Microbiologia Questões Bactérias

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Microbiologia – Bactérias
1.	Mecanismos patogênicos e ação dos medicamentos.
Os mecanismos de patogenicidade bacteriana consistem na sequência de ações que provocam uma doença, superando as defesas do hospedeiro. A virulência é o grau ou a extensão da patogenicidade.
Ocorre por lesão nos tecidos (lise celular) e ao acúmulo de subprodutos tóxicos (toxinas transportadas pelo sangue e linfa, que lesam locais distantes do ponto original de invasão).
A maioria dos medicamentos antimicrobianos interfere na síntese do peptideoglicano (responsável pela integridade da parede bacteriana).
2. Bactérias Gram positivas e Gram negativas. O que são Bactérias Fastidiosas?
Colorações diferenciais são assim denominadas porque correspondem a procedimentos que não corram igualmente todos os tipos de células. Uma importante coloração diferencial, amplamente utilizada em bacteriologia, é a coloração de Gram. As diferenças entre os dois tipos de parede explicam o comportamento diverso das bactérias frente ao método de Gram:
Bactérias Gram-positivas: Parede celular mais espessa (devido aos peptídeoglicanos), ocorrendo fixação do Corante Cristal Violeta (Violeta de Genciana) Célula cora em azul/roxo;
Bactérias Gram-negativas: Parede celular mais delgada, maior descoloração, corando pela Fucsina apresentando coloração vermelha.
Bactérias fastidiosas são bactérias que têm requerimentos nutricionais elevados, ou seja, são necessários meios enriquecidos com compostos específicos para que sejam capazes de se desenvolver in vitro.
3. Citar três características do Mycobacterium e da importância do Ác. Micólico. Dê exemplo de uma espécie.
Apresentam-se como bacilos retos ou levemente curvados, com 1 - 10mm de comprimento; podem se apresentar na forma cocobacilar ou filamentosa , variando de espécie para espécie. De maneira geral, bacilos imóveis, não esporulados, aeróbios estritos, sendo, sua principal característica, a capacidade de resistir à descoloração quando tratadas com álcool-ácido (BAAR). 
Dificilmente pode ser corado pelo método de Gram, mas é considerado como Gram-positivo pelas características de sua parede celular.
Ácido Micólico são longos ácidos graxos encontrados nas paredes celulares do Mycobacterium, conferindo resistência. Um exemplo de importância clínica é a bactéria causadora da Tuberculose: Mycobacterium tuberculosis (ou bacilo de Koch).
4. Ação e Efeito da Escherichia coli.
Escherichia coli são bactérias Gram negativas, anaeróbicas facultativas, que fazem parte da flora intestinal normal humana;
Algumas enterobactérias produzem fatores de virulência (proteínas de adesão, de invasão, e proteínas tóxicas que caracterizam diversas manifestações clínicas, que vão desde diarreias coleriformes, colites agudas, disenteria e até morte).
5. Principais Características do Streptococcus e as doenças causadas.
R: São cocos Gram-positivos, anaeróbios facultativos, não produtores de catalase (enzima de composição do peróxido de hidrogênio) e de citocromo-oxidase. Os estreptococos com relevância clínica são homofermentadores, sendo o ácido lático o produto final da fermentação da glicose. Podem produzir hemolisinas (lise de hemácias).
As bactérias do gênero Streptococcus são capazes de causar diversas doenças nos seres humanos. As mais frequentes são as infecções do trato respiratório (pneumococo), pele e tecidos moles, endocardites, sepse e meningites. 
6. Associação antimicrobiana e estrutura bacteriana. Diferencie Bactericida de Bacteriostático.
Os principais mecanismos de ação dos antimicrobianos contra bactérias possuem os seguintes alvos na célula bacteriana:
Síntese da parede celular;
Interferência na integridade da membrana celular;
Interferência na síntese proteica;
Atividade anti-metabólica;
Síntese e integridade de ácidos nucleicos.
Bactericida = morte dos microrganismos 
Bacteriostático = apenas inibe as atividades metabólicas dos microrganismos 
7. Principais Características do Clostridium e algumas doenças causadas.
- Bacilos Gram positivos, esporulados e produtores de exotoxinas;
- Anaeróbios estritos e não fermentam açúcares;
- Algumas espécies são móveis com flagelo peritríquio, entretanto existem espécies imóveis;
- Não reduzem Sulfato;
- Raramente produzem catalase ou apresentam fraca reação;
• São sacarolíticos e/ou proteolíticos;
• Poucas espécies são encapsuladas.
