Atlas de micologia

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Atlas de Micologia
Jéssica T. Dornelles
Acadêmica do curso de biomedicina
Ulbra Carazinho
Pitiriase versicolor
Malassezia sp.
Micose superficial benigna e crônica que causa placas hipo ou hiperpigmentadas, escamosas e de bordas delimitadas que podem unir-se cobrindo extensas áreas do corpo.
Agente etiológico: Malassezia sp.
É uma levedura, esta associada a agua e praia.
Em parasitismo se apresenta como células leveduriformes globosas ou ovais agrupadas e filamentos curtos septados e irregulares.
Malassezia furfur mais encontrada nas micoses em humanos, não cresce em meio Sabouraud, é lipo dependente, cresce a 37 e 40°C;
Malassezia pachydermatis encontrada em animais, cresce em Sabouraud, sem suplemento lipídico, cresce a 37 e 40°C
Malassezia sympodialis, lipo dependente com brotamento tipo simpodial, cresce a 37 e 40°C
(a) Lesões características, hipo e hiperpigmentadas.
(a)
(b)
(b) Exame direto com KOH de Malassezia sp, aspecto de massa com almondegas.
Brotamento simpodial.
Malassezia globosa, lipo dependente a 37°C pequeno crescimento a 40°C não cresce, é Esculina-negativa e catalase positiva.
Malassezia obtusa, difere apenas na capacidade de ser Esculina-positiva.
Malassezia restrita, Esculina-negativa, não cresce a 40°C, catalase-negativa, lipo dependente.
Malassezia slooffiae, lipo dependente, cresce a 37 e 40°C, Esculina-negativo e catalase-positiva.
Diagnostico
A amostra deve ser coletada por raspagem com lamina de bisturi ou lamina de vidro ou ainda pode ser usada a técnica da fita adesiva transparente somente no exame direto. A lâmpada de Wood apresenta fluorescência, porem esta pode ter muitos interferentes.
O exame direto é feito com adição de KHO a 10%, também pode ser utilizada tinta azul de metileno ou Parker Quink, na imagem (b) é possível ver a microscopia direta de Malassezia sp.
A cultura pode ser feita nos meios usuais de micologia desde que para as espécies lipo dependentes seja acrescido ácidos graxos como óleo de soja, girassol, milho.
Incubar entre 35-37°C, as colônias aparecem entre o 2º e 4º dia de incubação. 
Colônias: textura cremosa, de cor creme a marrom-clara, convexa , superfície lisa ou levemente rugosa.
As células leveduriformes apresentam membrana de duplo contorno e a forma pode ser globosa, oval ou elipsóide. Sendo a M. furfur a única espécie que pode apresentar as 3 formas e formar filamentos curtos e irregulares geralmente com 2 septos.
(c)
(c) Colônia de Malassezia sp.
Tinea Negra
Infecção superficial benigna que acomete o estrato córneo da pele, caracterizada pela presença de lesões de cor preta ou marrom-escura, com bordas bem definidas e sem escamação, ocorrendo nas palmas das mãos e plantas dos pés.
Agente etiológico: Hortaea werneckii.
É uma levedura polimórfica, em parasitismo se apresenta como hifas demáceas, septadas e ramificadas.
Diagnóstico
A coleta da amostra é realizada por raspagem das bordas da lesão com lamina de bisturi ou lamina de vidro.
O exame direto é realizado com KOH a 10-20%.
A cultura pode ser feita em meio Sabouraud, incubados a temperatura ambiente ou 25°C, ate 30 dias. A cultura tem crescimento lento cerca de 3 semanas.
Durante a primeira semana a colônia é leveduriforme, textura cremosa, topografia convexa, superfície lisa, cor negro-olivácea com brilho metálico e bordas bem definidas, na segunda semana aparece o micélio aéreo , com características de fungo filamentoso, a periferia da colônia torna-se aveludada, com cor cinza-escuro, marrom ou negra.
