Hemograma

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HEMOGRAMA
Prof. Mateus
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Conceito
“Exame de Triagem que auxilia no diagnóstico, prognóstico e monitoração do Paciente. Avaliando quantitativamente e qualitativamente os elementos do sangue”.
Composto de 3 partes:
Eritrograma
Leucograma
Plaquetograma
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Coleta
As amostras devem estar com uma quantidade de anticoagulante compatível para que não ocorra diluições, alterações morfológicas ou coagulação.
 
O anticoagulante utilizado é o EDTA 10%, pois conserva melhor a morfologia das células sanguíneas.
EDTA (tampa roxa). O EDTA (Ácido Etileno Diamino Tetracético) remove o cálcio necessário à coagulação e é o anticoagulante mais indicado para contagens de células sanguíneas porque induz uma anticoagulação completa com mínimos efeitos sobre as células.
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Cuidados!
Ausência de hemólise, fibrina ou microcoágulos, pois a presença destes causa alterações nas contagens celulares.
Amostra deve ser enviada ao laboratório rapidamente, diversos pesquisadores afirmam que o contato prolongado com o EDTA (principalmente à temperatura ambiente) pode induzir a formação de agregados celulares e alterar os resultados das contagens (ex. pseudotrombocitopenia).
Se caso não for possível o envio dentro de um curto período, preserve sua amostra a uma temperatura de 4oC até no máximo 24 horas (obs: o esfregaço sangüíneo deve ser feito até no máximo 3 horas após a colheita).
Manter sempre a proporção de sangue e anticoagulante correta para obter qualidade e quantidade de volume necessário ao exame. (1 de gota de EDTA para 3 a 5 mL de sangue).
Homogeneizar cuidadosamente o tubo com sangue por inversão, por 4 a 5 vezes, logo após a coleta para evitar o processo de coagulação.
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Tubos com EDTA
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Eritrograma
Hematócrito:
Porcentagem do Volume Globular no sangue total.
É um exame rápido, de boa reprodutibilidade e preciso, que exige pequena quantidade de sangue para seu processamento
Valores de referência:
Homens: 
Mulheres:
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Técnica
Preencher um tubo capilar com sangue até ¾ da sua altura
Fechar uma das extremidades.
Colocar o capilar em uma centrífuga apropriada (centrífuga própria para microhematócrito)
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Alterações no Hematócrito
Diminuem:
 hipervolemia e aumento no volume plasmático.
Hemorragias
Anemias Hemolíticas
Aumentam
desidratação e redução no volume plasmático.
síndromes mieloproliferativas,
Patologias cardíacas ou pulmonares,
Exposição a factores como o tabaco ou altitudes elevadas
Patologias com hemoglobina funcionalmente anormais. 
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Contagem de Eritrócitos
Realizadas por contadores automáticos ou manualmente com a Câmara de Neubauer.
Uma contagem elevada de hemácias pode indicar:
 policitemia absoluta ou relativa. 
Uma contagem deprimida de hemácias pode indicar:
Anemia, 
sobrecarga de líquido 
hemorragia além de 24 horas. 
Hematócritos, hemoglobina, índices hematimétricos e estudos de glóbulos brancos são necessários para confirmar o diagnóstico
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Valores de Referência
Homens: 4,2 – 6,3 milhões/mL
Mulheres: 3,8 – 5,5 milhões/mL
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Câmara de Neubauer
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Contagem
Colocar lamínula na câmara de neubauer
Encostar cuidadosamente a ponta da pipeta na borda da lamínula, preencher cuidadosamente a câmara.
O líquido deve preencher apenas um lado da câmara e não deve chegar aos canais de cada lado da área de contagem
Deixar as células sedimentarem
Focalizar a área demarcada da câmara.
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Contagem
O volume com a lamínula colocada corresponde a 0,1 mm3.
