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AULA - Microscópio óptico Os estudos morfológicos da célula normalmente começam com o emprego do microscópio, mais comumente denominado de microscópio de luz (por utilizar a luz como fonte de formação de imagens) ou microscópio composto ( por ser constituído por dois sistemas de lentes sobrepostas : a objetiva e a ocular). Este instrumento é considerado uma ferramenta básica em laboratórios. A observação da célula ao microscópio é proporcionada através da luz transmitida, que exige que o material biológico a ser analisado atenda dois critérios : 1- Ser suficientemente fino para que a luz possa atravessá- lo. 2- Apresentar contrastes, diferenciando regiões celulares, como os constituintes celulares possuem pouco contraste, é necessário utilizar colorações art ificiais em determinados materiais biológicos. Os corantes são substâncias que absorvem certos comprimentos de onda da luz visível e tem afinidade por constituintes celulares específicos. Partes do microscópio e suas funções Este equipamento é composto por partes mecânicas e partes óticas Parte Mecânica: Base ou Pé - base do aparelho, suporta todas as demais estruturas. Braço ou Coluna - preso a base, é rígido para suportar o microscópio quando carregado. Mesa ou Platina – é uma plataforma plana, local que porta a lâmina contendo o material biológico que se pretende analisar, na parte central da mesa existe um orifício que permite a passagem da luz proveniente da fonte, deste modo, a transferência da imagem é projetada para a lente objetiva e a partir dela, para a lente ocular proporcionando a visualização do material. Presilhas ou pinças (móvel e fixa) – estruturas que fixam a lâmina na mesa, e permitem a movimentação da lâmina com segurança e firmeza. Charriot ( e parafusos da mesa e do charriot ) – é um dispositivo preso a mesa, dotado de movimento antero – posterior e lateral, que permite movimentar a mesa possibilitando assim, percorrer vários campos da lâmina. Parafuso macrométrico - movimenta a mesa para cima e para baixo, é destinado a gerar grandes e rápidos deslocamentos na mesa a fim de auxiliar no primeiro passo da focalização. Parafuso micrométrico - é destinado a gerar pequenos e lentos deslocamentos a platina ou mesa, serve para focalização fina, ou seja, este parafuso ajusta o foco da imagem ampliando a nitidez na visualização do material biológico, a amplificação dependerá do aumento utilizado que está relacionado à objetiva escolhida, aumento de 100x, 400x e 1000x. Parte Ótica Fonte de Luz - fica preso a base do microscópio serve para projetar a luz para cima em direção a mesa, portanto, a luz é refletida sobre a lâmina contendo o material biológico a ser analisado, a luz saí da fonte de luz, atravessa o diafragma, o co ndensador, a lâmina, os feixes de luz atravessam o material biológico, atravessam as lentes objetivas e a ocular através do prisma óptico. Condensador – concentra os feixes de luz, formando um filamento de luz que atravessa o material. Diafragma – controla a intensidade de luz que atravessa o material biológico, quanto mais fino for o corte do material, mais transparente será o mesmo, menor quantidade de luz será requerida, facilitando a visualização. Lentes objetivas – são as lentes que proporcionam o aumento desejado no processo de visualização do material biológico, em geral, existem 3 ou 4 lentes objetivas em um microscópio, que possuem capacidade crescente de aumento, respectivamente, 4x; 10x; 40x; 100x. Revólver – é uma estrutura que auxilia na seleção das lentes objetivas, ou seja, suporta e posiciona estas lentes. Lentes oculares – são lentes que fornecem capacidade de aumento de 10x, é o local onde posicionamos os nossos olhos para observar o material biológico. Cálculo do Aumento Total da Imagem (ATi) : Tomando como exemplo: Para a lente ocular que utilizamos nas aulas práticas o valor de sua amplificação consiste em 10x. (OBS: existem lentes oculares com capacidade de aumento diferente de 10x, neste caso, os valores estarão indicados no próprio corpo da lente) Relembrando que as lentes objetivas podem ter capacidades de aumento de 4x; 10x; 40x; 100x. Devemos considerar também o Fator de tubo que é um fator de correção que está associado ao comprimento do tubo, entretanto, nos microscópios utilizados nas aulas práticas, o fator é corrigido e possui valor igual a 1. Se o microscópio utilizado possuir um fator de tubo com outro valor diferente de 1, a numeração estará indicada no tubo. Cálculo de Aumento Total ATi = Aumento Lente Ocular X Aumento Lente Objetiva X Fator de Tubo Deste modo, o aumento total da imagem depende da objetiva selecionada para a análise do material biológico, considerando um microscópio com Fator de Tubo igual a 1 e Lentes Oculares com capacidade de aumento igual a 10x. Teremos: AT i = 10 x 4 x 1 = 40x AT i = 10 x 10 x 1 = 100x AT i = 10 x 40 x 1 = 400x AT i = 10 x 100 x 1 = 1000x
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