Histologia-técnicas histológicas

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Histologia: Técnicas 
Histológicas
Sabrina B
Este material foi criado e pensado com carinho para 
vocês estudante que pretende conhecer mais sobre 
conteúdos de biologia. Espero que faça bom 
proveito!
Se gostar, continue consumindo nossos materiais. 
Bons estudos!
Histologia
Ciência que estuda os tecidos 
biológicos, desde a sua 
formação, estrutura e 
funcionamento
Técnicas histológicas
Preparação dos tecidos destinados ao estudo à 
microscopia de luz 
- Tecidos à fresco
- Tecidos mortos e preservados
→ PROBLEMAS:
- Células translúcidas
- Células pequenas e complexas
 → VISUALIZAÇÃO: Coloração
ESTUDO CELULAR EM MICROSCOPIA
❖ COLETA DE MATERIAL BIOLÓGICO
▪ Montagem 
Fino ou transparente para ser posto em lâmina.
ESTUDO CELULAR EM MICROSCOPIA
ESTUDO CELULAR EM MICROSCOPIA
❖ COLETA DE MATERIAL BIOLÓGICO
▪ Esfregaço: para fluidos. Deslizamento do material na lâmina.
ESTUDO CELULAR EM MICROSCOPIA
❖ COLETA DE MATERIAL BIOLÓGICO
▪ Espalhamento: para mucosas. Deslizamento do material na 
lâmina.
Espalhamento de células da mucosa oral corados pelo 
verde janus. As células pavimentosas da mucosa 
estão inteiras e contém seus núcleos centrais
ESTUDO CELULAR EM MICROSCOPIA
❖ COLETA DE MATERIAL BIOLÓGICO
▪ Esmagamento: com a lamínula. Estudo da divisão celular
❖ COLETA DE MATERIAL BIOLÓGICO
▪ Decalque: para órgãos moles: núcleos ficam impressos na 
lâmina.
ESTUDO CELULAR EM MICROSCOPIA
ESTUDO CELULAR EM MICROSCOPIA
❖ COLETA DE MATERIAL BIOLÓGICO
▪ Corte histológico: cortes extremamente finos de tecido para 
fixação na lâmina.
Métodos e técnicas de preparo
 
•Fixação (interromper a morte programada): Formol, 
glutaraldeído, misturas fixadoras, etc.
• Desidratação (álcool 70, 95 e 100%)
• Diafanização retirar H2O da célula / transparência: xilol
• Infiltração / impregnação 
• Corte Microtomia
 
• Coloração
• Montagem 
• Visualização 
Métodos e técnicas de preparo
6. Microtomia
Desidratação Diafanização Infiltração
MicrotomiaColoraçãoMontagem
Fixação
Métodos e técnicas de preparo
 Preparação de cortes histológicos
• Infiltração / impregnação
→ parafina
 metacrilato
gelatinas
resinas plásticas
• Corte:micrótomo
 - 1 a 100 µm 
- 0,5 a 60 µm
**1 µm=10-6m
 
Métodos e técnicas de preparo
• Coloração Simples: corantes básicos
Hematoxilina(roxo) Azul de toluidina e Guinsa Azul de 
metileno
• Coloração Simples: corantes ácidos
Eosina(rosa) Orange G Fucsina ácida 
 
Métodos e técnicas de preparo
• Coloração Especial: citoquímica e 
histoquímica
Identificação de moléculas nas células
PAS (periodic acid Schiff): glicogênio e 
glicoproteínas
•Feulgen: DNA 
 
Métodos e técnicas de preparo
• Coloração Especial: citoquímica e histoquímica
Identificação de moléculas nas células
• Substratos de enzimas: atividade de enzimas
 
 
Fosfatase ácida
Fosfatase alcalina
• Coloração Especial: citoquímica e histoquímica
Identificação de moléculas nas células
• Sudan Black, Sudan III, Azul de Nilo: Lipídeos
Métodos e técnicas de preparo
• Coloração Especial: citoquímica e histoquímica
Identificação de moléculas nas células
• Ribonuclease: RNA
•Técnicas variadas para aminoácidos: Millon, diaminoazobenzeno, 
Sakaguchi
Métodos e técnicas de preparo
VISUALIZAÇÃO 
1. Microscópio ótico
- Uso de luz branca comum
1. Oculares
2. Revólver
3. Objetiva
4. Platina 
5. Charriot
6. Condensador
7. Diafragma do condensador
8. Regulador de altura condensador
9. Macrométrico
10. Micrométrico
▪Projeta um cone de luz sobre as células no microscópio.
▪Após atravessar as células, o feixe luminoso cônico penetra nas 
objetivas.
OBJETIVAS
▪Projetam uma imagem cônica aumentada no plano das oculares.
OCULARES
▪ Amplia a imagem e fornecem aos olhos.
CONDENSADOR
▪ É a capacidade do sistema ótico de separar detalhes. 
• É expresso pelo limite de resolução.
PODER DE RESOLUÇÃO
▪ É a menor distância entre dois pontos para que eles apareçam individualizados.
LIMITE DE RESOLUÇÃO
DIFERENÇAS DE IMAGENS ENTRE MICROSCÓPIO ÓPTICO (MO) E MICROSCÓPIO 
ELETRÔNICO (ME)
MICROSCOPIA ÓPTICA EM 
LÂMINA DE TECIDO 
SANGUÍNEO
MICROSCOPIA ELETRÔNICA (ME) DE 
BACTÉRIAS COMENSAIS
HEMÁCIAS LEUCÓCITO
PLAQUETAS
EOSINÓFILOS
LINFÓCITO
Unidades de medida microscopia
MICRÔMETRO (µm) 
NANÔMERO (nm)
 1mm = 1.000 
μm
1μm = 1.000 nm
1nm = 10 
Å
ÂNGSTROM (Å)
Ampliação do objeto
OBJETIVAS
(COM OCULAR DE 10X)
AMPLIAÇÃO TOTAL
(VER SEMPRE AS OCULARES)
04 x 40 X
10 x 100 X
40 x 400 X
100 x 
(Sempre usar com óleo de Imersão)
1000 X
TÉCNICAS Constituintes Núcleos Citoplasma Fibras 
colágenas
Fibras 
reticulares
 
HE
HEMALÚMEN 
(Hematoxilina),
EOSINA
HEMATOXILINA 
FÉRRICA
 AZUL
 
PRETO
 
 ROSA ROSA
 
TRICRÔMICO 
DE MASSON
FUCCINA ÁCIDA
E PONCEAU DE 
XILIDINA,
VERDE-LUZ
 
 
VERMELHO 
 VERDE
 
IMPREGNAÇÃO
ARGÊNTICA
PARA FIBRAS 
RETICULARES
SOLUÇÕES DE 
SAIS DE 
PRATA 
 
PRETO
•ABRAHAMSOHN, P. Histologia. 1. ed. Rio de Janeiro : Guanabara Koogan, 2016.
•JUNQUEIRA, L. C.; CARNEIRO, José. Histologia básica. 10.ed. Rio de Janeiro: 
Guanabara Koogan, 2004.
•JUNQUEIRA, LC; CARNEIRO, J. Histologia básica. 12. ed. Rio de Janeiro: 
Guanabara Koogan, 2013.
•VALLE, W.K.; NAHIRNEY, P.C. Netter: bases da histologia. Rio de Janeiro: 
Elsevier, 2008.