Algumas doenças causadas são: 
C. tetani: Tétano. Esporos penetram o ferimento - Bloqueia liberação de transmissores inibitórios;
C. botulinum: Botulismo. Ingestão da exotoxina Bloqueia liberação de acetil-colina;
C. difficile: é uma causa comum de diarréia, podendo causar desde uma diarréia leve até colite pseudomembranosa, podendo resultar em morte.
8. Diferenciação bioquímica de Pseudomonas e Enterobacterias.
Pseudomonas são bacilos Gram-negativos e Catalase positivas (Aeróbias estritas), enquanto que Escherichia coli são bactérias Gram negativas, anaeróbicas facultativas, sendo fermentadoras de lactose (produzem indol).
A maior diferenciação bioquímica se dá pela verificação da ação da Oxidase (oxidação do Citocromo C pelo O2), sendo Pseudomonas (+) e Enterobactérias (-).
9. Citar os principais meios de cultura e como se dá a preparação de um meio de Cultura. 
Meios de cultura são soluções de nutrientes (possuem pH definido e tensão osmótica para garantir a viabilidade do crescimento bacteriano, ou seja, propicia cultivo e reprodução em condições ótimas). 
Podem apresentar consistência sólida, líquida ou semissólida (0,5% de ágar, servindo para teste de motilidade bacteriana).
Os principais meios de cultura sólidos são:
Ágar-sangue: possibilita crescimento da maioria dos microrganismos;
Agar MacConkey: meio seletivo Crescimento de Microrganismos Gram-positivos; 
Ágar Saboraud: cultivo, isolamento e identificação de fungos patogênicos e leveduras. O ótimo crescimento dos fungos se deve às altas concentrações de carboidratos;
Ágar Saboraud + Cloranfenicol: semelhante ao Saboraud, porém inibe o crescimento de bactérias sensíveis ao Cloranfenicol.
Meio de Cultura líquido: Caldo Brain Heart Infusion (BHI): com peptonas e dextrose.
Preparação de um meio de cultura sólido:
Extrato de carne 3g
Peptona 5g
Ágar – ágar 15g
Água destilada 1000ml
Pesar e hidratar os componentes
Fundir (utilizando balão Volumétrico e manta aquecedora)
Distribuir em tubos de ensaio com tampa – se for armazenar em tubo inclinado 45o – com validade de 3 meses; Senão, autoclavar no balão volumétrico vedado, para que depois seja distribuído em placas, com validade de 15 dias;
Autoclavar (121 o C por 15 minutos);
Resfriar a +/- (55 oC);
Armazenamento: refrigeração 2 a 8 oC;
pH: 6,8 +/-0,2.
10. Qual a curva de crescimento bacteriano
11. Métodos de Esterilização/Desinfecção/Ag. Físicos/Pasteurização.
O crescimento de micro-organismos pode ser controlado através de métodos químicos e físicos. Este controle pode levar à eliminação total dos microrganismos ou não.
Métodos de eliminação parcial: reduzem a população bacteriana. 
Assepsia/Sanitização (alimentos);
Desinfecção;
Antissepsia (no corpo);
Pasteurização (Sucos, leites e outras bebidas).
•	Métodos de eliminação total: inibem a carga microbiana.
Esterilização: Perda de viabilidade (capacidade reprodutiva); Podendo ser feita por:
Agentes Físicos: Calor (seco ou úmido) /Frio, Irradiação (Raios Gama, pois Ultravioleta apenas diminui a carga microbiana) e Filtração (Filtros Bacteriológicos – HEPA, Milipore e Membranas Filtrantes);
Agentes Químicos: Antimicrobianos.
12. Em Genética Bacteriana o que é variação fenótipo temporária e permanente?
R: Temporária é sem alteração no genoma (são alterações morfológicas e fisiológicas regulação gênica);
 Permanente é com alteração no genoma (mutação e recombinação gênica absorção de elementos genéticos móveis: fagos, plasmídeos de virulência, ilhas de patogenicidade e perda de porções de DNA-cromossômico).
13. Neisseria: morfologia e diversidade. Diferença entre N. gonorrhoeae eN. meningitidis?
R: Neisseria é um gênero de diplococos gram-negativos não formadores de esporos. Estas bácterias são aeróbicas ou anaeróbicas facultativas. Frequentemente encontradas em membranas mucosas humanas, podem crescer em qualquer temperatura próxima a temperatura corporal. O gênero Neisseria é constituído de dez espécies, duas das quais são patógenos estritamente humanos, a Neisseria gonorrhoeae (gonococus), o agente causador da gonorréia, e a Neisseria meningitidis (meningococus), o agente causador da meningite meningocócica. 