Para obter o número de células/ml, multiplicar corrigir o valor obtido por 10.000,
Pois: 
1 ml = 1 cc 1 cc = 10 x 10 x 10 mm = 1.000 mm3.
Na câmara de Neubauer obtemos o número de celula por 0,1 mm3, então devemos multiplicar por 10, portanto 10 x 1.000 = 10.000 
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Citometria de Fluxo
Técnica utilizada para contar, examinar e classificar partículas microscópicas suspensas em meio líquido em fluxo.
Um feixe de luz (normalmente laser) de um único comprimento de onda (cor) é direccionado a um meio líquido em fluxo. Um número de dectores são apontados ao local onde o fluxo passa através do feixe de luz; um na linha do feixe de luz (Forward Scatter ou FSC) e vários perpendiculares a este (Side Scatter ou SSC) além de um ou mais detectores fluorescentes. Cada partícula suspensa passando através do feixe dispersa a luz de uma forma.
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Citometria de Fluxo
É possível explorar vários tipos de informação sobre a estrutura física e química de cada individual partícula. FSC correlaciona-se com o volume celular e SSC depende da complexidade interna da partícula (por exemplo: forma do núcleo, quantidade e tipo dos grânulos citoplasmáticos e rugosidade da membrana).
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Dosagem Hemoglobina
A hemoglobina é o pigmento responsável pela cor vermelha do sangue e participa do transporte de O2 dos pulmões para os tecidos e CO2 dos tecidos para os pulmões.
A concentração de hemoglobina é expressa em g/dL, 
É a melhor forma de avaliação laboratorial 
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Manual
Líquido de Drabkin (hemolisante)
Utiliza-se 3 tubos de ensaio onde são colocados 5 ml do Líquido de Drabkin (líquido hemolisante) mais 20 m l de sangue em cada tubo. Em seguida homogeneiza-se a solução e espera 5 minutos para ocorrer a reação hemolítica. Após esse tempo levar os 3 tubos ao espectofotometro, onde será feita a leitura da reação.
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Valores de referência
Homens: 14 – 18 g/dL
Mulheres 12 – 16 g/dL
Normalmente constituí 32% do peso das hemácias
O total de hemoglobina é de 800 g em um adulto.
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Índices Hematimétricos
VCM – Volume Corpuscular Médio
HCM – Hemoglobina Corpuscular Média
CHCM – Concentração de Hemoglobina corpuscular média.
RDW - Red Cell Distribution Width – Distribuição da largura das Células Vermelhas.
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VCM
Média do Volume dos eritrócitos. (tamanho)
se pequenas são consideradas microcíticas (< 80fl, para adultos)
se grandes consideradas macrocíticas(> 96fl, para adultos) 
Se normais, normocíticas (80 - 96fl).
O resultado do VCM é dado em femtolitro. 
VCM= ht/no eritrócitos X 10
Valores de referência: 80 – 102 fL
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HCM
Índice hematimétrico que corresponde à média de hemoglobina por eritrócito.
É o peso da hemoglobina na hémácia.
Seu resultado é dado em picogramas
HCM = Hb/No eritrócitos X 10.
Valores de Referência: 27 – 32 pg.
Relacionado à hipocromia, hipercromia, normocromia, Microcitose e Macrocitose.
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CHCM
É a concentração da hemoglobina dentro de uma hemácia.
Esse índice permite a avaliação do grau de saturação de hemoglobina no eritrócito
Relacionado à hipocromia, normocromia ou hipercromia.
Valores de referência: 30 – 35 g/dL
É importante observar que na esferocitose o CHCM geralmente é elevado.
CHCM = Hb/Ht X 100. 
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RDW
Distribuição da largura das Células Vermelhas
Um índice que indica a anisocitose (variação de tamanho.
Representando a porcentagem de variação dos volumes obtidos.
Valores de referência: 11,5 a 15%.
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Alterações Eritrocitárias
Cor – Anisocromia
Tamanho – Anisocitose
Forma – Poiquilocitose.