A 42°C as colônias mostram pouco desenvolvimento, a 45°C não se desenvolve.
(a)
(a) Lesão característica de tinea negra.
(b)
(b) Exame microscópico direto, mostrando hifas demáceas, septadas e ramificadas.
(c)
(c) Colônias com 1 semana de incubação.
(d)
(d) Colônias com 2 semanas de incubação.
Microscopicamente observa-se inicialmente leveduras gemulantes de cor marrom-escura podendo apresentar septo central.
Depois de 3 semanas de cultivo, com a colônia madura observa-se hifas, densamente septadas de cor marrom.
(e)
(e) Leveduras de cor marrom-escura.
(f)
(f) Hifas marrom-escuras, densamente septadas.
Piedras 
São micoses superficiais estritas, na maioria das vezes não causam reposta inflamatória no hospedeiro.
São dois tipos:
Piedra branca
É causada pelo Trichosporon sp, é assintomática, benigno de baixo contagio, que acomete pêlos e cabelos em geral.
Apresenta pequenas nodosidades, de consistência mole, coloração branco-amarelada ou amarelo acastanhada, aspecto fusiforme, aderidas ao pelo, se desprendem facilmente ao toque.
Após o exame físico para a detecção dos nódulos, os pelos afetados devem ser coletados, é feito um exame direto onde pode ser vistas as hifas hialinas, artroconídeos e poucos blastoconídeos.
Os fios devem ser semeados em 3 tubos de ágar Sabouraud (sem antibiótico, com antibiótico e com antibiótico e cicloeximida) deve ser incubado a temperatura ambiente durante 2 a 5 dias.
As colônias são de textura glabrosa, com relevo do rugoso ao cerebriforme, a coloração tanto no verso quanto reverso vai do branco ao creme.
Na microscopia da colônia pode ser 
visto hifas hialinas, septadas e com 
artroconídeos regulares, ovoides 
ou redondos , bem como numerosos 
blastoconídeos.
(a)
(a) Fio de cabelo com piedra branca, observa-se as hifas e o fio intacto
(b)
(b) Microscopia de microsporon sp.
Piedra preta
Enquadra-se na categoria das feo-hifomicoses superficiais. É uma infecção benigna, de caráter crônico e baixo contágio.
Agente etológico: Piedraia hortae.
Se apresenta como nódulos endurecidos e de coloração escura que aparece nos cabelos, raramente acomete outros pêlos. O fungo é demáceo. Diferentemente da piedra branca os nódulos não saem facilmente do fio.
Diagnóstico
Os fios afetados são coletados , observando estes ao microscópio com solução de KOH a 10-20%, podem ser visualizados estruturas castanhas aderidas ao fio.
Para a cultura são semeados em 3 tubos os fios, tendo cuidado para que o nódulo fique em contato com o meio. (Sabouraud sem antibiótico, com antibiótico e com antibiótico e cicloeximida) deve ser incubado a temperatura ambiente (25-30°C) durante 2 a 3 semanas.
Colônia: cor castanho-escuro, verde –oliva ou preta, em torno de 1 cm de diâmetro, com textura glabrosa ou veludosa, centro em relevo apiculado que se torna cerebriforme, periferia plana com borda irregular, com o passar do tempo forma uma textura veludosa na periferia de cor cinza-esverdeado, o reverso é negro.
Na microscopia são vistas hifas acastanhadas, grossas, algumas irregulares, septadas, bem como numerosos clamidoconídios, associados ou não a um material amorfo, de coloração castanha clara que envolve as estruturas fúngicas.
(d)
(d) Fio de cabelo com piedra negra, nódulo escurecido.
(e)
(e) Colônia de Piedraia hortae.
(f)
(f) Microscopia de Piedraia hortae.
Dermatofitoses 
As dermatofitoses são micoses cutâneas causadas por fungos capazes de invadir a camada córnea da pele em toda sua extensão, porção queratinizada dos pêlos e/ou lamina ungueal.
