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14/02/2014 1 MÉTODOS DE ESTUDO EM BIOLOGIA Microscópio Óptico Microscópio Óptico 14/02/2014 2 Microscópio Óptico (luz) 1a etapa: FIXAÇÃO – Evita a autólise; – Impede a atividade e proliferação de bactérias; – Permite a coloração Microscópio Óptico 2a etapa: INCLUSÃO – Parafina Microscópio Óptico 3a etapa: MICROTOMIA – Lâmina de aço Microscópio Óptico 4a etapa: COLORAÇÃO – Corantes básicos: Grupamento cromóforo catiônico; Combinam com grupos ácidos (aniônicos) das moléculas celulares; DNA e RNA são BASÓFILOS Ex. de corantes: Hematoxilina, azul-de- metileno. 14/02/2014 3 Microscópio Óptico – Corantes ácidos Cromóforo é aniônico; Combinam com componentes celulares básicos das proteínas citoplasmáticas- ACIDÓFILOS. Microscópio Óptico Microscópio Óptico Outras técnicas de coloração: – Citoquímica: identificação e localização das moléculas que constituem as células e na classificação de tipos de leucemias. EX. PAS: Ácido Peróxido de Schiff (cora glicogênio). - Imunocitoquímica; - Biologia Molecular: PCR, eletroforese. Microscópio eletrônico 14/02/2014 4 Microscópio eletrônico Canhão de elétrons que produzirão figuras, formadas através de sombra e luz; Utiliza o epoxi para inclusão dos órgãos; Microtomia realizada com navalha de diamante; Fina camada de ouro sobre o corte. Microscópio eletrônico Varredura Microscópio eletrônico
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