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Hipocromia
Hipocromia é a redução da coloração do eritrócitos (aumento da palidez central das hemácias) devido à deficiência de Hb.
 CHCM.
Os eritrócitos das crianças sadias são freqüentemente hipocrômicos quando comparados com os dos adultos.
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Hipocromia
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Hipercromia
Os esferócitos e as células irregularmente contraídas coram-se mais intensamente que os eritrócitos normais.
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Macrocitose
É o aumento do tamanho dos eritrócitos (Aumento do diâmetro celular).
 VCM.
Discreta macrocitose é uma característica fisiológica da gravidez e dos adultos idosos.
Os eritrócitos dos recém-nascidos mostram acentuada macrocitose quando comparados com os do adulto.
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Macrocitose
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Anemias
VCM>92 
Anemia hemolítica persistente( hiperhemólise )
Anemia pós-hemorrágica.
Anemia megaloblástica ( def. de Vit B12 ou def. de ácido fólico).
Síndromes mielodisplásicas
Hipotireoidismo 
Insuf. Hipofisária.
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Microcitose
Microcitose é a diminuição do tamanho dos eritrócitos
A microcitose poderá ser geral ou existir em parte da população de eritrócitos.
Os eritrócitos de crianças sadias são menores que os de adultos.
Os negros, como um grupo, possuem eritrócitos menores que os dos brancos
 VCM
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Anemias
Anemia ferropriva 
Talassemia
Hemossiderose (raríssimo)
Anemia de inflamação crônica
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Anisocitose
A anisocitose é o aumento da variabilidade do tamanho dos eritrócitos que excede a observada em um indivíduo sadio. 
Quando discreta pode não ter nenhum significado clínico, mas pode também acompanhar a maioria das anemias em seu início.
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Poiquilocitose
Eritrócitos de forma anormais.
A altitude pode produzir um certo grau de poiquilocitose em indivíduos hematologicamente normais.
A altitude produz um certo grau de poiquilocitose em indivíduos hematológicamente normais.
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ESFEROCITOSE
São células com forma esférica ou aproximadamente esféricas.
O diâmetro de uma esfera é menor que o de um objeto discóide do mesmo volume, por isto o esferócito parece menor que um eritrócito.
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Esferócitos
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Eliptocitose
Refere-se às hemácias com forma oval ou elípticas.
Quando o número de ovalócitos ou eliptócitos é elevado é provável que o paciente tenha uma anormalidade herdada, afetando o citoesqueleto dos eritrócitos.
Os ovalócitos ou eliptócitos macrocíticos são característicos da anemia megaloblástica e da mielofibrose idiopática.
Mais comuns na eliptocitose hereditária.
Mais raramente nas Talassemias.
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Eliptócitos
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Hemácias em Alvo
Os eritrócitos em alvo possuem uma área de coloração aumentada no meio da área de palidez central.
Eritrócitos em alvo formam-se como consequência de um excesso de membrana em relação ao volume do citoplasma.
Eles podem ser microcíticos, macrocíticos ou normocíticos
Talassemias, na hemoglobina C, icterícia obstrutiva                                     e na doença hepática severa.
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Hemácias em Alvo
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Dacriócitos
Os dacriócitos são hemácias em forma de lágrima ou pêra.
Ocorrem provavelmente por retardo da saída                                     da medula óssea.
Na anemia megaloblástica, nas tatassemias e na esplenomegalia, metaplasia mielóide, fibrose da medula óssea.
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Dacriócitos
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Estomatocitose
Os eritrócitos apresentam uma fenda, ou estoma, linear central.
A causa mais comum da estomatocitose é o excesso alcoólico e a hepatopatia alcoólica, onde também é freqüente a macrocitose.
Hemácias com grande permeabilidade ao sódio.
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Estomatócitos
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Drepanócitos
Hemácias em forma de foice, 
Característica da anemia falciforme.