As dermatofitoses são causadas por três gêneros de fungos, o Microsporum, Epidermophyton e Trichophyton, cada um com suas espécies envolvidas.
Os fungos de cada espécie podem ser identificados ainda como antropofílicos, que evoluíram e se especializaram em infectar o homem, zoofílico, espécies que saíram do solo e determinam lesões em animais e geofílico como espécies que são encontradas no solo.
As dermatofítoses causam manifestações clinicas que são denominadas segundo a região do corpo que afetam que é precedida do nome Tinea ou tinha, temos então:
Tinea capitis (couro cabeludo), Tinea corporis (corpo), Tinea barbae (barba), Tinea manum e pedis (mãos e pés), Tinea unguium (unhas) ou ainda onicomicoses.
Gênero Microsporum
Dentre os principais fungos deste gênero estão:
Microsporum canis
É zoofílico, transmitidos ao homem por animais como cães e gatos, muito encontrado em Tinea capitis em crianças, clinicamente mostra fluorescência a lâmpada de Wood. As lesões se caracterizam por áreas de alopécia, pode raramente causar onicomicoses.
Cresce em 10 dias.
Colônias
Verso: textura algodonosa, relevo discretamente umbilicado e radiado, cor branca.
Reverso: cor amarelo-limão, com o tempo a cor se difunde ao meio que pode se tornar castanho.
(a)
(a) Colônias de Microsporum canis, verso e reverso em placa e em tubo.
A microscopia da colônia mostra grande quantidade de macroconídeos fusiformes, de paredes grossas e com muitos septos (5-7) podem ser vistos mais septos ate 15. os microconídeos nem sempre estão presentes e não possuem valor diagnóstico.
Podem ser observados clamidoconídeos, órgãos nodulares e hifas pectinadas.
Microsporum gypseum
É geofílica, na maioria das vezes afeta áreas expostas do corpo, não apresenta fluorescência a lâmpada de Wood.
Cresce rápido de 3-5 dias.
Colônias
Verso: superficie plana, de bordas irregulares, de textura pulvurulenta, a cor varia entre varias matizes de amarelo-acastanhado.
Reverso: variações de cores que vão do alaranjado ao marrom, o pigmento não se difunde ao meio.
Tem forte tendência ao polimorfismo.
(b)
(c)
(d)
(e)
(b) (c) (d) (e) imagens microscópica da colônia , mostrando os macroconídeos fusiformes.
Microscopicamente desde muito jovem a colônia já apresenta muitos macroconídeos simétricos com 3-7 septos de paredes finas, extremidades arredondadas e superficie rugosa, algumas cepas tem microconídeos piriformes.
(a)
(b)
Colônia com 7 dias de incubação verso e reverso.
colônia com 14 dias de incubação verso e reverso.
(c)
(c) Microscopia de Microsporum gypseum, macroconídeos simétricos.
Microsporum audouinii
É antropofílica, causa lesões extensas no couro cabeludo e na pele.
O parasitismo capilar é ectotrix, apresenta fluorescência a lâmpada de Wood.
Colônias
Verso: planas e finas de cor branca e textura veludosa.
Reverso: segue a mesma cor que o verso.
Microscopicamente a colônia apresenta raros microconídeos e macroconídeos, porem apresenta clamidósporos terminais e intercalares frequentemente, podem ser observadas hifas pectinadas e hifas em raquete.
(a)
(a) Colônia de M. audouinii, textura veludosa.
(b)
(e)
(c)
(d)
(b) (c) (d) (e) microscopia de M. audouinii mostrando clamidósporos.
Microsporum fulvum
É geofílico, causa na maioria das vezes Tinea manum e pedis.
Colônia
Verso: plana, espessa, tem crescimento rápido, a textura é ligeiramente pulvurulenta e sua cor é creme, a colônia é alta e ocupa toda a placa.
