O USO DE SALIVA PARA DIAGNÓSTICO DE DOENÇAS ORAIS E SISTÊMICAS

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Revista Odontológica de Araçatuba, v.35, n.1, p. 55-59, Janeiro/Junho, 2014 55
O USO DE SALIVA PARA DIAGNÓSTICO DE DOENÇAS
ORAIS E SISTÊMICAS
USE OF SALIVA FOR DIAGNOSIS OF ORAL AND SYSTEMIC DISEASES
Daniela Pereira LIMA1
Adriana Sales Cunha CORREIA2
Aline Lima DOS ANJOS3
Nagib Pezati BOER4
RESUMO
O valor desses métodos de secreção para o diagnóstico de doenças sistêmicas e orais
tem sido objetivo de estudo de vários pesquisadores com o inteiro de aumentar seu uso
em exames complementares. O levantamento bibliográfico foi realizado por meio de busca
nas seguintes bases de dados eletrônicos: Cochrane Methodology Register, Cochrane
Library, Medline, LILACS, Google Scholar, Scientific Electronic Library Online (SCIELO),
Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências da Saúde (LILACS) e Bireme,
acessadas através da Biblioteca Virtual da Saúde. Para tanto foram utilizados os seguintes
descritores: Diagnóstico; Saliva; Técnicas e procedimentos de laboratório. Concluiu-se
que, a saliva é um fluido corporal com importante participação em situações fisiológicas e
patológicas do organismo humano. A vantagem de sua utilização em diagnósticos
laboratoriais reside no fato da sua disponibilidade, coleta fácil, não invasiva, armazenamento
simplificado e de baixo custo.
UNITERMOS: Saliva; Diagnóstico; Doenças da boca.
INTRODUÇÃO
A saliva é uma secreção aquosa encontrada na
boca, representada por uma complexa mistura de
produtos secretórios (orgânicos e inorgânicos) de
glândulas salivares e de outras substâncias
provenientes da mucosa da orofaringe, vias aéreas
superiores, refluxo gastrintestinal, fluido do sulco
gengival, restos alimentares e componentes derivados
do sangue.1
Existe uma série de funções atribuídas à saliva.
No trato digestório tem importante papel na fisiologia
esofagiana, na digestão e na proteção das células
gástricas. Na boca participa efetivamente na
mastigação, fala, deglutição, sensibilidade gustativa,
lubrificação dos tecidos, proteção das mucosas contra
a invasão de diversas substâncias, atividade
antibacteriana, antifúngica, antivirótica, maturação
pós-eruptiva regulação do balanço iônico na
remineralização do esmalte, e dentina quando exposta
e limitação da difusão de ácidos.2
Sabe-se, que a saliva humana possui um amplo
grupo de constituintes protéicos e não protéicos com
o propósito de manter a saúde da cavidade oral. Esse
1 Professora Doutora da Disciplina de Clínica Odontológica Integrada da Faculdade de Odontologia da Universidade Camilo Castelo
Branco (UNICASTELO), Fernandópolis, SP, Brasil.
2 Professora Doutora da Disciplina de Clínica Odontológica Infantil da Faculdade de Odontologia da Universidade Camilo Castelo
Branco (UNICASTELO), Fernandópolis, SP, Brasil.
3 Graduanda de Odontologia da Universidade Camilo Castelo Branco (UNICASTELO), Fernandópolis, SP, Brasil.
4 Professor Doutor da Disciplina de Clínica Odontológica Integrada da Faculdade de Odontologia da Universidade Camilo Castelo
Branco (UNICASTELO), Fernandópolis, SP, Brasil.
arsenal de componentes possui um imenso potencial
informativo para a detecção de doenças sistêmicas.
Entretanto, esse potencial só poderá ser traduzido
em metodologias efetivas a partir do estabelecimento
de um padrão referencial dos compostos salivares. 3
A partir desse padrão referencial, a interpretação
qualitativa e quantitativa dos componentes da saliva
poderam não só determinar o diagnóstico, mas
também avaliar o melhor tratamento para desordens
sistêmicas.