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As células falciformes 
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Acantócitos
Hemácias pequenas com projeções irregulares. 
Célula peculiar abetalipopro-                                    teinemia hereditária,
Presente também em outras dislipidemias, na cirrose hepática, na hepatite do recém-nascido, na anemia hemolítica, após esplenectomia e após administração de heparina
Normalmente encontradas com hemácias crenadas.
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Acantócitos
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Crenadas 
Hemácias com várias pontas pequenas.
Falência renal aguda (na uremia)
Quando o paciente faz tratamento com heparina, deficiência de piruvatokinase.
Normalmente são artefatos de técnica (esfregaço, Amostra antiga, soluções salinas).
Excesso de lipídeos
Contato com EDTA por mais de 8 horas.
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Hemácias crenadas
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Hemácias Mordidas
Quando ocorre a formação de um precipitado de hemoglobina nas hemácias (chamados de Corpúsculos de Heinz) ocorre remoção destes precipitados pelo baço formando um aspecto de hemácia mordida.
a glicose-6-P sofre ação da G6Pdesidrogenase, formando a 6-fosfo-gluconato
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G6PD 
É coenzima da metaemoglobina redutase acessória, que serve para manter o heme com ferro na forma reduzida Fe++. Na def. da  G6PD, a metaemoglobina (não reduzida), persiste e precipita formando os corpúsculos de Heinz ( lembre-se que estes predispõem a hemólise, pois é facilmente fagocitável). 
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Esquizócitos
Fragmentação mecânica:
Anemias microangiopáticas
Válvulas cardíacas (obstáculos mecânicos), CEC.
Anemias megaloblásticas
Alguns tipos de tumores
Displasia mielóide.
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Esquizócitos
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Hemácias em Rouleaux
Pilhas de rolos de hemácias
Aparece em altas concentrações de globulinas anormais, mieloma múltiplo e de igual maneira macroglobulinemia.
Crioaglutinação.
Anemias auto-imunes
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Hemácias em Rouleaux
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Hemácias em Rouleaux
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Anel de Cabot
 Figura em forma de anél observada na anemias megaloblásticas, podendo em alguns casos, torcer-se, assuimindo um aspécto de oito (8). Pode também se observada em outras situações de heritropoiese anormal. 
É um filamento fino, de cor vermelho-violeta, concêntrico em relaçãoa membrana celular que resulta de restos mitóticos de mitoses anômalas.
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Anel de Cabot
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Corpúsculos 
de HOWEL JOLLY 
Corpúsculo de inclusão pequeno, basófilo, restos nucleares de mitoses anômalas. 
São observados em pacientes esplenectomizados, nas anemias hemolíticas e megaloblásticas.
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Corpúsculos 
de HOWEL JOLLY 
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PONTILHADO BASÓFILO 
Granulações variáveis em número e tamanho, de cor azulada, agregados de ribissomos remanescentes.
Encontradas na intoxicação por metais especialmente o chumbo, 
nas talassemias, e em outras alterações da hemoglobina, 
nas mielodisplasias e em outras formas de anemia severa. 
Anemias Sideroblásticas (dorgas, idiopáticas)
Também encontrados em recém-nascidos (pontilhado bem delicado
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PONTILHADO BASÓFILO 
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Pontilhado basófilo
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Corpúsculos de pappenheimer
Correspondem a 1 ou mais grânulos presentes nos sideroblastos ou siderócitos.
Siderócitos – Eritrócitos normais que contém grânulos de Fe livre contidos em fagossomos.
Presentes em Anemias de formação anormal da hemoglobina (Talassemia) e esplenectomizados.
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Corpúsculos de pappenheimer
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Corpúsculos de pappenheimer
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Plasmodium
Parasitas causadores da malária.
Podem apresentar diversos aspectos dentro das hemácias, variando de acordo com a maturação.
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Artefato
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Leucometria
É o estudo da série branca. 
