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Fermentação Rodrigo Oliveira Aguiar (PPGBAA/UFRA) Ministério da Educação Universidade Federal Rural da Amazônia-UFRA Instituto Sócio Ambiental e dos recursos Hídricos- ISARH PROGRAMA DE PÓSGRADUAÇÃO EM BIOTECNOLOGIA APLICADA À AGROPECUÁRIA (PPGBAA) Metabolismo É o conjunto de transformações que as substâncias químicas sofrem no interior dos organismos vivos ANABOLISMO Reações químicas que produzem nova matéria orgânica nos seres vivos. Sintetizam-se novos compostos (moléculas mais complexas) a partir de moléculas simples (com consumo de energia sob a forma de ATP) CATABOLIMO Reações catabólicas, ou reações de decomposição/degradação, são reações químicas que produzem grandes quantidades de energia (ATP) a partir da decomposição ou degradação de moléculas mais complexas (matéria orgânica). 2 As reações metabólicas podem ser classificadas em 1 EXOTERMICA OU EXERGÔNICA -Reações que liberam energia quando ocorrem Ex: Fermentação e respiração aeróbica 3 2 ENDOTERMICA OU EXERGÔNICA -Reações que absorvem energia quando ocorrem EX: Fotossíntese e quimiossíntese Fermentação A Fermentação é um processo anaeróbio de síntese de ATP (trifosfato de adenosina) sem o envolvimento da cadeia respiratória, etapa característica do processo de Respiração celular Processo anaeróbio de transformação de uma substância em outra, produzida a partir de microrganismos, tais como bactérias e fungos, chamados nestes casos de fermentos. A Fermentação é um processo de obtenção de energia utilizado por algumas bactérias e outros organismos. Ele ocorre com a quebra da glicose (ou outros substratos como o amido) em piruvato, que depois é transformado em algum outro produto, como o álcool etílico e lactato 4 Energia A Energia pode ser definida como a capacidade de gerar mudança ou realizar trabalho, e também como a capacidade para rearranjar uma porção de matéria. Trabalho: movimentação de matéria contra forças opositoras (gravidade, atrito e etc.). 5 Organismos vivos precisam de energia para: Desempenho de trabalho mecânico e contração muscular e outros movimentos celulares Transporte ativo de moléculas e íons Síntese de moléculas a partir de compostos mais simples 6 ATP 1mol ATP= 7300 cal (7,3 Kcal) a ADP= 10900 to AMP (10,9 Kcal) 1mol de glicose = 671KCal 1 Cal= 4,18 J 1 mol de glicose= 160 kJ 1 mol de ATP = 1,8 Kj 1,000 joules = 1 kilojoule = 1 Btu 1 Watt= 1J/s (unidade de potencia) 7 Aceptores Universais de elétrons A fotofosforilação envolve a oxidação da H2O a O2, onde o NADP + é o aceptor de elétrons e é absolutamente dependente da energia luminosa. a fosforilação oxidativa ocorre nas mitocôndrias e a fotofosforilação, nos cloroplastos Aceita um próton H+ e 2 elétrons (íon hidreto) Nicotinamida Adenina Dinucleotídeo (fosfato) 8 FAD e FMN A fosforilação oxidativa envolve a redução do O2 a H2O com elétrons doados pelo NADH e FADH2, e ocorre igualmente na presença de luz ou na escuridão. Aceita 2 Hidrogênios (2 prótons e 2 elétrons) Flavina Adenina Dinucleotídeo 9 Transformação da energia 10 Estruturas e organelas da célula vegetal 11 Fotossíntese 12 E os animais? Como obtém energia? 13 Ciclo de Krebs 14 15 Mas o que acontece se faltar oxigênio ? 