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Estudo para microbiologia

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Estudo para microbiologia:
* CONTAGEM DE BACTÉRIAS - UFC/mL amostra
UFC/mL amostra = | 1mL -> nº de colônias x diluição (+) 
 | 0,1mL -> nº de colônias x diluição (+) x 10
Spread plate – colônias crescem por cima (Meio de cultura + amostra por cima)
Pour plate – colônias crescem por cima e no interior (Amostra + meio de cultura por cima)
Morfologia bacteriana:
 
Peptona -> Fonte de nitrogênio, é um tipo de substrato.
Ágar-ágar - > Solidificar o meio de cultura. Temperatura de fusão 100ºC. Temperatura de solidificação: 45ºC.
Classificação do meio quanto a consistência: Sólido, semi-sólido, líquido.
Classificação do meio quanto a composição química: 
- Meio sintético ou quimicamente definido: todos os componentes e quantidades são conhecidos;
- Meio complexo: contém componentes cuja composição não é precisa.
Exemplos: extrato de carne, extrato de levedura, peptona, sangue, leite, etc. 
Classificação do meio quanto ao uso: 
- Meio de uso geral(Meio básico): Permite o crescimento da maioria dos microrganismos presentes na amostra;
- Meio de enriquecimento: Favorece o crescimento de um microrganismo específico através da adição de determinados compostos;
- Seletivo: Favorece o crescimento de determinados microrganismos através da adição de agentes inibidores que impedem o desenvolvimento de outros;
- Diferencial: Permite a distinção de microrganismos através de reações ou produção de estruturas;
Coloração de Gram
Gram positivas - > CORADAS EM ROXO OU AZUL, GERALMENTE “COCOS”.
Gram negativas - > CORADAS EM VERMELHO, GERALMENTE “BACILOS”.
Ordem: Cristal violeta, água, lugol, álcool, água, fucsina, água.
Funções: 
- Cristal violeta: Cora as bactérias gram positivas e negativas.
- Lugol: Fixa os corantes.
- Álcool: Descolore as gram negativas.
- Fucsina: Cora as gram negativas.
Óleo de imersão: Aumenta o índice de refração, serve como uma lamínula.
Tabela do nitrato:
	Bactéria
	NO3
	NO2
	NH3
	
	A
	-
	+
	-
	Reduziu
	B
	-
	+
	+
	Reduziu
	C
	+
	-
	-
	Não reduziu
	D
	+
	+
	+
	Reduziu
	E
	+
	-
	+
	Reduziu
	F
	-
	-
	-
	Assimilou
	G
	-
	-
	+
	Reduziu
Vidrarias: Nome da vidraria e função!
Ex: Garrafa de Roux – Serve para o preparo de meio de cultura.
Tipos de fungos e suas estruturas:
- Pluricelulares (Filamentosos)
 - Unicelulares (Leveduras)
Preparo de lâminas de fungos filamentosos 
Colônia de fungo em meio de cultura ou, sobre um substrato – uso da alça de platina em forma de “L, retirando um fragmento profundo da colônia;
Colônia de fungo em meio de cultura, sobre um substrato ou crescimento sobre a superfície – uso da fita adesiva
MONTAGEM DE LÂMINAS
- Azul de algodão: Para fungos que apresentam micélio claro;
- Agente clarificante (NaOH ou KOH - 30%): Para fungos que apresentam micélio escuro.
- Cultivo de fungos em Lâminas e em tubo(?)
Aspergillus niger 					Penicillium
	Hifas septadas, estípede, vesícula, fiálide e conídios. (Aspergillus spp)
	Hifas septadas, estípede, ramos, fiálides e conídios. (Penicillium spp)
- Azul de metileno: Identificar fungos viáveis.
- Extrato de leveduras: É fonte de vitaminas do complexo B. 
Métodos de isolar bactérias aeróbicas e anaeróbicas.
- Isolamento e manutenção de bactérias anaeróbias
Meios contendo agentes redutores que proporcionam ambiente anaeróbico.
Exemplos:
Meio Tioglicolato (tioglicolato sódico e cisteína)
Ágar Azida ou ágar azida sangue (azida sódica)
Ágar para anaeróbios seg. Brewer (tioglicolato sódico, sulfoxilatoformaldeído e cistina)
Isolamento de bactérias anaeróbias Técnica Gaspak | Isolamento de bactérias anaeróbias Técnica Zeissler 
Conceitos importantes (talvez não caia na prova)
- Esterilização: destruição de todas as formas de vida microbiana, incluindo os endósporos.
- Desinfecção: destruição de todas as formas de microrganismos patogênicos de uma superfície morta.
- Antissepsia: destruição de microrganismos de uma superfície viva.
- Assepsia: conjunto de técnicas necessárias para não deixar que um microrganismos penetre num local que não o contenha.
Tipos de esterilização: 
- Forno Pauster: 180ºC A 200ºC POR 1:30 horas
- Pasteurização 
* Aquecimento a 63 ºC/30min - pasteurização baixa;
* Aquecimento a 72 ºC/25seg - pasteurização alta ou relâmpago.
- Tindalização 
* Aquecimento a 63 ºC/30min em intervalos de 24 horas por três dias consecutivos.
- Autoclavação
* Esterilização na autoclave: 120 ºC por 15 a 20 minutos 
Alguns testes bioquímicos de identificação
Redução de nitrato
Produção de enzimas: 
Urease 
Gelatinase 
Caseinase 
Amilase
Celulase 
Catalase 
Prova do SIM (sulfeto de hidrogênio, indol e motilidade)
Fermentação de carboidratos
Assimilação de carboidratos

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