Composto de duas partes:
Contagem quantitativa de leucócitos
Contagem qualitativa de leucócitos (diferencial)
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Contagem de leucócitos
Quantitativa:
Marcador de inflamação mais simples e mais facilmente disponível.
Técnica mais utilizada – Citometria de Fluxo.
Técnica manual – Líquido de Turk.
Os leucócitos totais são expressos em mil/mm3.
Valores de referência – 4.500 a 10.000 /mm3 
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Técnica Manual
Para realizar esse exame utiliza-se um tubo de ensaio pequeno onde é colocado 0,4 ml de Líquido de Turk e depois 20 μL de sangue. Aguardar 5 minutos. 
Em seguida levar 20 μL desse sangue diluído a Câmara de Neubauer.
Medidas da Câmara de Neubauer 20 x 10 = 50
FÓRMULA DO LÍQUIDO DE TURK:
ÁCIDO ACÉTICO GLACIAL – 1 ML
VIOLETA GENCIANA 1% - 1 ML
ÁGUA DESTILADA – 100 ML
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Câmara de Neubauer
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Lâmina diferencial
Contagem de 100 leucócitos em lâmina de esfregaço sanguíneo.
Cálculo de número relativo e absoluto de leucócitos.
Corado com Panótico rápido - Três líquidos básicos:
O primeiro é o àlcool etílico,
O segundo a Hematoxilina
O teceiro a Eosina. 
May-Grunwald – Giemsa – Azul de metileno, Eosina, Azur II e Eozinato Azur.
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Valores de referência
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Contadores manuais de leucóctios
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Neutrófilos
Pleocariócitos
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Neutrófilos
Desvio à esquerda – Aumento de células imaturas.
Desvio
à direita – aumento de células pleocarióciticas
Alterações megaloblásticas
Mielodisplasias
Insuficiência renal
Uso de corticóides
Baquetas de Tambor – Vistas nas síndromes de múltiplos cromossomos X, Mielodisplasias e Anomalias de cromossomos somáticos.
Anomalia de Pelger-Huet – Hipossegmentação nuclear. – Mielodisplasias, Leucemias agudas, recuperação de quimioterapias.
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Anomalia de Pelger-Huet
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Anomalia de Pelger-Huet
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Alterações citoplasmáticas
Granulações tóxicas – Grânulos primários hipercromáticos – Infecções, Toxemias, gravidez e administração de G-CSF e GM-CSF.
Microvacúolos – Fusão de granulos com vacúolos fagocíticos – infecções e intoxicação alcoólica.
Corpos de Dohle – Grumos de material do R.E. devido à maturação acelerada e síndromes mielodisplásicas.
Anomalia de Chédiak-Higashi – Grânulos Gigantes que variam de cor – Albinismo, Pancitopenia, Infecções recorrentes.
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Granulações Tóxicas
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Corpos de Dohle
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Anomalia de Chédiak-Higashi 
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Termos utilizados 
Leucocitose: aumento no número total de leucócitos.
Leucopenia: diminuição do número total de leucócitos.
Eritrocitose ou policitemia: aumento do número de hemácias no sangue.
Eritroblastemia: diminuição do número dos precursores das hemácias.
Trombocitopenia: diminuição do número normal de plaquetas.
Bicitopenia: diminuição em número de duas populações celulares.
Neutropenia: diminuição do número de neutrófilos.
Eosinofilia: aumento do número de eosinófilos.
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Termos Utilizados
Pancitopenia: diminuição em número das três populações celulares.
Desvio à esquerda: aumento do número de bastões acima de 5/mm³, ou presença de formas mais imaturas como mielócitos e metamielócitos.
Linfocitose: aumento do número de linfócitos.
Linfopenia: diminuição do número de linfócitos.
Neutrofilia: aumento do número de neutrófilos
Monocitose: aumento do número de monócitos.
Basofilia: aumento do número de basófilos.