Reverso: varia do vermelho-escuro ao amarelo-pálido.
Microscopicamente mostra muitos macroconídeos muitas vezes em cachos, de parede finas que possui comprimento maior que largura, possui hifas em espiral.
(a)
(b)
(c)
(b) verso da colônia, alta de cor creme.
(c) Reverso da colônia. 
(d)
(d) Microscopia de M. fulvum com macroconídeos compridos.
Microsporum persicolor
É zoofílico, sendo encontrado em ratos e morcegos, causa Tinea corporis em humanos, não afeta o cabelo in vivo, mas perfura o fio in vitro.
Colônias
Verso: são planas, branco a cor rosada, textura granular e apresenta franjas periféricas.
Reverso: laranja a vermelho.
Microscopicamente há numerosos microconídeos piriformes, macroconídeos são raros quando presente se assemelham aos de T. mentagrophytes, as hifas são enroladas.
(a)
(a) Colônias de M. persicolor, com franjas periféricas, verso e reverso.
(b)
(b) Microscopia de M. persicolor, semelhante a T. mentagrophytes.
Microsporum nanum
É zoofílico, frequentemente relacionada com micoses em suínos, não apresenta fluorescência a lâmpada de Wood.
Colônia
Verso: textura veludosa, coloração bege ao creme-escuro.
Reverso: marrom-avermelhado.
Microscopicamente mostra macroconídeos de paredes finas, 1 a 3 unicelular, em forma de pêra, poucos microconídeos.
(a)
(a) Colônia de M. nanum
(c) 
(c) Microscopia de M. nanum com macroconídeos pequenos com 1 ou 2 septos.
(b)
(b) Reverso da colônia. 
Gênero Trichophyton
Trichophyton rubrum
É antropofílico, afeta pele, pêlos e unhas.
Tem crescimento intermediário de 12-16 dias.
Colônias
Verso: textura algodonosa ou veludosa, com pregas radiais formando uma pequena saliência no centro, a cor é branca e com o tempo pode se tornar vermelha.
Reverso: coloração avermelhada, algumas vezes apresenta matizes do castanho, é difusível ao meio.
Microscopicamente há numerosos microconídeos piriformes, os macroconídeos quando presentes são alongados, quase que cilíndricos.
(a)
(a) Colônias de T. rubrum, verso e reverso.
(b)
(c)
(d)
(b) (c) (d) microscopia de T. rubrum, macroconídeos cilíndricos e microconídeos piriformes.
Trichophyton mentagrophytes
Considera-se duas espécies: T. mentagrophytes var mentagrophytes (zoofílica) T. mentagrophytes var interdigitale (antropofílica)
Colônia Apresenta crescimento rápido com maturação de 6-11 dias. 
T. Mentagrophytes var mentagrophytes
Verso: textura pulvurulenta, sem relevo acentuado, cor varia do branco-amarelado ao castanho-avermelhado.
Reverso: pigmento castanho que pode tender para o vinho.
T. Mentagrophytes var interdigitale
Verso: textura veludosa ou algodonosa, cor branco-amarelada.
Reverso: pouco pigmentado de tom castanho ou avermelhado.
Microscopicamente é visto muitos microconídeos redondos e agrupados em cachos, os macroconídeos quando presentes tem forma de charuto, com uma a 6 septos transversais, as hifas são enroladas em forma de espiral.
(a)
(a) Colônias de T. mentagrophytes, verso e reverso.
(b)
(b) Microscopia de T. mentagrophytes, microconídeos redondos, hifas enroladas e macroconídeos em forma de charuto.
Trichophyton tonsurans
É antropofílico, muito relacionado com Tinea capitis, não perfura pelo in vitro.
Colônia de crescimento intermediário (12-16 dias)
As colônias podem apresentar aspecto variável.
