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Bacteriologia II ROTEIRO DA AULA • Metabolismo bacteriano • Nutrição bacteriana • Crescimento bacteriano • Reprodução bactéria • Fases do crescimento bacteriano • Fatores necessários para o crescimento bacteriano • Transposons METABOLISMO BACTERIANO • Metabolismo é o termo utilizado para nos referirmos ao conjunto de todas as reações químicas dentro de um organismo vivo. • As reações químicas, tanto liberam quanto requerem energia. O metabolismo pode ser dividido em duas classes de reações químicas: • Aquelas que liberam energia === Reações catabólicas (Catabolismo) • E aquelas que requerem energia == Reações anabólicas (Anabolismo) METABOLISMO BACTERIANO • Reações catabólicas ou degradativas: • Realizam a quebra de compostos orgânicos complexos em compostos mais simples • Exemplo: Quando as células quebram açúcares em dióxido de carbono e água. • Reações anabólicas ou biossintéticas: • Realizam a construção de moléculas orgânicas complexas a partir de moléculas mais simples. • Exemplo: formações de proteínas a partir de aminoácidos, de ácidos nucleicos a partir de nucleotídeos, e de polissacarídeos a partir de monossacarídeos (açúcares simples). • Esses processos biossintéticos geram os materiais para o crescimento celular. METABOLISMO BACTERIANO O ATP armazena a energia derivada de reações catabólicas e a libera posteriormente para dirigir as reações anabólicas ou realizar outros trabalhos celulares. NUTRIÇÃO BACTERIANA • As bactérias são muito diversas, e também são muito diversas as estratégias nutricionais, mas mesmo tendo estratégias tão diversas o reino monera em relação a nutrição, pode ser dividido em dois grandes grupos: • Bactérias autotróficas – são bactérias que produzem seu próprio alimento (matéria orgânica). • Fotossíntese • Quimiossíntese • Bactérias heterotróficas – bactérias que não produzem seu próprio alimento, se alimentam de matéria orgânica composta por outros seres vivos. • Saprofágicas – decompositoras de matéria orgânica morta (reciclagem) • Parasitas – causadoras de doenças (obtém alimento a partir de tecidos corporais de seres vivos). NUTRIÇÃO BACTERIANA • As bactérias autotróficas podem realizar dois processos diferentes: • Fotossíntese – fonte de energia – Luz solar (possuem pigmento semelhantes das algas e plantas (clorofila) • Proclorófitas – clorofila tipo a e tipo b. Acreditam que sejam as maiores responsáveis pela produção de oxigênio dos oceanos. • Cianobactérias/algas azuis – (Gênero: Anabaena sp.) - clorofila A e ficobilinas (pigmento que auxilia na fotossíntese). São importantes por colonizarem áreas inóspitas, como rochas, solo, entre outros ambientes. • Sulfobactérias – possui uma clorofila especial (bacterioclorofila). Essas bactérias não retiram o hidrogênio da água, e sim de compostos que contem enxofre. Sendo assim, o produto das reações é o enxofre e não o oxigênio. • CO2 – Gás carbônico • H2S – Gás sulfídrico • S – Enxofre • CH2O – Composto orgânico • H2O – Água • C6H12O6 – Glicose • O2 – Oxigênio Fo to au to tr ó fi ca s NUTRIÇÃO BACTERIANA • Quimiossíntese – obtém energia de reações inorgânicas de oxirredução. • Utilizam gás carbônico e compostos que contem átomos de hidrogênio para produção de compostos orgânicos e para isso é necessário de energia. • Exemplos: • Nitrossomonas – fixadoras de nitrogênio ( reações de fixação geram energia) • Nitrobacter – fixadora de nitrogênio • 2NH3 – Amônia • 2N0-2 – Nitrito • 2NO-3 - Nitrato Q u im io au to tr ó fi ca s NUTRIÇÃO BACTERIANA • Heterotróficas • Essas bactérias obtém a energia contida nesses alimentos por meio de dois processos principais: • Respiração celular • Aeróbicas – quebram moléculas orgânicas (glicose) na presença do oxigênio. O oxigênio é o aceptor final de hidrogênio (liberado da glicose) e assim ocorre a formação da água. • Anaeróbicas – bactérias que não utilizam oxigênio O aceptor final de hidrogênio não é o oxigênio. São outras substâncias do tipo inorgânicas. Ex. nitritos e sulfatos. Exemplos de bactérias anaeróbicas: Gênero: Pseudomonas e Bacillus Desnitrificação NO-3: Nitrato NO-2: Nitrito N2O: Oxido nitroso N2: Gás nitrogênio NUTRIÇÃO BACTERIANA • Fermentação • Na fermentação as bactérias quebram moléculas orgânicas e ocorrerá a liberação de energia. • A quantidade de energia liberada no processo de fermentação é bem menor que na respiração celular (degradação incompleta da molécula orgânica). • A fermentação é um processo que: • Libera energia a partir de açucares ou outras moléculas orgânicas, como aminoácidos, ácidos