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1 11-- IntroduçãoIntrodução:: � Bioquímica Clínica = Química Patológica e Química Clínica � Aquele ramo do laboratório clínico no qual os métodos químicos são aplicados p/ pesquisa de uma doença. � Os testes de bioquímico Clínica compreendem mais de 1/3 de todas as investigações laboratoriais de um hospital. 2 todas as investigações laboratoriais de um hospital. 22-- Uso de Testes BioquímicosUso de Testes Bioquímicos:: Objetivos dos testes bioquímicoObjetivos dos testes bioquímico � Diagnóstico � Monitoramento do tratamento � Busca de uma doença � Avaliação do prognóstico a partir do momento que o diagnóstico tenha sido feito. �Freqüentemente o laboratório de Bioquímica esta envolvido na pesquisa sobre a base bioquímica da doença e nos testes clínicos de novos medicamentos. � Para a interpretação dos resultados, devem ser incluindo no pedido todos os detalhes possíveis, de forma a auxiliar tanto a equipe do laboratório quanto ao clinico. � A identificação do paciente tem que está correta, e o pedido deve incluir algumas indicação sobre a 3 patologia que esta sendo investigada. � As análises solicitadas devem estar indicadas claramente. � A maioria dos testes é feita no sorosoro de sangue venoso ou na urinaurina. 11-- Preparo do paciente: FATORES INTERFERENTESPreparo do paciente: FATORES INTERFERENTES �Exercício físico: atividade metabólica �Jejum �Adulto: 08-12 horas �Criança: 04-06 horas 4 �Criança: 04-06 horas �nunca deve ser maior que 14 horas �Prolongado: glicose bilirrubina lipídeos(AG, glicerol) �Exames sem jejum: Coleta: após 2 horas refeição K+ e triglicérides turbidez 1. Repouso: mínimo de 4h 2. Dieta: Certos alimentos (carne) Bebidas (chá, café, coca-cola) 3. Tabagismo: Cortisol, epinefrina, carboxihemoglobina, hemoglobina e leucócitos. pela ação da nicotina, pode afetar diversos parâmetros: ↑ glicose, ↑epinefrina, ↑ GH, ↑ lipídios e ↑ hemácia. 4. Efeitos fisiológicos de drogas : 1. In vivo: comprometimento alguns órgãos: fígado 2. In vitro: interação com metodologia analítica, podendo ser interferência química ou física. 3. a aplicação de injeções intramuscular pode levar o aumentos de algumas enzimas musculares 5 musculares Exemplos de medicamentos: anticoncepcionais orais, diuréticos, anti- inflamatórios esteroidais, etc. 5. Estresse, ansiedade Adrenalina, Glicose, secreção insulina. 6. cafeína:6. cafeína: Induz o aumento de glicemia (influenciada pela catecolamia), cortisol, ácidos graxos livres, excreção de suco gástrico e diurese. 7. Etanol: lactato ,AU, triglicérides e GGT a ingestão de álcool induz do aumento de glicose e triglicéridesglicose e triglicérides o álcool pode provocar danos hepáticos e induzir o aumento na circulação da gama-glutamil-transferase ��Coleta com seringaColeta com seringa a)a) Material de Coleta de SangueMaterial de Coleta de Sangue 22-- Coleta de SangueColeta de Sangue 6 Sem anticoagulante Com anticoagulante ��Coletas à vácuoColetas à vácuo: 7 b)b) Tubos para coleta de sangueTubos para coleta de sangue Cor da tampa Anticoagulante Finalidade Utilidade (exemplos) 8 VermelhaVermelha ausente soro Ca, P, urea, Colest. RoxaRoxa EDTA quelante Cálcio Hemato, HbA1 CinzaCinza Oxalato/Fluoreto previne glicólise glicemia, lactato VerdeVerde heparina inibe trombina gasometria AzulAzul citrato quelante cálcio Provas Coagulação c) Coletas à vácuo: c) Coletas à vácuo: d) Coleta de Sangue Arteriald) Coleta de Sangue Arterial 9 d) Coleta de Sangue Arteriald) Coleta de Sangue Arterial e)e) Descarte de agulhasDescarte de agulhas 10 TRANSPORTE DE SANGUETRANSPORTE DE SANGUE 3) Erros de coleta3) Erros de coleta • Técnica de coleta de sangue • Estase prolongada durante a punção venosa • Amostra insuficiente • Erros de cronometragens • Recipientes incorretos para a amostra • Local de coleta inadequado • Armazenamento incorreto da amostra 44-- Transporte de sangueTransporte de sangue 11 �Evitar agitação das amostras (hemólise) �Proteger contra luz: bilirrubina, caroteno, vitamina C. �Manter os tubos fechados. �Utilizar conservantes químicos quando necessário: glicose (fluoreto), urina (ac. acético, ac. bórico). �Verificar a temperatura ideal para armazenamento do material coletado durante o transporte, se precisa ser refrigerado ou congelado. �Tempo (?). Separação soro ou plasma: 2 horas.Separação soro ou plasma: 2 horas.Separação soro ou plasma: 2 horas.Separação soro ou plasma: 2 horas.Separação soro ou plasma: 2 horas.Separação soro ou plasma: 2 horas.Separação soro ou plasma: 2 horas.Separação soro ou plasma: 2 horas. SANGUE CENTRIFUGAÇÃOCENTRIFUGAÇÃO 10min 1500 10min 1500 rpmrpm � Soro Sangue total � Plasma (antic.) (antic.) 55-- Separação de material biológicoSeparação de material biológico 12 � o sangue integral é pouco utilizado para teste de química clínica. � normalmente são utilizados plasma e soro. � oo sorosoro é obtido a partir do sangue total coagulado (15 a 30 minutos). � já oo plasmaplasma é obtido a partir do sangue total contendo anticoagulante. � quando necessitamos de sangue total ou de plasma, usamos anticoagulantes (EDTA,(EDTA, oxalatos,oxalatos, citratocitrato,, fluoretofluoreto ee heparinaheparina)).. 66-- Soro e PlasmaSoro e Plasma Relatório do laboratórioRelatório do laboratório Pode haver um esforço considerável, e caro, para produzir algo que pode parecer apenas alguns números num pedaço de papel. É crucial compreender o que significam esses números para que se faça um diagnostico correto, ou se o tratamento do paciente deve ser alterado. VARIAÇÕES NOS RESULTADOSVARIAÇÕES NOS RESULTADOS As medidas bioquímicas variam devido a duas razões: 13 As medidas bioquímicas variam devido a duas razões: ��Variação BiológicaVariação Biológica �� Variação AnalíticaVariação Analítica II-- Variação Biológica:Variação Biológica: FATORES BIOLÓGICOSFATORES BIOLÓGICOS que afetam a Interpretação dos Resultados. A discriminação entre resultados normais e anormais é afetada por vários fatores fisiológicos que devem ser levados em consideração ao se interpretar qualquer resultado. Eles incluem: 1) Sexo do Paciente: valores de referencia para alguns analisados, tais como Creatinina no soro, são diferentes para homem e mulher. 2) Idade do Paciente: pode haver faixas de referencia diferentes para neonatos, crianças, adultos e idosos. 3) Efeito de Dieta: A amostra pode não ser apropriada se for colhida quando o paciente estiver em jejum, ou após uma refeição. 4) Tempo em que foi colhida a amostra: Pode haver variações durante o dia e a noite. 5) Estresse e Ansiedade: estes podem afetar o analisado de interesse. 6) Postura do paciente: a redistribuição de liquido pode afetar o resultado. 14 6) Postura do paciente: a redistribuição de liquido pode afetar o resultado. 7) Efeito de exercícios: o exercício vigoroso pode liberar enzimas dos tecidos. 8) História Médica: a infecção e/ ou lesão de tecido pode afetar os valores bioquímicos, independentemente. 9) Gravidez: esta altera algumas faixas de referencia. 10) Ciclo Menstrual: As medidas de hormônios variam ao longo do ciclo menstrual. 11) Histórico de Medicação: os medicamentos ou drogas podem ter efeitos específicos nas concentrações plasmáticas de alguns analisados. 