Verso: textura veludosa a algodonosa, com o tempo podem ate ser pulvurulentas, podem ter relevo apiculado, crateriforme e ate cerebriforme com algumas pregas radiais, coloração do branco ao bege.
Reverso: tons de castanho-avermelhado.
Microscopicamente apresenta numerosos microconídeos de aspecto grosseiro, com formas variadas, podendo apresentar-se como pequenas ou grandes estruturas claviformes ou ainda, microconídeos dilatados e de aspecto arredondado. Clamidoconídeos intercalares, hifas em raquete e artroconídeos estão presentes em culturas velhas. Os macroconídeos tem aspecto irregular.
(a)
(a) Colônias de T. tonsurans.
(b)
(b) Microscopia dos microconídeos e macroconídeos irregulares.
(c)
(c) Hifas com microconídeos irregulares lateralmente as hifas.
(d) 
(d) Macroconídeo irregular.
Trichophyton verrucosum
Antropofílico relacionado a infecções em bovinos, em humanos causa lesões bastante inflamatórias, não fluoresce a lâmpada de Wood, o parasitismo no fio é endotrix.
Crescimento lento (13-25 dias)
Colônia
Verso: textura varia de veludosa a glabrosa, com relevo rugoso ou cerebriforme, coloração branco a amarelo ocre.
Reverso: tons de amarelo, pigmento não difusível ao meio.
A microscopia mostra grandes cadeias formadas por clamidoconídeos grandes.
(a)
Verso da colônia. (b) reverso da colônia.
(b)
(c)
(d)
(e)
(c) (d) (e) cadeias de clamidoconídeos grandes a microscopia.
Trichophyton concentricum
É antropofílico, causa micose estritamente da pele.
Crescimento lento (20-30 dias)
Colônias
Verso:
textura glabrosa, relevo cerebriforme amarelado com o passar do tempo pode se tornar castanho-escuro.
Reverso: segue o verso.
Microscopicamente há hifas hialinas septadas acompanhadas ou não de “hifas em candelabro” mas nunca hifas com “cabeça de prego”.
(a)
(b)
(a) (b) colônias de T. concentricum primeiramente amarelada depois torna-se castanho-escuro.
(c)
(c) Hifas em candelabro.
(d)
(d) Microscopia T. concentricum
(e)
(e) Lesões caracteristicas de T. concentricum
Trichophyton schoenleinii
É antropofílico, atualmente raramente causa infecção.
Crescimento lento (14-30 dias)
Colônias
Verso: textura varia de glabrosa seca a veludosa baixa, relevo cerebriforme e coloração do bege ao castanho-escuro.
Reverso: segue o verso. 
Microscopicamente geralmente não são observados microconídeos nem macroconídeos, porem são vistas numerosas hifas septadas e em bifurcação, associadas a “hifas em candelabro” e “hifas em cabeça de prego”.
(a)
(a) Colônia de T. schoenleinii.
(b) 
(b) Microscopia de T. schoenleinii.
Gênero Epidermophyton
Epidermophyton floccosum
Fungo antropofílico.
Crescimento é típico mostrando colônias maduras em 7 a 10 dias. É capaz de perfurar pelo de cavalo in vitro.
Colônia 
Verso: textura algodonosa baixa com relevo umbilicado, tornando-se pulvurulenta na região intermediaria, a coloração é amarelo-esverdeada ou castanho-amarelada ou ainda rubra, as bordas tem textura glabrosa.
Reverso: a coloração acompanha o verso porem sempre mais acentuada com pigmento difusível ao meio.
Microscopicamente os macroconideos tem parede finas, com dois a cinco septos e agrupados em cachos, em colônias mais velhas podem ser observados numeroso clamidoconídeos intercalares, distais e em cadeias.
(a)
(a) Colônias de E. floccosum verso a esquerda e reverso a direita.
(b)
(b) Microscopia de E. floccosum.
(c)
(c) Microscopia de E. floccosum.