A idéia da utilização da saliva como matriz de
análise para métodos de diagnóstico existe há muito
tempo, desde 1975, quando Dawes sugeriu que a
criação da nova metodologia poderia ser pertinente e
viável devido à facilidade da coleta desses fluidos e a
quantidade de informações determinantes em seus
constituintes. 4
O fato de a saliva possuir um método simples e
não invasivo de coleta, um armazenamento fácil e de
baixo custo quando comparada à coleta de sangue,
tem despertado especial interesse nos pesquisadores
com o intuito de acrescentar uma possibilidade de
exame complementar. 5 Aliado a adição de técnicas
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modernas e aparelhos de instrumentação química
observa-se, atualmente, a ascensão do seu uso para
investigações laboratoriais com aplicabilidade em
finalidades básicas e clínicas nas áreas médica e
odontológicas. 6
A habilidade de usar a saliva para monitorar o
estado da saúde e da doença de um indivíduo é um
objetivo altamente desejável para a promoção da saúde
e a pesquisa de cuidados em saúde. Os recentes
avanços científicos e tecnológicos estão produzindo
melhoras continuadas em aspectos como a
determinação dos componentes salivares, a obtenção
de amostras comparat ivas e o aumento da
especificidade e da sensibilidade dos procedimentos
utilizados. Estes progressos apontam para uma nova
era, em que o diagnóstico molecular na cavidade bucal
terá grande importância. 7
Nesse sentido, o presente trabalho tem por
objetivo discorrer sobre estudos na literatura científica,
como recurso auxiliar como ferramenta de diagnóstico
na saliva.
MATERIAL E MÉTODO
Trata-se de um estudo exploratório conduzido
por diretrizes metodológicas de pesquisa de base de
dados bibliográficos sobre estudos na literatura
científica envolvendo a saliva como diagnóstico de
doenças bucais e sistêmicas.
O levantamento bibliográfico foi realizado por
meio de busca nas seguintes bases de dados
eletrônicos: Cochrane Methodology Register,
Cochrane Library, Medline, LILACS, Google Scholar,
Scientific Electronic Library Online (SCIELO),
Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências
da Saúde (LILACS) e Bireme, acessadas através da
Biblioteca Virtual da Saúde. Para tanto foram
utilizados os seguintes descritores: Diagnóstico;
Saliva; Técnicas e procedimentos de laboratório.
Foram incluídos na pesquisa artigos redigidos
em português, espanhol ou inglês com acesso na
íntegra via eletrônica. Os artigos publicados em
revistas não indexadas e artigos com enfoque
comercial ou de divulgação não foram consultados.
Artigos não relevantes à pesquisa foram excluídos
por meio da análise do resumo dos mesmos.
REVISÃO DA LITERATURA
Doenças Infecciosas
Muitos testes de diagnóstico em virologia são
baseados nos anticorpos produzidos devido à resposta
imunológica a infecções. Estas moléculas estão
presentes na saliva oriundas das glândulas salivares
e do soro sanguíneo. Há a predominância de
imunoglobulina A (IgA) secretora, derivada dos
plasmócitos das glândulas salivares, que representa
o principal mecanismo de resposta imune específica
da saliva.8 Por outro lado, as imunoglobulinas M (IgM)
e G (IgG) são derivadas do soro através do fluido
crevicular gengival. Os anticorpos que agem contra
microrganismos e seus componentes podem ser
detectados na saliva e assim representam um
importante meio para diagnóstico de infecções virais
agudas e infecções virais congênitas. 9
A cárie dentária é uma doença infecciosa
multifatorial caracterizada pela destruição localizada
dos tecidos dentais devido à ação das bactérias, a
qual atinge um grande número de indivíduos no mundo.
Nas referências, um grande interesse tem sido
colocado na uti l ização da saliva em testes
bacteriológicos visando à indicação do risco de cárie.
