Diagnóstico microbiológico das infecções do Sistema Nervoso Central

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Diagnóstico microbiológico das infecções do Sistema Nervoso Central (SNC)
Infecções SNC:
- Viral: Assépticas.
- Bacteriana
- Fungica
Mais comum: Hemofilus Influenza (etiologia não especifica)
Microrganismos envolvido/Faixa etária 
E. coli, S. agalactiae, L. monocytogenes, herpes simples tipo 2 (Recém-nascido) 
L. monocytogenes, S. agalactiae e E. coli (abaixo 2 meses) 
H. influenzae, S. pneumoniae, N. meningitidis (abaixo 10 anos) 
N. meningitidis, vírus (Adulto jovem) 
S. pneumoniae, N. meningitidis (Adulto) 
Cryptococcus neoformans, Listeria monocytogenes (Imunocomprometido)
Relacionar idade com casos de meningite: Qual microrganismo pode ser? Dizer o achado clinico baseado na idae.
Tipo de amostra: Liquor! (Liquido cefalorraquidiano)
OBS: Escolher tubo mais turvo por conter maiores informações (parâmetros).
Parâmetros: Contagem de leucócitos, células predominantes, dosagem de proteína, glicose, lactato.
Volume mínimo recomendável:
1 mL para isolamento de bactérias, 
2 mL para isolamento de fungos e;
2 mL para isolamento de microbactérias;
Controle de qualidade:
Reagentes na validade.
Testar kits (com amostras positivas e negativas)
Testes rápidos: Diagnostico rápido através da detecção de presença de antígenos. (aglutinação de partículas do látex/ eliza).
Mais comuns: N. meningitidis; (sorogrupos A, C, Y, W135 e B, E. coli K1,) S. pneumoniae, Haemophilus influenzae tipo b, S. galactiae e Cryptococcus neoformans.
Sensibilidade:
65 a 71% para S pneumoniae; 
88 a 95% para Haemophilus influenzae; 
97% para S. agalactiae; 
64% para Neisseria meningitidis, com 98% de especificidade.
Microscopia direta
 Coloração pelo método de Gram; 
 Coloração pelo método de Ziehl-Neelsen; 
 Tinta da China ou Tinta Nanquim. 
Paciente: parâmetros x idade x microscopia = identificação do microrganismo.
Meios de cultura.
Agar sangue.
Agar CHOCOLATE
Tayner Martin (seletivo para Neisseria gonorrohoeae e N. meningitidis) 
NaCl (0,9 %): Meio hipotônico, célula não perde agua, não ganha h²o.
OBS: Gargarejo: Elimina bactérias sensíveis. 
Identificação.
	N°
	Nome
	Microscopia 
	Testes
	Padrão de Hemolise
	1
	Streptococcus pneumoniae
	Método de Gram: Diplococos, Gram positivos, lanceolados;
	Sensibilidade optoquina, bile solubilidade, sorotipagem (teste rápido).
	Aghar sangue: alfa Hemolitico.
	2
	Haemophilus influenzae
	Cocobacilos ou bacilos, Gram negativos;
	Satelismo, teste rápido.
	Capaz de fermentar a glicose.
	3
	Neisseria meningitidis
	Diplococos Gram negativos
	TayerMartin, Teste de oxidade e catalase (Positivos), teste rápido.
	Diferenciação entre Nicelia são gram positivos, s. são sorotipagem.
	4
	Streptococcus agalactiae
	Cocos, Gram positivos em cadeia;
	CAMP+: semear o s. em Aghar sangue, e semear perpendicularmente ao s. aureus. Se formar certas, é positivo. 
Bile esculina: Negativo. 
NaCl 6,5% : Sensível.
Teste rápido.
	Aghar sangue: beta hemolíticos grupo B.
	5
	Listeria monocytogenes
	Bacilos, Gram positivos, curtos;
	Teste da catalase: Positivo; Teste da oxidase: Negativo;
Bile esculin0: Positivo.
 NaCl 6,5% :Resistente; 
Teste CAMP: Positivo; Fermentação da glicose: Positivo
	Motilidade: Móvel em TA (“guarda-chuva”)
Diagnóstico microbiológico das infecções sistêmicas (Hemoculturas)
Cultura de sangue em casos de: Bacteremia (bactéria na corrente sanguínea: amidalite) e sepssemia (na corrente sanguínea e coloniza). 
Definição: Coleta em um par de frascos para testes de microrganismos aeróbios e anaeróbios. 
Deve-se fazer uma ou mais punções, porém se houver solicitação médica de uma terceira amostra, repetir o procedimento após outros 15 a 20 minutos ou em 24 horas, dependendo da urgência do estado clínico e / ou necessidade do paciente. 
a) Gram positivos  S.aureus, Staphylococcus coagulase negativo (ECN), Enterococcusspp., Streptococcusspp .e mais raramente outros como L.monocytogenese Corynebacterium diphtheriae;
Gram negativos  Enterobactérias (E.coli, Salmonella, Enterobacter spp, Serratia marcescens, Klebsella pneumoniae; bacilos Gram negativos não fermentadores, como,P.aeroginosa,Acinetobacter baumanni, Burkholderia cepacia e Stenotrophomonas maltophila. 
Gram negativos (cocos): N.meningitidis;
Coleta automatizada é melhor porque diminui a manipulação.
Minimizar ação deletéria: Usa-se gelatina para diminuir os efeitos deletério do lps!!!
Os frascos são sensíveis ao consumo e a produção de gases!!! NELES da pra perceber se há contaminação nos frascos.
Nunca apalpar o local para ver se a veia esta viável para coleta.
O ideal é colher a amostra quando o paciente estiver com febre (transporte em temperatura ambiente 35°/37°).
Não recomendável
 Não pode ser feita a coloração de gram em exame a fresco, porque tem pouca sensibilidade.
Meio de cultura: AGAR SANGUE E AGAR CHOCOLATE!
Mínimo: 7 Dias de cultura. 
Metodologia MANUAL 
Metodologia manual: Não é recomendável! 
Encubar por 24h, e semear (sangue/chocolate)
Os frascos são negativos.
Frasco de hemocultura
Positivo.
Semear em aghar sangue ou agar chocolate.
 24HEmitir laudo parcial.
Identificar e fazer antibiograma.
Negativo
		Positivo.
Semear em aghar sangue ou agar chocolate.
	 48H
Negativo
	 Ate 7° dia. Emitir laudo de ausência de infecção e/ou fazer teste para presença de fungo (10 dias)
Negativo
Positivo.
Semear em aghar sangue ou agar chocolate.
Metodologia AUTOMOTIZADA.
Vantagem: Rapidez e diminuição do trabalho, de risco de erro.
Se a estufa não alarmou: Ausência de infecção.
Já parte dos frascos positivos (certeza que estão infetados)
Colocaração de gram com emissão de laudo.
[desenho do caderno)
Inoculação com agulha bacteriológica.
Aula: 16/05/2017