06 Transcrição

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TRANSCRIÇÃO
Copia de um segmento do DNA em RNA.
Ocorre APENAS quando a célula precisa de um produto gênico.
Processo para síntese de todos os RNAs da célula.
Reflete o estado fisiológico da célula.
O conjunto de genes expressos em uma dada situação é variável.
Processo caralisado pelas RNAs polimerases.
A função primária de todo gene – DNA -, é produzir uma cadeia polipeptídica, isto é, uma proteína. 
Transcrição: síntese de RNA
Processo de transferência de informações do DNA para o RNA.
A transcrição não é realizada em toda a molécula, mas sim em genes ou grupos de genes escolhidos.
Propriedades do RNA
Geralmente é unifilamentar (fita única) e não fita dupla como o DNA.
O RNA tem o açúcar ribose.
Nucleotídeos de RNA (ribonucleotídeos) são formados por A, G, C e U (esta no lugar de T).
O RNA pode catalisar reações biológicas (ribozima).
Classes de RNA
RNA mensageiro (mRNA): codifica a informação necessária para fazer cadeias polipeptídicas (proteínas).
RNA funcionais: o próprio RNA é o produto funcional final.
Principais tipos de RNA
RNA mensageiro: contém a informação genética para a sequência de aminoácidos das proteínas.
RNA transportador: identifica e transporta os aminoácidos até o ribossomo.
RNA ribossômico: constituinte dos ribossomos.
RNAs funcionais
tRNA 
estrutura secundaria com grampos e alças formando um trevo.
Alto numero de bases modificadas depois de sua transcrição.
 rRNA 
 Pequenos RNA nucleares (snRNA): participam do processamento dos RNAs transcritos. Alguns formam o spliceossomo que atua na remoção dos íntrons. 
MicroRNA (miRNA): RNA de interferência, participam da regulação de genes eucarióticos. 
 Pequenos RNA de interferência (siRNA): protegem a integridade do genoma de animais e plantas. 
Transcrição
A primeira etapa da transferência da informação do gene para a proteína é produzir um filamento de RNA cuja sequência é complementar ao DNA que lhe deu origem.
Transcrição em procariontes 
RNA polimerase em procariontes
A RNA polimerase sintetiza cadeias de RNA no sentido 5’->3’, adicionando ribonucleotídeos na extremidade 3’ OH da fita em alongamento. Ao contrário da DNA polimerase, essa enzima não requer um primer ou iniciador para começar seu processo de síntese. Grande parte das cadeias de RNA recém-sintetizadas começam com pppG ou pppA (o grupo 5’-trifosfato não é clivado para liberar PPi, permanecendo intacto durante toda a transcrição), o que serve como marcação da ponta 5’. 
Grande e complexa, a holoenzima RNA polimerase de E. coli possui cinco tipos de subunidades. Seu centro catalítico se encontra no chamado cerne da enzima (a2bb’). E, além das funções descritas no próximo slide, a RNA polimerase também interage com proteínas ativadoras e repressoras que modulam a taxa de expressão gênica nas células. 
	Subunidade
	Gene
	Número
	Papel
	a (α)
	rpoA
	2
	Participa da iniciação, liga-se a sequencias reguladoras.
	b (β)
	rpoB
	1
	Participa da iniciação e alongamento, forma ligações fosfodiester.
	b’ ((β’)
	rpoC
	1
	Liga-se a molde de DNA.
	s (σ)
	rpoD
	1
	Reconhece promotor, inicia síntese (dissociando-se logo após).
	o (ω)
	
	1
	Desconhecido. 
Etapas da transcrição
Inicio
A RNA polimerase se liga a uma sequência especifica de DNA chamada de promotor.
Reconhecimento de regiões especificas no promotor para a RNA polimerase se ligar, além dos cofatores de transcrição. 
Alongamento
À medida que a RNA polimerase se move ao longo do DNA, desenrola o DNA à frente dela, produz a fita de mRNA e reenrola o DNA que já foi transcrito.
Término
O alongamento continua até que o RNA polimerase reconheça sequencias especiais de nucleotídeos que atuam como um sinal para o término da cadeia.
O final da transcrição é um processo bem controlado de RNA (sinais de término) indicam o local para a finalização da síntese dessa molécula.
Término da transcrição em eucariontes
Na bactéria E. coli existem no mínimo duas classes de sequências de sinalização do término da transcrição: uma utiliza a proteína r (rho) e outra não (rho-independente) .
Terminação independente de rho (grampo de terminação)
O pareamento intramolecular das sequências complementares do RNA recém-sintetizado forma uma estrutura em grampo. Esse acontecimento desencadeia os seguintes eventos: 
Parada da RNA polimerase; 
Destruição parcial do híbrido RNA-DNA (proporcionando instabilidade da região que permanece ligada);
 Dissociação do RNA nascente da enzima RNA polimerase;
Restabelecimento da região dupla-fita do DNA; 
Liberação da RNA polimerase da fita molde do DNA. 
Terminação dependente de rho
A proteína rho reconhece os sinais de término para a RNA polimerase. Existe uma sequência de 40 a 60 nucleotídeos que é rica em C e pobre em G. Rho se liga em um segmento chamado de sítio rur, assim a RNA polimerase para e o complexo é desfeito.