Duplicação do DNA

Esta é uma pré-visualização de arquivo. Entre para ver o arquivo original

Duplicação do DNA
Profa. Tamara De Carli
DNA no contexto biológico
Replicação do DNA
O DNA é capaz de se autoduplicar (replicar) para conservar a informação genética.
TRÊS ETAPAS:
Iniciação
Ampliação ou alongamento da cadeia
Terminação
Rápida e precisa (até 1.000nt/s), mecanismos de reparo
Semiconservativa
 Bidirecional
Características importantes da replicação do DNA
Replicação Semiconservativa
Cada um dos filamentos parentais é conservado e serve como molde para a síntese de um novo filamento complementar.
ABERTURA DA FITAS
ONDE E COMO AS FITAS SE ABREM???
A replicação semi-conservativa se dá a partir de forquilhas de replicação (ORI)
Como determinar a origem e de replicação? (REPLICADOR):
- estrutura repetitiva
seqüências ricas em AT
A partir de um “ponto” vai se formando uma bolha chamada bolha de replicação comprovando a existência de um ponto de origem da replicação
Elementos necessários para a replicação
Replicação de DNA
Replicação de DNA
Elementos necessários :
Enzima DNA polimerase
Outras enzimas
Iniciador (primer) – pedaço de RNA que serve para enzima DNA polimerase iniciar a nova cadeia;
Desoxinucleosídeos trifosfatados (dNTPs)
Fita molde
DNA Helicase
Proteínas que hidrolisam ATP quando ligadas a cadeias simples de DNA (DnaB e Rep) 
Perturbam as pontes de hidrogênio através dessa hidrólise do ATP
mantém a fita aberta
Proteína de ligação unifilamentar (SSB) – RPA humano
Conhecidas como proteínas desestabilizadoras de hélices
Ligam-se fortemente para expor fitas simples de DNA sem encobrir as bases
São incapazes de abrir as fitas porém auxiliam a helicase
Evita formação de grampos
As DNA-polimerases sempre requerem um INICIADOR (PRIMER) previamente pareado ao molde a ser copiado
DNA primase
Todas as DNA polimerases operam na direção 5'  3' a partir de um molde antiparalelo
O DNA é replicado por enzimas
chamadas DNA polimerases
DNA Polimerases
Existem 4 tipos de DNA polimerase
Todas as DNA polimerases conhecidas são capazes de estender fitas de DNA apenas na direção 5' 3‘ REPLICAÇÃO CONTINUA
Como, então, se dá a síntese na direção 3' 5' da forquilha de replicação?
O que ocorre é uma REPLICAÇÃO DESCONTÍNUA numa direção e contínua na outra; os fragmentos (de Okasaki) são unidos mais tarde por uma ligase
Complexo multienzimático da forquilha de replicação : ativado pela hidrólise do ATP
O processo de replicação ocasiona um “problema de enrolamento” que pode implicar na quebra do DNA
Topoisomerase (DNA girase)
Nuclease reversível que se liga covalentemente a um fosfato, clivando a ligação fosfodiéster (REVERSÍVEL)
Topoisomerase I:
Clivagem temporária na fita simples
- Topoisomerase II:
Forma ligação covalente com ambas as fitas
Separam as moléculas de DNAs filhas
RNAse HI e DNA ligase
RNAse HI:
Atua removendo os iniciadores (degrada RNA)
LACUNA
DNA ligase
Telomerase
Telômeros - Extremidades dos cromossomos (eucariotos)- seqüências repetitivas
 Telomerase age evitando a perda do fim do cromossomo.
Fidelidade de replicação
A acurácia da replicação de DNA é crítica para a reprodução celular 
Se a polimerase não pudesse corrigir erros haveria a inserção de 1 base errada a cada 104 nucleotídeos incorporados
Correção: Reduz a taxa de erro para 1 base errada a cada 109
VIDEO REPLICAÇÃO
DÚVIDAS ???