, presente nas proteínas e não no DNA) Marcação do DNA: 32P (P, presente no DNA e não nas proteínas) Cultura bacteriana usada: Escherichia coli (E. coli) CONCLUSÕES 1- Proteínas dos fagos nunca entram na bactéria 2- DNA é o material hereditário!!! E o organismos com RNA? • Experimento de reconstituição de Heinz Fraenkel-Conrat (1957) • Utilizou o vírus do mosaico do tabaco (TMV) – Vírus pequeno – Composto apenas por uma molécula de RNA encapsulado por uma capa proteica; – Identificação das linhagens é feita a partir das diferenças químicas das capas. 1- Duas linhagens com cápsula proteica diferente (tipo HRV e tipo TMV); 2- Separaram o RNA; 3- Hibridizaram o RNA/HRV com as proteínas de capa do TMV; 4- Infectaram folhas de tabaco; 5- Isolaram o vírus da folha e analisaram; 6- Vírus estava com RNA e capa do HRV. CONCLUSÃO Que a informação genética está no RNA e não na proteína. Slide 1: Identificação do material genético Slide 2: ROTEIRO Slide 3: Transformação genética em pneumococos Slide 4 Slide 5: Transformação genética em pneumococos Slide 6: Qual componente químico das células doadoras mortas causaram a transformação? Slide 7 Slide 8: Como uma molécula de tão baixa complexidade como o DNA podia codificar a diversidade de vida do planeta? Slide 9 Slide 10: E o organismos com RNA? Slide 11 Slide 12