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Genética Microbiana Lilian Stranghetti Jorge Capellini Todas as características microbianas são controladas ou influenciadas pela hereditariedade. Ciência da hereditariedade inclui: 1) Estudo dos genes; 2) Como eles transportam informações; 3) Como são replicados e passados para as gerações subsequentes de células ou transmitidos entre microrganismos; 4) Como a expressão da sua informação determina as características. Características hereditárias relacionam-se a: 1) características estruturais (morfológicas); 2) reações bioquímicas (metabolismo); 3) capacidade de se movimentar; 4) capacidade de sobreviver em várias condições ambientais; 5) capacidade de interação com outros micro-organismos. São segmentos de DNA (exceto nos vírus de RNA) que codificam os produtos funcionais. GENES São estruturas celulares contendo DNA que transportam fisicamente a informação hereditária. Os cromossomos contêm os genes. DNA está associado com proteínas. CROMOSSOMOS ÁCIDO DESOXIRRIBONUCLÉICO (DNA) (A T C G) Carreador das informações genética Contém toda a informação necessária para a construção das células e tecidos de um organismo Fosfato pentose REPLICAÇÃO • Garante a continuidade genética da espécie ao longo das gerações. • Essencial para o desenvolvimento normal de um indivíduo. • É o processo que copia as sequências de nucleotídeos de uma molécula de DNA parental de fita dupla em duas moléculas de DNA-filhas de fita dupla. • Este processo é denominado replicação semiconservativa (cada molécula-filha contém fita da molécula parental). A replicação do DNA envolve diversas enzimas: DNA helicase: desenrola fita mãe para ser usada como molde RNA polimerase (primase): sintetiza pequenos pedaços de RNA a partir do DNA molde. DNA polimerase: enzima que copia a fita de DNA (fita molde) para fazer uma fita complementar, formando uma nova molécula de DNA dupla fita. Assegura a completariedade pela adição de nucleotídeos para fita nova. DNA ligase: une fragmentos de DNA. DNA girase: que faz com que as fitas voltem a enovelar ÁCIDO RIBONUCLÉICO (RNA) A U C G RNAm RNAt RNAr 1) RNAm: contém informação para a síntese de proteínas, leva para o citoplasma as informações para a s íntese proteica. Transporta a informação genética na forma de códons copiados do DNA. 3 tipos de RNA transcritos do DNA responsáveis pela síntese de proteínas no citoplasma: 2) RNAt: Transporta aminoácidos para que ocorra a síntese de proteínas. Move-se do núcleo para o citoplasma, onde se liga a aminoácidos e deslocando-se até os ribossomos. 3) RNAr: componente da maquinaria de síntese de proteína presente nos ribossomos. Todas as formas de RNA são sintetizadas por enz imas (RNA po l imerase) que ob tém informações em moldes de DNA. 3 tipos de RNA RNA e síntese proteica A síntese de proteínas envolve dois estágios: • Transcrição é o processo de cópia da informação de um gene para o mRNA. Cada três nucleotídeos especifica um determinado aminoácido. • Tradução os ribossomos utilizam a informação codificada pelo mRNA para capturar os aminoácidos transportados pelo tRNA, formando as proteínas. MUTAÇÃO: alteração no material genético • Uma mutação é uma alteração na sequência de bases do DNA. • Se a alteração ocorre na sequência de bases de um gene pode causar alteração no produto codificado por esse gene. • Outras vezes a mutação pode ser silenciosa. • Nonsense - é uma mutação com mudança da cadeia numa sequência de DNA que resulta num codon de terminação prematuro, um determinado codon de resíduo de aminoácido é substituído por um codon de terminação, gerando uma proteína não funcional Por exemplo na mutação UGG → UGA • Missense - substituição de um aminoácido por outro. CUA → AUA é missense (leucina em isoleucina) TRANSFERÊNCIA GENÉTICA E RECOMBINAÇÃO MECANISMO DE RECOMBINAÇÃO: É a troca de genes entre duas moléculas de DNA para formar novas combinações de genes em um cromossomo. Sabemos que, embora as mutações sejam responsáveis pela expressão de várias novas características por uma célula, muitos dos fenótipos expressos pelos micro- organismos procarióticos são decorrentes da aquisição de novos fragmentos de DNA, por meio de processos de transferência de genes. Três processos de transferência genética entre bactérias são bastante conhecidos: • Transformação; • Conjugação; • Transdução. CONJUGAÇÃO • Processo de transferência de DNA de uma bactéria para outra, envolvendo o contato entre as duas células. A conjugação está associada à presença de plasmídeos de natureza F. • Quando a célula porta um plasmídeo de natureza F é denominada F+, doadora ou macho, enquanto células desprovidas de tais plasmídeos são denominadas F-, receptoras ou fêmeas. CONJUGAÇÃO • Estes genes conferem uma série de características envolvidas na conjugação tais como a síntese do pilus F, responsável pelo reconhecimento e contato entre as células, assim como a transferência do DNA plasmidial. • As células apresentando tais plasmídeos integrados são denominadas Hfr (do inglês High Frequency of Recombination). Conjugação É a transferência de material genético de uma bactéria para outra mediada por plasmídio. TRANSFORMAÇÃO • A captação do DNA: DNA é captado como dupla hélice e absorvido como fita simples, sendo uma das fitas degradadas. • Ligação do DNA: inicialmente é reversível, tornando-se irreversível depois. As células competentes ligam o DNA com muito mais eficiência que células não competentes. • Integração do DNA: O DNA liga-se a proteínas na superfície celular, sendo em seguida absorvido e tendo uma de suas fitas degradadas por nucleases antes da absorção. Transformação Transformação Mecanismo da transformação genética em bactérias. TRANSDUÇÃO • Nesse processo, o DNA bacteriano é transferido de uma célula doadora para uma célula receptora dentro de um bacteriofago. Transdução Transdução generalizada, em que qualquer DNA bacteriano pode ser transferido de uma célula para outra.
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