aula-05-microscopia

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Microscopia
Prof. Clarisse Beltrão
As dimensões das estruturas biológicas podem ser agrupadas em dois grandes grupos: macroscópicos e microscópicos, o que vai diferenciá-las é o PODER DE RESOLUÇÃO do olho humano.
Dimensões biológicas
Poder de resolução: É a capacidade de um aparelho fornecer imagens distintas de dois pontos distintos.
Poder de ampliação: É a capacidade de um aparelho ampliar n vezes uma imagem.
Limite de resolução: distância mínima a que dois pontos podem estar para o aparelho o mostrar individualizados.
O limite de resolução do olho humano é de 100 µm (0,1 mm). 
Conceitos práticos de formação de imagem em microscopia
1 µm = 10 -6 m = 10-3mm
1 nm = 10 -9 m = 10-6mm
1 Å = 10 -10 m = 10-7mm
Unidades de medidas
Os microscópios utilizam radiações eletromagnéticas para formar imagens ampliadas dos objetos a serem observados.
O microscópio óptico ou de luz usa a luz visível (radiação eletromagnética com comprimento de onda compreendido entre 400 e 800 nm).
Os microscópios são os aparelhos utilizados para formar imagens ampliadas
O microscópio eletrônico usa raios catódicos (feixes de elétrons) cujo comprimento de onda é inversamente proporcional à voltagem de aceleração dos elétrons usados no microscópio.
Para uma voltagem de 100KV o comprimento de onda é de 0,0037 nm.
Os microscópios são os aparelhos utilizados para formar imagens ampliadas
É limite mínimo para a dimensão dos objetos que podem ser observados com um determinado sistema óptico.
A resolução do olho humano é de 0,2mm – determinada pela estrutura da retina.
A resolução do microscópio de luz é de 0,2µm, limitada pelo comprimento de onda da luz visível.
Resolução do sistema
Fonte luminosa
Condensador
Diafragmas de campo e do condensador
Platina
Charriot
Lentes objetivas
Lentes oculares
Parafusos macro e micrométrico
Componentes principais do microscópio óptico
1. A imagem proporcionada pelo M.O. é aumentada, virtual e invertida em relação ao objeto examinado.
2. Calcula-se o aumento da imagem obtida ao M.O. multiplicando-se o valor do aumento da ocular pelo valor do aumento da objetiva.
3. Campo microscópico é a área da preparação que se está observando ao M.O. Quanto maior o aumento da imagem, menor é a abrangência do campo.
4. Em virtude do último item, sempre se inicia a observação ao M.O. com uma combinação de lentes que proporcione o menor aumento, a fim de se ter uma visão panorâmica da região que se quer observar com maior aumento.
Observações
MANEJO DO MICROSCÓPIO
1. Acender a lâmpada do sistema de iluminação.
2. Abrir totalmente o diafragma e colocar o sistema condensador - diafragma na posição mais elevada, pois é aquela que permite melhor iluminação.
3. Movimentar o revólver, colocando em posição a objetiva de menor aumento (4X).
4. Tomar a lâmina com a lamínula para cima e colocá-la na platina, prendendo-a com os grampos.
5. Movimentar o charriot, fazendo com que o preparado fique em baixo da objetiva.
6. Com o parafuso macrométrico, elevar a platina ao máximo, observando que a objetiva não toque na lamínula, pois poderá quebrá-la.
7. Focalizar a preparação para a obtenção de uma imagem nítida, movimentando o parafuso macrométrico e abaixando a platina até que se possa visualizar a imagem.
8. Aperfeiçoar o foco com o parafuso micrométrico.
9. Colocar a região do preparado que se quer ver com maior aumento bem no centro do campo visual da lente.
10. Movimentar o revólver, colocando em posição a objetiva de 10X (aumento médio).
11. Repetir o procedimento do item 6.
12. Para focalizar a nova imagem, repetir o procedimento do item 7.
13. Repetir o item 8.
14. Repetir o item 9.
15. Colocar a objetiva de 40X (maior aumento) em posição e repetir os itens 6, 7 e 8.
16. A objetiva de 100X é chamada de imersão e seu uso será explicado posteriormente.
Manejo do microscópio