2015 Conjugacao Bacteriana

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Conjugação bacteriana
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Mecanismo de conjugação
Célula doadora (F+) produz o pêlo sexual (pili sexual)
Pili liga-se à célula receptora (F-) e aproxima as duas células
O plasmídeo conjugativo é clivado e uma das fitas é transferida para a célula receptora (F-) 
As duas células recircularizam os plasmídeos, sintetizam a fita complementar e tornam-se doadoras (F+) 
Doadora F+
Doadora F+
Receptora F-
Nova doadora F+
Doadora F+
1
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 E. coli MM 293 (F+ KmR)
KmR
Cromossomo 
bacteriano
Plasmideo F
Célula F+
 NalR
E. coli k12 711 (F- NalR)
1,5 mL
0,5 mL
1 h e 20 min / 37º C
0,1 mL
0,2 mL
24 h/ 37º C
Contagem das bactérias trans-conjugantes
Meio Luria Bertoni (LB) + Canamicina + Ácido nalidíxico
Esquema para o experimento de conjugação bacteriana
Célula F-
Cromossomo 
bacteriano
2
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Controles do experimento de conjugação bacteriana
E. coli MM 293 (F+ KmR)
KmR
Cromossomo 
bacteriano
Plasmideo F
Célula F+
 NalR
E. coli k12 711 (F- NalR)
Célula F-
Cromossomo 
bacteriano
Meio LB + Canamicina
 Meio LB + Ácido nalidíxico
Meio LB +
Canamicina + 
Ácido nalidíxico
MM 293 K12 711
MM 293 K12 711
MM 293 K12 711
Estriar as duas bactérias nos seguintes meios 
Incubar por 24 horas a 37o C e observar o crescimento
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