orgânicos, purinas e pirimidinas. • Não requer oxigênio. • Não requer a utilização do ciclo de Krebs ou de uma cadeia de transporte de elétrons. • Produz pequena quantidade de ATP ( uma ou duas moléculas de ATP para cada molécula de matéria inicial), maior parte da energia esta nos produtos finais, como ácido lático ou etanol. CRESCIMENTO BACTERIANO • O crescimento bacteriano se refere ao aumento do número de bactérias e não a um aumento no tamanho das células individuais. • As bactérias normalmente se reproduzem por fissão binária ou divisão binária. • Algumas espécies bacterianas se reproduzem por brotamento; elas formam uma pequena região inicial de crescimento (o broto), que vai se alargando até atingir um tamanho similar ao da célula parental, e então se separam dela FASES DO CRESCIMENTO BACTERIANO • Quando algumas bactérias são inoculadas em um meio líquido de crescimento e a população é contada em intervalos regulares (tempo de geração), é possível representar graficamente a curva de crescimento bacteriano, que mostra o crescimento das células em função do tempo. • O conceito da curva de crescimento bacteriano é fundamental para entendermos a dinâmica das populações e o controle durante, por exemplo: • A preservação ou a deterioração de alimentos, • a microbiologia industrial, como a produção de etanol, e o curso e o tratamento de doenças infecciosas. FASES DO CRESCIMENTO BACTERIANO REPRODUÇÃO BACTERIANA • Reprodução assexuada: Divisão binária • Replicação cromossômica • Crescimento e extensão de componentes da parede celular • Formação de septo ou parede transversal • Separação das células filhas. REPRODUÇÃO BACTERIANA • Reprodução sexuada • Transfere material genético e características produzindo novas cepas bacterianas diferentes. • Codifica a resistência a antibióticos • Tipos: • Conjugação: transferência de plasmídeos através do pili • Transdução: Fragmento de DNA carreado de uma bactéria para outra através de um bacteriófago • Transformação: incorporação de fragmentos livres de DNA de uma bactéria que sofreu lise em uma outra do mesmo gênero. Transdução Transformação FATORES NECESSÁRIOS PARA O CRESCIMENTO BACTERIANO • Os fatores necessários para o crescimento microbiano podem ser divididos em duas categorias principais: • Físicos: • Temperatura, • pH • Pressão osmótica • Químicos. • Água • Fontes de carbono e nitrogênio • Oxigênio • Fatores orgânicos FATORES FÍSICOS • TEMPERATURA • A maioria dos microrganismos cresce bem nas temperaturas ideais para o seres humanos • Cada espécie bacteriana cresce a uma temperatura mínima, ótima e máxima específica • Temperatura de crescimento mínimo: • Menor temperatura onde a espécie é capaz de crescer • Temperatura de crescimento ótimo: • Onde a espécie apresenta melhor crescimento • Temperatura de crescimento máximo: • Maior temperatura, onde ainda é possível o crescimento FATORES FÍSICOS • TEMPERATURA • Conforme a temperatura os microrganismos são classificados em 3 grupos: • Psicrófilos : crescem em baixas temperaturas (-10 a 15ºC) • Temperatura ótima de crescimento – 0 a 15ºC • Mesófilos: crescem em temperaturas moderadas (10 a 50ºC) • Temperatura ótima de crescimento – 25 a 40ºC ( maioria dos microrganismos patogênicos, crescimento em estufa a 37ºC) • Termófilos: crescem em altas temperaturas (40 a 70ºC) • Temperatura ótima decrescimento – 50 a 60º C • Termófilos extremos (hipertermófilos) – 68 a 110ºC (Arquibactérias – 80º C temp. ótima) • vive em fontes de água quente associadas à atividade vulcânica; o enxofre normalmente é importante na sua atividade metabólica. • A temperatura mais alta conhecida para crescimento bacteriano e replicação é de cerca de 121°C perto de chaminés hidrotermais abissais. FATORES FÍSICOS • pH • Refere-se a acidez ou alcalinidade de uma solução. A maioria dos microrganismos cresce melhor perto da neutralidade (pH 6,5 – 7,5). • Poucas bactérias crescem em um pH ácido abaixo de 4 • Ex. Um tipo de bactéria quimioautotrófica, encontrada na água de drenagem das minas de carvão e que oxida enxofre para formar ácido sulfúrico, pode sobreviver em pH 1. • Bactérias acidófilas: alto grau de tolerância à acidez (pH 0,5 a 6,0) • Bactérias neutrófilas: crescem em ambientes com acidez entre ( pH 5,5 a 8,5) • Bactérias alcalófilas: crescem em ambientes com acidez entre (pH 9,0 e 10,0) • Os fungos e as leveduras crescem em uma faixa maior de pH que as bactérias, mas o pH ótimo dos fungos e das leveduras geralmente é menor que o bacteriano, entre pH 5 e 6 FATORES FÍSICOS • PRESSÃO OSMÓTICA • Os microrganismos obtêm a maioria dos seus