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AULA PRÁTICA 2 Noções Básicas em Microscopia Objetivo: Identificar as partes componentes e treinar o manuseio de um microscópio óptico. Microscópio Óptico (M.O.) - Partes Mecânica 1. pé 2. braço 3. tubo ou canhão 4. revólver 5. platina 6. charriot 7. parafusos para ajuste macro e/ou micrométrico do foco Óptica Sistema de aumento: - oculares - objetivas Sistema de iluminação: - espelho - condensador - diafragma - filtro Observações: 1- A imagem proporcionada pelo M.O. é aumentada, virtual e invertida em relação ao objeto examinado. 2- Calcula-se o aumento da imagem obtida ao M.O. multiplicando-se o valor do aumento da ocular pelo valor do aumento da objetiva. 3- Campo microscópico é a área da preparação que está sendo observada ao M.O. Quanto maior o aumento da imagem, menor é a abrangência do campo. 4- Em virtude da observação 3, sempre se inicia a observação ao M.O. com uma combinação de lentes que proporcione o menor aumento, a fim de se ter uma visão panorâmica da região que se quer observar com maior aumento. Partes componentes do microscópio óptico Base: é o suporte do microscópio, peça que sustenta todas as outras. Braço: é a peça que liga a base até a parte superior do microscópio e onde se deve segurar o microscópio para ser transportado. Mesa ou platina: é uma placa de metal com um orifício no centro, por onde passam os raios luminosos. O objeto que vai ser observado é colocado sobre uma lâmina de vidro e esta, sobre a platina, exatamente em cima do orifício. Charriot: localizado acessória e superficialmente à platina, é formado por uma presilha, dois botões giratórios e dois trilhos que têm a função de movimentar a lâmina no plano horizontal (da frente para trás e da esquerda para a direita, ou vice-versa) e assim permitir a observação de toda a sua área. Canhão: parte mais superior do microscópio, contém um conjunto de espelhos que projetam a imagem em direção às oculares nele encaixadas. Revólver: peça encontrada abaixo do canhão na qual se inserem várias lentes objetivas. Fonte de luz: normalmente uma lâmpada ou, em modelos mais antigos, um espelho, que se apóia na base do microscópio. Condensador: situado entre a platina e a base, converge os raios luminosos provindos da lâmpada e projeta-os como um cone de luz sobre o material que está sendo examinado. Receptáculo do filtro: peça de forma circular, presa ao condensador, destinada à recepção de um filtro. Este é uma placa de vidro colorida (azul, verde, etc.) que torna a luz adequada ao uso. Diafragma: fica acima do receptáculo do filtro, se liga a uma alavanca que permite sua abertura ou fechamento, levando ao controle da passagem total ou parcial da luz. Objetivas: são lentes que projetam uma imagem aumentada do objeto nas oculares. A objetiva de 100x é também chamada objetiva de imersão (utilizada com óleo especial, que permite maior refração da luz para dentro da objetiva, corrigindo a pouca luminosidade nas observações feitas em grandes aumentos). Após o uso, o óleo é removido com xilol, éter ou benzina, embebido em algodão. Ocular: aumenta a imagem do objeto após o aumento já proporcionado pela objetiva. É através desta lente que o observador vê a imagem do objeto (por isso o nome ocular, uma vez que o olho do observador está colocado à frente dela). Parafusos macrométrico e micrométrico: o macrométrico permite grandes avanços ou recuos da platina em direção à objetiva. O micrométrico permite pequenos avanços ou recuos. Esse movimento da platina leva à focalização do material observado em diferentes aumentos. Manejo do Microscópio 1- Descubra o microscópio, desenrole o cabo de força e conecte-o na voltagem correta. 2- Gire o revólver, encaixando a objetiva de menor aumento (4x ou 10x). 3- Coloque a lâmina sobre a platina, segurando-a com uma das mãos e abrindo a presilha com a outra. 4- Acenda a luz do microscópio (acione primeiramente o interruptor e em seguida o pontenciômetro de intensidade) e centralize o material no orifício da platina utilizando os parafusos do charriot. Faça isso olhando lateralmente, o que facilita a operação. 5- Movimentando o parafuso macrométrico, levante a platina até o ponto máximo, sem que a lâmina encoste na objetiva. 6- Ajuste a distância interpupilar, olhe através das oculares e, ainda utilizando o parafuso macrométrico, desça lentamente a platina até que se possa visualizar o material a ser analisado. 7- Acerte o ponto exato do foco com o parafuso micrométrico. 8- Corrija a intensidade de luz e abertura do diafragma para evitar ofuscamento e permitir a percepção de profundidade de campo e o contraste desejados. Atenção: o condensador deve ser mantido na sua posição mais alta. 9- Observe o material atentamente trabalhando o foco fino com o parafuso micrométrico. Para percorrer outro campo da lâmina, utilize o charriot. 10- Gire o revólver para passar para a próxima objetiva de maior aumento, lembrando sempre de regular a intensidade de luz e a abertura do diafragma, bem como corrigir a focalização com o parafuso micrométrico. 11- Para utilizar a objetiva de 100X é imprescindível o emprego do óleo de imersão sobre a lâmina, o qual deverá será removido da objetiva com os devidos cuidados logo após o uso. 12- Terminada a observação, encaixe a objetiva de menor aumento, baixe um pouco a platina, deixe a intensidade de luz no mínimo e desligue-a, retire a lâmina, limpe o microscópio e cubra-o com a capa. Figura 1. Microscópio óptico ANOTAÇÕES:
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