1) ETAPA PRÉ1) ETAPA PRÉ--ANALÍTICAANALÍTICA Identificação errada do paciente, colheita de amostra em hora errada e descuidos no manuseio da amostra. II- Variação Analítica �� ETAPA PRÉETAPA PRÉ--ANALÍTICA ANALÍTICA �� ETAPA ANALÍTICAETAPA ANALÍTICA �� ETAPA PÓSETAPA PÓS--ANALÍTICAANALÍTICA 15 Orientaçãoincorreta do paciente Paciente trocado Troca de amostra Anticoagulante errado Amostra hemolisada ou turva Demora na separação Armazenamento incorreto Outros errada e descuidos no manuseio da amostra. Demora na realização do teste Materiais de má qualidade Vidraria e ponteiras sujas Pipetagem incorreta Troca de amostra Preparo e armazenamento incorreto dos reagentes Incubação incorreta Manutenção incorreta do aparelho fotométrico Uso errado do aparelho fotométrico 2) ETAPA ANALÍTICA2) ETAPA ANALÍTICA 16 Uso errado do aparelho fotométrico Outros ERROS ANALÍTICOSERROS ANALÍTICOS 1- Erro SistemáticoErro Sistemático: variação que pode influenciar resultados por serem consistentemente mais altos ou baixos que o valor real. Exemplo: reagentes deteriorados, erros mecânicos no instrumento, ou a peculiaridade na metodologia do trabalhador, assim como uma maneira de pipetagem. 2- Erro ao caso ou aleatóriosErro ao caso ou aleatórios: a fonte não pode ser identificada. Exemplo: bolhas de ar nas mangueiras de reagente ou amostra, diferença de operação entre um trabalhador e outro, certas características da amostra. Cálculos incorretos 3) ETAPA PÓS3) ETAPA PÓS--ANALÍTICAANALÍTICA um resultado pode ser exato, mas pode ser transmitido ao registro de outro paciente por entrar com uma identificação numérica do paciente errada no computador. 17 Resultados fora da linearidade do método Fator ou curva de calibração incorretos Valores dos controles fora do limite estabelecido Resultados ilegíveis Transcrição errada CASO CLINICO 1: Você, que faz parte da equipe de auditores de uma empresa de acreditação de laboratório, foi chamado para verificar possíveis erros em um laboratório X. Sua função era verificar o setor de coleta, dessa forma, você acompanhou durante 3 dias esse setor. Uma das coletas foi realizada da seguinte forma: Paciente foi chamado à sala de coleta, seus dados foram confirmados pelo flebotomista, que em silêncio começou a preparar o material de coleta. Verificou que precisava realizar coleta para exames bioquímicos e precisava coletar amostra biológica para determinação de colesterol total e frações, uréia, creatinina, sódio e potássio (lembre- se que todos são determinados no soro) e glicemia de jejum. Sendo assim, pegou um tubo de tampa roxa e um de tampa vermelha. Colocou luva em uma das mãos (a que manipulava o canhão de coleta), colocou o garrote no braço do paciente, verificou a 18 manipulava o canhão de coleta), colocou o garrote no braço do paciente, verificou a possibilidade de veias e fez a punção. Primeiro colocou o tubo de tampa roxa, retirou e colocou imediatamente na estante, pegou o tubo de tampa vermelha, retirou e após 3 minutos de coleta retirou o garrote, retirou a agulha e dobrou o braço do paciente com o algodão no local da punção. Após a coleta, fez um bolinho de algodão com a mão que estava sem luva, colocou no braço do paciente e colocou um esparadrapo. Após a coleta foi imediatamente para o setor de triagem do lab e colocou os tubos para centrifugação, a 5000rpm por 3 minutos. Após essa coleta você montou um relatório demonstrando os possíveis problemas. Nesse relatório você apresentou os erros e deu sugestões para correção dos mesmos. Traduzindo.......faça esse relatório na folha de respostas !!! CASO CLINOCO 2: Foi retirada uma amostra de sangue de uma mulher de 65 anos p/ verificar sua concentração de potássio no soro, já que durante alguns tempo ela tomou dureticos a base de tiazida. O clinico geral deixou a amostra no seu carro e na manha seguinte a deixou no laboratório a caminho de seu consultório. Imediatamente após a análise da amostra, o bioquímico telefonou p/ o medico. 19 telefonou p/ o medico. a) Por que? b) Quais são as alterações bioquímicos ocorridas?
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