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* BIOSSÍNTESE DO DNA REPLICAÇÃO GÊNICA * CICLO DE DIVISÃO CELULAR A REPLICAÇÃO OCORRE DURANTE A FASE S DA INTÉRFASE DO CICLO CELULAR * FUNDAMENTOS DA BIOSSÍNTESE DE DNA REPLICAÇÃO GÊNICA Uma cópia do DNA é passada para a célula-filha durante a divisão celular, de modo que as células filhas, no caso da mitose, tenham a mesma informação genética que a célula mãe. Para que esta divisão ocorra é necessário que ocorra primeiro o processo de auto-duplicação do DNA que recebe o nome de replicação gênica. Este processo consiste na abertura de uma molécula de DNA parental e na subsequente formação de duas novas moléculas filhas idênticas, cada uma contendo 50% da molécula mãe. * A REPLICAÇÃO É UM PROCESSO SEMI-CONSERVATIVO * A REPLICAÇÃO É UM PROCESSO SEMI-CONSERVATIVO * A REPLICAÇÃO TEM INÍCIO EM UMA ORIGEM E DEPOIS PROCEDE BIDIRECIONALMENTE * O DNA EUCARIÓTICO APRESENTA VÁRIAS ORIGENS DE REPLICAÇÃO * PRINCIPAIS ENZIMAS ENVOLVIDAS NO PROCESSO DE REPLICAÇÃO DO DNA Helicase Topoisomerase Primase DNA Polimerase Telomerase * FUNDAMENTOS DA BIOSSÍNTESE DE DNA REPLICAÇÃO GÊNICA * ETAPAS DO PROCESSO DE REPLICAÇÃO DO DNA 1. INICIAÇÃO – DNA helicase Início comum na forquilha de replicação envolvendo: Helicases Topoisomerase DNA binding proteins 2. ALONGAMENTO – DNA polimerase Adição de nucleotídeos direção 5’ para 3’ 3. TERMINAÇÃO – replicação dos telômeros * A iniciação é marcada pela montagem do replissomo, uma complexa estrutura molecular que envolve diversas subunidades, acontece em locais precisos do DNA, conhecidos como origens de replicação. Proteínas helicases se ligam às origens de replicação e separam os dois filamentos de DNA, quebrando as pontes de hidrogênio que ligam as bases, recrutando as principais enzimas do replissomo, que inclui a holoenzima DNA Polimerase, responsável direta pela síntese. A Helicase, ao abrir a forquilha de replicação, gera uma força de tensão na super-hélice do DNA, que é absorvida pela enzima topoisomerase, esta enzima evita que a super tensão gerada pela abertura da dupla-hélice gere super hélices, permitindo que a molécula continue estável do ponto de vista estrutural. ETAPAS DO PROCESSO DE REPLICAÇÃO DO DNA 1. INICIAÇÃO * O alongamento acontece dentro da forquilha de replicação. É a fase de síntese de DNA, onde após a iniciação, enzimas especializadas são recrutadas. As enzimas primases são as responsáveis por criarem primers de iniciação. Um grampo chamdo B (beta) se liga e circunda o DNA e mantém a enzima DNA pol III ligada a fita molde. A enzima lê os primers e, por complementariedade, consegue dar continuidade na síntese, gerando uma fita complementar a fita molde em leitura. A fita contínua é um filamento contínuo que precisa somente de um primer para ir até o final, entretanto existe o filamento descontínuo, que gera pequenos pedaços de DNA, os fragmentos de Okasaki. Precisa existir um primer para iniciação de cada fragmento de Okasaki, esses pequenos filamentos são posteriormente ligados por uma enzima chamada Ligase que une esses fragmentos, criando assim o filamento descontínuo (lagging). 2. ALONGAMENTO * A etapa de alongamento envolve duas reações distintas: Síntese da fita líder Síntese da fita tardia * Adição de nucleotídeos DIREÇÃO 5’ 3’ * * * 3. TERMINAÇÃO – replicação dos telômeros O término da replicação é um processo posterior ao alongamento. Na fita contínua a replicação continua até o final da fita molde, e na fita descontínua ao final do molde a enzima DNA ligase une o último fragmento de Okasaki a fila descontínua. No término da síntese, são adicionadas múltiplas cópias de sequencias repetidas em tandem. Essas sequencias não são codificantes e tem um papel importante de proteger as informações (evitar a perda de informações) dos telômeros. A enzima que cria essas repetições é chamada de Telomerase, que adiciona repetições curtas às pontas 3' das moléculas de DNA. * A REPLICAÇÃO DOS TELÔMEROS Os telômeros compõem-se de seqüências curtas de nucleotídeos repetidas centenas de vezes em leveduras e vários milhares de vezes em vertebrados. Nos cromossomos humanos a seqüência é [5’ – TTAGGG – 3’], formando um segmento de DNA de aproximadamente 10kb no extremo do cromossomo. * A REPLICAÇÃO DOS TELÔMEROS TELOMERASE Propriedades dos Telômeros: · Proteção das extremidades dos cromossomos de exonucleases e ligases. · Previne recombinações aberrantes e fusão dos cromossomos. · Regula reconhecimento e separação do cromossomo mitótico. · Forma complexos com proteínas. · Permite a completa replicação do DNA linear. * 1- Por que se diz que a replicação do DNA é um processo semi-conservativo? 2- Explique a importância do processo de replicação gênica e as etapas em que este processo ocorre. 3- Definir o que são telômeros e explicar a importância da telomerase no processo de replicação do DNA. 4- Por que uma das fitas do DNA é replicada de forma contínua e a outra é replicada de forma descontínua? QUESTÕES
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