bio cel 2' métodos

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http://www.simpoed.ufop.br
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CBI 160 - Biologia Celular
Métodos de estudo das células 
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 Como trabalhar com as células?
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Métodos de Estudo da células
 Microscopias 
 Óptica ou Fotônica
Polarização, Contraste de fase, Fluorescência, Confocal...
 Eletrônica
Transmissão e Varredura
 Citoquímica e Imunocitoquímica
 Cromatografia e Eletroforese
 Fracionamento celular
 Cultura de células
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Métodos de Estudo da células
Imunocitoquímica: alta especificidade
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Métodos de Estudo da células
Eletroforese: tamanho das moléculas protéicas.
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Métodos de Estudo da células
 Cultura de células
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Métodos de Estudo da células
Princípios básicos de Microscopia
1600s

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Métodos de Estudo da células
Princípios básicos de Microscopia


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Métodos de Estudo da células
Objetivos: aumento e 
resolução

Limites de resolução:
Olho: 0,2 mm
Óptico: 0,2 m
MET: 0,2 nm
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Métodos de Estudo da células
Microscopia óptica X eletrônica
Microscópio Eletrônico de Transmissão - MET
Microscópio Eletrônico de Varredura - MEV
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Métodos de Estudo da células
Microscopia óptica X eletrônica
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Métodos de Estudo da células
Microscopia óptica X eletrônica
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Métodos de Estudo da células
Microscopia eletrônica de transmissão e varredura
MET
MEV
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Métodos de Estudo da células
Observação de células vivas
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Métodos de Estudo da células
Observação de células preservadas
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Métodos de Estudo da células
Preparo do material para microscopia
1- FIXAÇÃO
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Métodos de Estudo da células
Preparo do material para microscopia
1- FIXAÇÃO
Aldeídos
Tetróxido de ósmio
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Métodos de Estudo da células
Preparo do material para microscopia
1- FIXAÇÃO
2- DESIDRATAÇÃO 
Acetona e álcoois
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Métodos de Estudo da células
Preparo do material para microscopia
1- FIXAÇÃO
2- DESIDRATAÇÃO 
3- INCLUSÃO em resinas
Parafina
Polímeros plásticos
Epoxi
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Métodos de Estudo da células
Preparo do material para microscopia
1- FIXAÇÃO
2- DESIDRATAÇÃO 
3- INCLUSÃO em resinas
4- CORTE DO MATERIAL:
Microtomia e ultramicrotomia
	1-5 m MO
	70-90 nm MET
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Métodos de Estudo da células
Preparo do material para microscopia
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Métodos de Estudo da células
Preparo do material para microscopia
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Métodos de Estudo da células
Preparo do material para microscopia
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Métodos de Estudo da células
5- COLORAÇÃO para MO: 
corantes básicos ou acidófilos (ex. eosina) 
corantes ácidos ou basófilos (ex. hematoxilina)
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Métodos de Estudo da células
5- CONTRASTAÇÃO para MET: 
metais pesados
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Métodos de Estudo da células
?
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Métodos de Estudo da células
Microscopia óptica de contraste de fase
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Métodos de Estudo da células
Microscopia óptica de fluorescência
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Métodos de Estudo da células
Microscopia óptica de fluorescência
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Métodos de Estudo da células
Microscopia óptica confocal
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Métodos de Estudo da células
Microscopia eletrônica de transmissão ou varredura
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Métodos de Estudo da células
Microscopia eletrônica de transmissão ou varredura
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