Resposta exercícios aula 5 e 6 genetica livro thompsom e thompsom

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Gabarito Exercícios – Aula 5 
1- Existem várias sequências possíveis à redundância do código genético. Uma sequência 
possível da dupla hélice de DNA é: 
 5’ AAA AGA CAT CAT TAT CTA 3’ 
 3’ TTT TCT GTA GTA ATA GAT 5’ 
A RNA polimerase “lê” o filamento inferior (3’ para 5’). A sequência do mRNA resultante 
seria: 
 5’ AAA AGA CAU CAU UAU CUA 3’ 
Os mutantes representam os seguintes tipos de mutações: 
 Mutante 1: substituição de um nucleotídeo no 5º códon; por exemplo: UAU  UGU; 
 Mutante 2: mudança de matriz de leitura, deleção no 1º nucleotídeo do 3º códon; 
 Mutante 3: mudança de matriz de leitura, inserção de G entre o 1º e o 2º códons; 
 Mutante 4: deleção de três códons (09 nucleotídeos), começando na 3º base. 
 
2- Os cromossomos contêm cromatina, consistindo em nucleossomos. Os cromossomos 
contêm bandas G que contêm vários milhares de quilobases de pares de DNA (ou vários 
milhões de pares de bases) e centenas de genes, cada um contendo íntrons e éxons. Os 
éxons são uma série de códons, cada um com três pares de bases de tamanho. 
 
3- Uma mutação em um promotor poderia interferir ou eliminar a transcrição do gene. A 
mutação do códon iniciador preveniria a tradução normal. Mutações em locais de 
recomposição podem interferir com o processo normal de recomposição do RNA, gerando 
mRNAs anormais. Uma deleção de 1bp na sequência codificadora leva a mutação com 
modificação na matriz da leitura, alterando, então, a forma como o código genético é lido. 
Isto poderia alterar o aminoácido codificado e mudar a sequência da proteína. Mutação em 
um códon de parada permitiria que a tradução seguisse além do seu controle de lócus. 
 
4- As mutações em íntrons podem influenciar na recomposição do RNA, levando, então, a 
mRNAs processados de forma errada. Alu ou sequências L1 podem estar envolvidas em 
eventos anormais de recombinação entre diferentes cópias das repetições, deletando ou 
rearranjando genes. Repetições L1 podem, também, transpor ativamente no genoma, se 
inserindo potencialmente em um gene funcional, alterando sua função normal. As regiões 
controladoras de lócus influenciam a expressão adequada de genes no tempo e no espaço; 
a deleção de tais regiões podem, assim, interferir na expressão normal de um gene. Os 
pseudogenes geralmente são cópias não funcionais dos genes. Assim, na maioria dos 
casos, mutações com pseudogenes não deveriam contribuir para uma doença 
 
5- A recomposição do RNA gera um RNA final a partir do transcrito primário, pela 
combinação de segmentos de éxons e eliminação de íntrons. A recomposição do RNA é 
uma etapa crítica na expressão normal de genes em todos os tecidos e opera ao nível do 
RNA. Assim, o DNA genômica se mantém inalterado. Em contrapartida, em rearranjos 
somáticos, segmentos de DNA genômica são rearranjados para eliminar certas sequências 
e gerar genes maduros durante o desenvolvimento de células precursoras de linfócitos, 
como parte de um processo normal de geração de imunoglobulinas e diversidade de 
receptores de células T. O rearranjo somático é um processo altamente específico para tais 
genes nestes tipos celulares. 
 
AULA 06 
1- A) Southern blot ou a reação em cadeia da polimerase (PCR) de DNA obtido de amostra 
de vilosidades crônicas ou de células do liquido amniótico. Em ambos os casos, o Southern 
blot ou a PCR de outro locus devem ser feitos simultaneamente para assegurar que falhas 
na obtenção de sinal de hibridação (Southern blot) ou um produto amplificado foi causado 
por delação e não por dificuldades técnicas com a amostra de DNA ou o procedimento 
utilizado. 
B) Northen blot ou PCR quantitativa. 
C) Muitos laboratórios poderiam simplesmente amplificar o segmento e sequencia-lo. Uma 
alternativa é a análise de um produto de PCR, obtido utilizando-se primers alelo-
específicos, que flanqueiem o seguimento de DNA que contém a mudança de base; ou, se 
a mudança de base cria ou destrói um sitio de reconhecimento de uma enzima de restrição, 
você pode usar a digestão do produto de PCR, que inclua o seguimento contendo a 
mutação, para determinar se ela está presente. 
2-A principal vantagem da PCR é que ela exige muito menos DNA para análise do que a 
técnica de Southern blotting. Além disso, a técnica de PCR é muito mais rápida e barata. A 
principal desvantagem é que a PCR só pode “ ver “ trechos relativamente pequenos do 
DNA genômico (em cada análise), enquanto o Southern blotting pode examinar um gene 
inteiro. A PCR é, também, muito mais sensível a contaminação por DNA exógeno. Em 
comparação com ensaios bioquímicos, a PCR tem a mesma vantagem da rapidez. 
Entretanto a analise bioquímica é um ensaio funcional que pode detectar uma gama de 
mutação em um locus (incluindo qualquer mutação desconhecida que interfira na atividade 
enzimática). A PCR serve melhor para o exame de mutação especificas conhecidas. 
3- Todas, exceto as hemácias. Entretanto, mesmo amostra de hemácias ou soro podem 
conter DNA suficiente, oriundo de contaminação por leucócitos, para análise por PCR, pois 
essa técnica é bastante sensível. 
4-Estabelece o gene responsável por um determinado distúrbio; pode demonstrar 
heterogeneidade alélica ou em um locus; fornece ferramentas imediatas para diagnósticos 
e consulta genética; permiti a determinação da base molecular de um distúrbio, através de 
ampla pesquisa laboratorial; poderia ser usada para uma terapia de substituição gênica; 
pode apontar uma via fisiológica passível de manipulação com medicação ou dieta e, assim, 
melhorar ou prevenir tal condição. 
5- Começaria com a biblioteca de cDNA, porque o cDNA imediatamente forneceria uma 
sonda que poderia ser usada para a análise Northern examinar a quantidade e o tamanho 
do mRNA do paciente, bem como a análise de Southern de todos os exóns do DNA obtidos 
dos pacientes. Uma vez tendo p cDNA, a pesquisa nos bancos eletrônicos de dados de 
sequência genômica humana daria os limites éxons/íntrons. Isto permitiria a criação de 
primers de PCR flanqueadores de todos os éxons, para amplificar cada exon e o limite 
intron/exon para procurar pequenas mutações.