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Nutrição e Cultivo de Microrganismos Universidade Federal do Piauí - UFPI Campus Ministro Reis Veloso Disciplina: Bacteriologia Microrganismos Prof. Anna Carolina Toledo da Cunha Pereira Crescimento microbiano : exponencial Nutrientes – ferramentas químicas necessárias à síntese. Macronutrientes: requeridos em grandes quantidades Micronutrientes: requeridos em pequenas quantidades Carbono: Parte essencial dos nutrientes orgânicos: carboidratos, lipídeos e proteínas - HETEROTRÓFICOS: utilizam compostos orgânicos como fonte principal de carbono. - AUTOTRÓFICOS: utilizam dióxido de carbono como fonte de carbono. Nitrogênio: Parte dos aminoácidos = proteinas -Fixação do nitrogênio: uso do nitrogênio gasoso -Compostos nitrogenados inorgânicos: nitratos, nitritos ou sais de amonia -Compostos orgânicos nitrogenados: aminoácidos ou peptídeos Hidrogênio, Oxigênio, Enxofre e Fósforo -Hidrogênio e oxigênio: compostos orgânicos -Enxofre: biossíntese de cisteína, cistina e metionina -Fósforo: adenosina trifosfato (ATP) Oligoelementos ou elementos traços Sódio, Ferro, Zinco, Cobre, Manganês, Molibdênio e Cobalto Classificação nutricional dos microrganismos Quimiotróficos Fototróficos Meios utilizados para o Cultivo de Microrganismos Objetivos: Cultivar os microrganismos Estudar a morfologia e as necessidades nutricionais de forma a identificar o microrganismo. Meios de cultura quimicamente definidos Conhecimento exato da composição. Ao adicionar ou retirar um componente ao meio, pode-se saber seAo adicionar ou retirar um componente ao meio, pode-se saber se aquele constituinte é essencial para o crescimento do microrganismo. Meios de cultura complexos - Preparados a partir de produtos naturais - Quimicamente indefinidos - Uso em rotina - Extrato de carne, peptonas, extrato de levedura, sangue, leite, soro, ágar Meios de cultura complexos Indicadores químicos Produção de endosporos ou cápsulas Reação metabólicas Indicador de pH Produção de cápsula por Bacillus anthracis Inóculo: água esteril Inóculo: Escherichia coliInóculo: Escherichia coli Meios Especiais: Usados para isolar, identificar ou contar os microrganismos. Meios para Anaeróbios: Utilizado para o cultivo de organismos que toleram baixas concentrações de oxigênio ou nenhum oxigênio livre. Meios seletivos: permitem o crescimento de um tipo particular de microrganismo ou inibem o crescimento de outros. Ex: Ágar sabouraud – seletivo para fungos pois possui pH baixo (5,6) e alta concentração de glicose Meios diferenciais: permitem diferenciar os vários tipos de microrganismos em uma placa. Streptococcus pyogenes ??? pyogenes Hemolise + Hemolise - Meios Seletivos/Diferenciais: Além de inibir ou favorecer o crescimento de determinados microrganismos, estes meios também podem diferenciá-los. Ex: Ágar MacConkey – Contém sais eEx: Ágar MacConkey – Contém sais e cristal violeta para inibir o crescimento de gram positivas e favorecer o crescimento de gram negativas. Além disso, possui lactose, o que permite diferenciar as bacterias que utilizam este açúcar. Meios de enriquecimento: Isolar e favorecer o crescimento de uma bactéria específica presente em baixa concetração na amostra. Este meio possui como única fonte de carbono o fenol. Então, Este meio possui como única fonte de carbono o fenol. Então, somente crescerão as bactérias capazes de degradar compostos fenólicos Condições Físicas para o Crescimento de Microrganismos Temperatura: pH: Os microrganismos requerem um pH ótimo para que seu crescimento ocorra. A medida que o microrganismos cresce ele libera compostos ácidos e básicos no meio extracelular pH para o crescimento de bactérias pH para o crescimento de fungos Aeróbios obrigatórios Anaeróbios Facultativos Anaeróbios obrigatórios Anaeróbios aerotolerantes Microaerófilos Atmosfera Gasosa: Qual é a causa desta diversidade? Sensibilidade dos microrganismos às formas tóxicas do O2 O2 + e- = O2- (radical superóxido) 202- + 2H+ = H2O2 (peróxido de hidrogênio) 02- + H2O2 = O2 +OH-2 +OH (íons hidroxila) 2H 0 = 2H 0 + O2 Superóxido dismutase Catalase A er ób io s A na er ób io s F ac ul ta ti vo s e M ic ro ae ró fi lo s Catalase + Catalase - 2H202 = 2H20 + O2 H202 + 2H+ = 2H20 Peroxidase Catalase Fa cu lt at iv os e M ic ro ae r Câmara de Anaerobiose Jarra de Anaerobiose Crescimento de uma Cultura Bacteriana Tempo de Geração: intervalo de tempo requerido para que cada microrganismo se divida. Fase Fase estacionária Fase d e b a ct é ri a s v ia v e is Fase lag Fase log Fase de declínio Lo g d o n ° d e b a ct é ri a s v ia v e is Tempo (h)
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