10
Estes testes se baseiam na identificação e
quantif icação de espécies bacteriológicas de
Lactobacilos (LB) e Streptococcus mutans, uma vez
que estes desempenham um papel significativo no
desenvolvimento dessa doença. Identificando os
indivíduos mais susceptíveis através de testes
salivares, seria possível fortalecer as medidas
preventivas a fim de evitar que essa enfermidade se
instale. 11
Outra doença infecciosa da cavidade oral que
pode ser diagnosticada por esta via é a candidose
através da presença de Candida spp nasaliva. 12
Observa-se também uma associação estreita
entre Actinobacillus actinomycetemcomitans e a
periodontite juvenil e o Streptococcus mutans, o
agente etiológico primário da cárie dentária. Estudos
indicam associação evidente entre a doença
periodontal e o desenvolvimento de diversas doenças
sistêmicas, entre estas, podemos citar doenças
cardiovasculares, artrite, pneumonia e diabetes.13
A saliva foi estudada também como forma de
detectar imunoglobulina M (IgM) contra rubéola e
observou-se uma especificidade de 96%, quando
comparado ao padrão considerado ideal do teste,
observando no soro sanguíneo. Esses resultados
indicam que a utilização da saliva pode ser uma
alternativa válida para a obtenção de espécimes
clínicas na investigação de casos recentes de rubéola,
com ênfase nas atividades de vigilância epidemiológica
e controle da virose. 14
O uso da saliva como meio de diagnóstico da
infecção por Helicobacter pylori parece ser uma
possibilidade atrativa para estudos epidemiológicos
da infecção em crianças quando se considera a
natureza não invasiva do exame. É rotina se utilizar
testes para identificação de Helicobacter pylori a partir
de amostras de biópsias gástricas se utilizando a
hidrólise da urease, métodos de coloração e cultura.
É sabido que os métodos invasivos demandam altos
custos e que os métodos não invasivos tais como os
exames sorológicos do sangue e o teste da respiração
da uréia estão se tornando mais popular. O método
PCR provou ser altamente sensível e específico e é
considerado como o método da escolha para detectar
o DNA do Helicobacter pylori na boca.15
Estudos que utilizam a saliva para o diagnóstico
da AIDS utilizando anticorpos específicos como
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marcadores biológicos, 16,17 têm demonstrado sucesso
e reprodutibilidade. Esse mecanismo possibilitou a
realização do primeiro teste rápido para a detecção
da infecção HIV-1, sendo utilizado até hoje em
pesquisas, mostrando elevada sensibilidade e
especificidade, 99,4% e 99,4%, respectivamente. 16
Em Cuba ano de 2007 comparou-se o diagnóstico de
HIV-I, utilizando a saliva, em 125 pacientes soros
positivos, com o exame sorológico. A sensibilidade e
especificidade foram de 100% apontando essa
ferramenta como alternativa na confirmação de
anticorpos contra o HIV-I.17
A utilização da saliva para a detecção de HIV
por via oral já é uma realidade no Brasil. O exame é
capaz de detectar o HIV tipos 1 e 2 com 99% de
precisão. Este pode ser realizado em centros de
saúde, hospitais, clínicas e laboratórios. A rápida
detecção também ajuda na prevenção da doença já
que a maioria das pessoas que fica sabendo que estão
infectadas pelo HIV toma cuidados para evitar a
transmissão e obtém cuidados de saúde que podem
prolongar a qualidade de sua vida. 18
Doenças Neoplásicas Malignas
O DNA humano tem-se revelado ser útil como
marcador biológico e sua utilização tem sido estudada
para a detecção de alguns tipos de neoplasias. A
maioria dos espécimes utilizados para a investigação
desse tipo de enfermidade é identificada através de
biópsias invasivas e geralmente quando é possível a
análise, o tumor já está instalado ou mesmo em
processo metastásico. Isto sugere uma necessidade
imperativa em desenvolver ferramentas novas de
diagnóstico que possibilitem a descoberta precoce.