N. meningitidis apresenta cápsula enquanto N. gonorrhoeae não é capsulado.
14. Qual a ordem dos Reagentes da coloração de Gram?
A coloração de Gram começa com a aplicação de um corante básico, o cristal-violeta. Deixar agir por 1 minuto;
A seguir, é aplicada uma solução de iodo (solução de Lugol - mordente), deixando atuar durante 1 minuto (para fixar o azul-violeta);
Lavar em água corrente e secar suavemente; 
Todas as bactérias estarão coradas de azul ou rosa neste momento;
Depois, as células são tratadas com álcool (por um minuto): as células Gram-positivas retêm o complexo cristal - violeta – iodo, ficando azuis, enquanto as células Gram-negativas são totalmente descoradas pelo álcool. Como etapa final, o contracorante (fucsina) é aplicado (30 segundos), de modo que as células Gram-negativas descoradas adotarão a coloração contrastante (vermelha), e as células Gram -positivas revelam-se em cor azul ou roxa.
15. Comente sobre a coloração de Ziehl-Neelsen.
Algumas bactérias quando tratadas pela fucsina, resistem à descoloração subsequente por uma solução de álcool-ácido, permanecendo coradas em vermelho. A álcool-ácido resistência é uma propriedade da parede celular das bactérias, ou seja, a resistência à descoloração depende de uma membrana semipermeável da parede da célula bacteriana. Esta membrana permitiria a difusão da fucsina nas células, mas não permitiria a saída da fucsina ácida.
16. Todas as bactérias têm esporos? Para que servem estas estruturas?
Somente algumas bactérias apresentam a formação de endósporo, sendo as bactérias dos gêneros Clostridium e Bacillus os gêneros de bactérias formadora de esporos. Osprocessos de esporulação têm início paralelo a um sinal ambiental que resulta na parada do crescimento (p. ex.: falta de nutriente essencial), iniciando o processo de formação do endósporo. Essa estrutura contém o material genético da célula bacteriana que foi replicado, sendo esse material revestido por uma série de membranas externas que lhe conferem resistência. As formações de esporos em bactérias envolvem uma resposta a condições ambientais adversas como o aumento da temperatura, falta de nutrientes e/ou dessecamento, servindo de estrutura de resistência da célula bacteriana.
17. O que é a escala de MacFarland?
A escala de MacFarland estabelece uma relação entre o grau de turbidez do meio de cultura com a quantidade (concentração) de bactérias em solução, tendo como base a seguinte premissa, maior quantidade de bactérias resulta em um valor maior de turbidez do meio.
18. Tendo em vista uma adequada esterilização relacionar, para cada caso abaixo, o equipamento mais adequado e justifique ao lado: 
Sala cirúrgica			( c ) Bico de Bünsen 
Vidraria				( d ) Autoclave 
Alça de platina			( a ) Luz ultravioleta 
Aventais			( b ) Forno Pasteur (calor seco) 
Meios de cultura com vitamina	( e ) Filtro 
a.) A radiação UV é usada para controlar os microrganismos no ar. Uma lâmpada UV ou “germicida” é comumente encontrada em salas de hospitais, enfermarias e salas de cirurgia.
b.) Esterilização por calor seco: ESTUFA OU FORNO DE PASTEUR
•Geralmente 180 °C por 2 horas;
•Remove toda umidade do material
 c.) Flambar a alça de platina no Bico de Bunsen evita a contaminação.
d.) calor úmido sob pressão é utilizado na esterilização e na descontaminação de roupas
e.) A filtração envolve a remoção de células de microrganismos de soluções líquidas ou de gases através do atravessamento de membranas filtrantes. 
Esteriliza meios de cultura com componentes que possam sofrer alteração por acção do calor (p.ex. vitaminas, antibióticos, açúcares, aminoácidos) e na indústria farmacêutica para esterilização de soluções de vitaminas, de agentes quimioterapêuticos, soro etc. 
19. Utilização de Radiação na esterilização?
Radiação gama: radiações eletromagnéticas. São ondas de maior frequência e, portanto, possuem maior energia.
Os raios ultravioletas também podem ser usados para conter a proliferação de microrganismos, mas sua penetração é limitada, não vai além da superfície onde incidem.
A luz UV é mais eficiente que o Micro-ondas, visto que tem um comprimento de onda menor.
OBS: Quanto maior a Frequência, menor é o comprimento de onda.