16 Via Glicolítica e suas possíveis rotas metabólicas (A.LEHNINGER) 17 Produtos da fermentação 18 Tipos de Fermentação 19 Via catabólica Glicose etanol + CO2 Piruvato sofre descarboxilação (irreversível); Catalisada pela piruvato descarboxilase; Tiamina pirofosfato (TPP) – estabilidade entre as cargas negativas; Acetaldeído é reduzido a etanol; Reação final: Glicose + 2ADP + 2 Pi 2 etanol + 2 CO2 + 2 ATP + 2 H2O Importância: NADH oxidado em NAD+ Fermentação Alcoólica 20 leveduras que destacam-se como produtoras do etanol: Saccharomyces, Schizosaccharamyes, Pichia; Saccharomyces Schizosaccharamyes Pichia 21 Produção de etanol: é o solvente mais comum; matéria-prima de maior uso no laboratório e na indústria química. Saccharomyces cerevisae; crescimento vigoroso e uma elevada tolerância ao etanol grande rendimento final; etanol é inibidor em altas concentrações (tolerância das leveduras) crescimento cessa a 5% de etanol (v/v) taxa de produção zero em 6 a 10% de etanol (v/v); Glicose --- enzimas da levedura --- 2 etanol + 2 CO2 sacarose, sucos de frutas, milho, melaço, beterrabas, batatas, malte, cevada, aveia, centeio, arroz sorgo; 22 Bebidas destiladas: Cachaça produzida com o álcool; a coluna de destilação fracionada não precisa ser tão eficiente, 60% de H2O - teor alcoólico aprox. 40º GL; Vodca: a partir de cereais; Uísque: a partir de cevada; Uísque bourbon: a partir de milho. Bebidas Fermentadas: Vinho uva sofre fermentação; líquido é filtrado e colocado em barris e garrafas; sabor e o aroma de um vinho dependem muito do tipo de uva Cerveja: a partir da cevada; Champanhe: a partir da uva. 23 classificada em dois tipos: Homolática e Heteroláctica Gram (+) Carnobacterium, Enterococcus, Lactococcus, Lactobacillus, Lactosphaera, Fermentação Lática 24 Leuconostoc, Oenococcus, Pediococcus, Streptococcus, Tetragenococcus, Vagococcus e Weissella. • O abaixamento do pH (aumento de acidez) causado pelo ácido láctico provoca a coagulação das proteínas do leite e a formação do coalho, usado na fabricação de queijos e iogurtes. • 25 • O sabor azedo do leite fermentado deve-se ao ácido láctico formado e eliminado pelos lactobacilos. • (probiótico) Streptococcus thermophilus é o microorganismo mais importante em alimento Rhizopus oryzae – apresenta produção comparável às bactérias homofermentativas quando em meio glicose; Uso preferível - tempo gasto na fermentação é menor e a separação do produto, mais simples. 26 A fermentação láctica, tal como a alcoólica, realiza-se em duas fases: 1ª fase: glicólise 2º Fase: Fermentação Equação: Glicose + 2ADP + 2 Pi → 2 lactato + 2 ATP + 2 H2O + 2 H + 27 Consiste na oxidação parcial, aeróbica, do álcool etílico, com produção de ácido acético; produção de vinagre comum e do ácido acético industrial; deterioração de bebidas de baixo teor alcoólico e na de certos alimentos; Acetobacter ou Gluconobacter, pertencentes a família Pseudomonaceae. ácido acético e CO2 Fermentação acética 28 Bactéria ideal: resiste à elevada concentração de álcool e de ácido acético; pouca exigência nutritiva; elevada velocidade de transformação do álcool em ácido acético; bom rendimento de transformação (sem hiperoxidar o ácido acético); 29 Mecanismo de fermentação: Acetobacter realizam processos catabólicos e anabólicos por aerobiose e anaerobiose. O mecanismo de produção do ácido acético ocorre em duas etapas: É formado o acetaldeído por oxidação; O acetaldeído é convertido a ácido acético. (75% do acetaldeído é convertido a ácido acético e os 25% restantes a etanol) H2O NAD NADH2 30 A reação química realizada por bactérias anaeróbias, através da qual se forma o ácido butírico; Se produz, a partir da lactose ou do ácido láctico com formação de ácido butírico e gás; É característica das bactérias do gênero Clostridium : -Surgimento de odores pútridos e desagradáveis Fermentação Butírica 31 BactériasProdutoras de Ácido Butírico: solo, plantas, esterco (leite); Clostridium tyrobutyricum e Clostridium butyricum. Anaeróbias, formadoras de esporos, temperatura ótima de 37°C; não crescem bem no leite porque contêm O2 –queijo (condições anaeróbias); Clostridium butyricum 32 Obrigado 33
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