A identificação de marcadores moleculares em flúidos
corporais, que predizem o desenvolvimento de câncer
em sua fase mais primária ou pré-cancerígena,
constituiria tal ferramenta. 19
Estudo de Streckfus et al.20 (2000) demonstrou
que o fragmento solúvel do oncogene c-erbB-2, um
marcador prognóstico do câncer de mama, bem como
antígeno 15-3 para câncer (CA15-3), foram
significativamente maiores na saliva e no soro de
mulheres com diagnóstico de câncer do que o
observado em um grupo controle de mulheres
saudáveis e indivíduos com tumores benignos.21
O vírus Epstein-Barr (EBV) está relacionado com
a ocorrência de mononucleose infecciosa e
leucoplasia pilosa oral, como referência, associado
com vários tipos de neoplasias malignas linfóides e
epiteliais. A saliva é considerada um veículo para
transmissão desse vírus no indivíduo. Mbulaiteye et
al (2006) 22 realizaram um estudo na África e verificaram
que os níveis de DNA do EBV na saliva e em sangue
periférico de 600 crianças e suas mães e observaram
equivalência de resultados, o que foi útil considerado
um importante fator de controle da infecção por EBV
uma vez que o linfoma de Burkitt é uma entidade
mórbida endêmica na África.23
Análise Hormonal
O conhecimento de que há hormônios
esferoidais na saliva, e que podem ser medidos, está
sendo usado há mais de 30 anos. Mas só
recentemente a tecnologia alcançou essa informação,
tornando possível a determinação exata dos níveis
dos hormônios da saliva. 24 A maioria dos hormônios
do sangue (aproximadamente 95%) é limitada as
proteínas específicas que os carregam pela corrente
sanguínea. Os outros 5 % representam hormônio livres
disponíveis para mover-se facilmente para seus órgãos
alvo e para cumprir suas funções. A saliva contém
estes hormônios livres que podem facilmente serem
medido, fornecendo dar um retrato exato daqueles
que estão prontamente disponíveis no tecido humano.
Assim, a detecção de alguns deles é importante, pois
sua variação na saliva pode ser indicativa de
progressão cancerígena ou suspeita de, por exemplo,
a Síndrome de Cushing, enfermidade que resulta da
hipersecreção continua de cortisol endógeno, gerando
clinicamente, fraqueza da musculatura proximal,
osteoporose, equimoses espontâneas e
hipocalcemia. 24
Estrógenos também podem ser verificados na
saliva e a predição do parto prematuro realizado pela
medida salivar do estradiol é um teste aprovado pela
FDA (Food and Drug Administration). O aumento desse
hormônio também é indicativo de que a mulher
encontra-se em período fértil e, realizando um auto-
teste com um dispositivo comercialmente distribuído,
a mulher tem a capacidade de monitorar o seu ciclo
de fertilidade. 25
Análise Forense
O DNA Forense é usado hoje na esfera criminal,
para investigação criminal, e na esfera civil, para
investigação de paternidade. Este DNA é aplicado na
identificação de suspeito em caso de crimes sexuais
(estupros, atentado violento ao pudor, ato libidinoso
diverso de conjugação carnal); identificação de
cadáveres carbonizados, em decomposição ou
mutilados, relação entre instrumento lesivo e vitima,
identificação de cadáveres abandonados, aborto
provocado, investigação de paternidade em caso de
gravidez resultado de estupro, estudo de veículo
genético, raptos, sequestros e tráfegos de menores,
e anulação de registro cívelde e nascimento. 26
Qualquer tipo de tecido ou fluido biológico pode
ser utilizado como fonte de DNA, uma vez que são
formados por células. Nas células o DNA de interesse
forense encontra – se tanto no núcleo como nas
mitocôndrias. Os tipos de amostras mais comuns
são sangue, sêmen, cabelo, pele, unha, cabelo, saliva,
urina, osso, líquidos amnióticos, v iscosidade
coriônica, fígado, músculo, suor, fezes. 27
A capacidade de detectar o DNA humano na
saliva também tem sido útil na área forense. A saliva
pode ser encontrada em várias situações dentro da
cena de um crime como as marcas de mordidas
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deixadas em objetos ou em vítimas de crimes
violentos, cigarros, selos postais, envelopes e outros
objetos.28
Foi demonstrado que a saliva pode ser
potencialmente recuperada nessas ocorrências.