nutrientes da água presente no seu meio ambiente. • Portanto, eles requerem água para seu crescimento, sendo que sua composição (conteúdo celular) é de 80 a 90% de água. • Pressões osmóticas elevadas têm como efeito remover a água necessária para a célula Plasmólise: retração do volume da célula por perda de água, causado quando o meio extracelular é mais concentrado que no citoplasma da célula. FATORES FÍSICOS • PRESSÃO OSMÓTICA • O crescimento da bactéria é inibido quando a membrana plasmática se separa da parede celular. • Peixe salgado, mel e leite condensado são preservados por esse mecanismo, sendo que as concentrações elevadas de sal ou açúcar removem a água fora de qualquer célula microbiana presente e consequentemente impedem seu crescimento. FATORES FÍSICOS • PRESSÃO OSMÓTICA • Não halófilos: não necessitam de sal e não toleram a presença no meio • Halotolerantes: não necessitam de sal mas toleram a presença no meio • Halófilos: necessitam de sal em uma concentração moderada • Halófilos extremos: necessitam de sal em altas concentrações FATORES QUÍMICOS • ÁGUA • Essencial para o microrganismos – 80 a 90% do conteúdo celular. • Ambiente com menor concentração de água: • A bactéria desenvolve mecanismos para obter água através do aumento da concentração de solutos internos seja pelo bombeamento de íons para o interior da célula ou pela síntese de solutos orgânicos • Açúcares • Álcoois • Aminoácidos FATORES QUÍMICOS • FONTES DE CARBONO • Essencial para a síntese de todos os compostos orgânicos necessários para a viabilidade celular (elemento estrutural básico para os seres vivos) • Bactérias heterotróficas: obtém carbono a partir de matéria orgânica (viva ou morta) como proteínas, carboidratos e lipídios. • Bactérias autotróficas: obtém carbono a partir do CO2 (gás carbônico) FATORES QUÍMICOS • Além do carbono, as bactérias necessitam de outros elementos para sintetizar material celular. • Exemplo 1: Síntese de proteínas ----- precisa de Nitrogênio e enxofre • Exemplo 2: Síntese de DNA, RNA e ATP ----- precisa de Nitrogênio e fósforo. O Nitrogênio constitui cerca de 14% do peso seco da célula bacteriana Enxofre e fósforo constituem cerca de 4% • O nitrogênio é utilizado para sintetizar os grupos aminos presentes nos aminoácidos • Obtenção de Nitrogênio: • Decomposição de matéria orgânica (proteínas, aminoácidos) • Amônia • Nitrato FATORES QUÍMICOS • ENXOFRE • Utilizado na síntese de aminoácidos contendo ENXOFRE e vitaminas como tiamina e biotina • Fontes naturais de enxofre: íons sulfato, Sulfeto de hidrogênio e os aminoácidos contendo enxofre. • FÓSFORO • Essencial para a síntese dos ácidos nucléicos e para os fosfolipídeos, componentes da membrana celular. • Fontes naturais de fósforo: Íons de fosfato, DNA, RNA e ATP. FATORES QUÍMICOS • POTÁSSIO, MAGNÉSIO E CÁLCIO • Também são elementos essenciais para os microrganismos • Utilizados como co-fatores para as reações enzimáticas da bactéria. • ELEMENTOS TRAÇOS: • Ferro, Cobre, Molibdênio e Zinco • Utilizados como co-fatores essenciais para atividades de algumas enzimas. FATORES QUÍMICOS • OXIGÊNIO • Estamos acostumados a pensar no oxigênio molecular (O2) como um elemento necessário à vida, mas em algumas circunstâncias esse elemento pode se tornar um gás venenoso. Outrora, é importante no desenvolvimento microbiano. • Organismos classificados em: • Aeróbios • Estritos (obrigatórios): necessitam de O2 • Facultativos: não necessitam de O2 mas crescem melhor com O2 • Microaerófilos: necessitam de O2 mas em níveis menores • Anaeróbios • Aerotolerantes: não necessitam de O2 mas crescem melhor sem O2 • Anaeróbios estritos (obrigatórios): não toleram O2 (letal, toxico) Teste de Catalase Transposons • São pequenos fragmentos de DNA (possuem 700 a 40.000 pares de bases de comprimento) que podem se mover (ser “transpostos”) de uma região de uma molécula de DNA para outra. • Eles podem se mover de um local para outro no mesmo cromossomo, ou para o plasmídeo; • Efeito devastador: à medida que os transposons se movem nos cromossomos, eles podem se inserir dentro dos genes, tornando-os inativos – Mutação espontânea • Felizmente, a ocorrência da transposição é relativamente rara • Transposons bacterianos podem conter genes para Enterotoxinas ou para a resistência a antibióticos. • Por exemplo, a resistência à vancomicina foi transferida de Enterococcus faecalis para Staphylococcus aureus via um transposon denominado Tn1546. Os transposons são, então, mediadores poderosos da evolução nos organismos FIM
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