Estudo realizado por Anzai-Kanto e colaboradores 29,
obteve a saliva de voluntários depositada na pele,
recuperada para extração e tipagem do DNA por PCR,
para a posterior avaliação de sua utilização e sua
contribuição na odontologia legal. Os resultados
indicaramque procedimentos padronizados utilizados
para coleta e extração de DNA salivar podem ser
utilizados como um método para recuperar DNA em
casos forenses, desde que haja quantidades
adequadas. Este estudo sugere que a análise de saliva
depositada sobre a pele pode ser incorporada ao
conjunto de provas de um inquérito criminal já que
possui um grande poder discriminatório. 29
Doenças Autoimune
A síndrome de Sjögren é uma doença auto-imune
crônica, caracterizada por disfunções nas glândulas
salivares e lacrimais, ceratoconjuntiv ite seca,
xerostomia, além de anormalidades sorológicas.
Alguns procedimentos para o diagnóstico dessa
síndrome incluem: sialografia, cintilografia salivar,
biópsias e testes sorológicos. Embora sejam úteis,
esses exames são invasivos, caros e nem sempre
conclusivos.30
Um procedimento útil no diagnóstico é a biópsia
de glândula salivar menor e o resultado histopatológico
revela -se infiltrado linfocitário no parênquima da
glândula. A avaliação sialométrica, utilizando-se de
métodos com ou sem estimulação à secreção salivar,
é um importante meio auxiliar no diagnóstico dessa
doença e se observa uma redução na quantidade de
saliva produzida e essa informação, apesar de não
ser patognomônica, representa importância clínica
uma vez que é útil na avaliação da progressão da
cárie, na criação de ambiente favorável para o
desenvolvimento de infecções fúngicas, no surgimento
de dor na mucosa bucal, e disfagia. 30
 Pesquisadores têm mensurado concentrações
especificas de citocinas (grupo de moléculas
envolvidas na emissão de sinais entre as células
durante o desencadeamento das respostas imunes)
na saliva de pacientes com síndrome de Sjögren para
a sua eventual utilidade em diagnóstico. A interleucina
(grupo de citocina) 2 e a 6 apresentam-se,
significativamente, elevados nos indivíduos que sofrem
dessa doença. Assim, alterações nos perfis salivares
dessas citocinas podem ser úteis no diagnóstico da
Síndrome de Sjögren, como no monitoramento de sua
progressão. 31
CONCLUSÃO
A saliva é um fluido corporal com elevada com
importante participação em situações fisiológicas e
patológicas do organismo humano. A vantagem da
utilização da saliva em diagnósticos laboratoriais
reside no fato da sua disponibilidade, coleta fácil, não
invasiva, armazenamento simplificado e de baixo
custo. O inconveniente no seu uso está no fato de
que as concentrações dos seus marcadores
biológicos se encontram em níveis mais baixos em
relação ao plasma e ainda não há valores de
referência.
ABSTRACT
The value of these methods secretion for the diagnosis
of oral and systemic diseases has been the goal of
many researchers to study the whole to increase their
use of complementary tests. The bibliographic search
was conducted by searching the following electronic
databases : the Cochrane Methodology Register, the
Cochrane Library , Medline ,LILACS ,Google Scholar
, Scientif ic Electronic Library Online (SciELO),
Literature Latin American and Caribbean Center on
Health Sciences (LILACS) and Bireme, accessed
through the Virtual Library of Health for both the
following keywords were used : Diagnostics, Saliva,
Laboratory techniques and procedures . It was
concluded that saliva is a body fluid with important
participation in physiological and pathological
conditions of the human body. The advantage of their
use in laboratory diagnosis lies in the fact of its
availability, easy collection, noninvasive, simplified
storage and low cost.
UNITERMS: Saliva; Diagnosis; Mouth diseases.
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