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* * ESTRUTURA DOS ÁCIDOS NUCLEICOS E EXPRESSÃO GÊNICA ADRIELLE ZAGMIGNAN Aula 02 UNIVERSIDADE DO MARANHÃO COORDENADORIA GERAL DA SAÚDE COORDENADORIA DO CURSO DE NUTRIÇÃO * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos DNA e RNA Os ácidos nucleicos são assim chamados por seu caráter ácido, e por terem sido originalmente descobertos no núcleo das células. A partir da década de 1940, os ácidos nucleicos passaram a ser intensivamente estudados, pois se descobriu que eles formam os genes responsáveis pela herança biológica. Um gene é uma parte de uma determinada molécula de DNA, que serve como molde para fazer uma molécula de RNA funcionalmente importante. * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos DNA e RNA JÁ PAROU PARA PENSAR QUAIS AS FUNÇÕES DOS GENES? * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos DNA e RNA Controlam a hereditariedade de pai para filho. Controlam o funcionamento celular ao determinar que substâncias serão sintetizadas pelas células – quais estruturas, quais enzimas, quais substâncias químicas. Funções dos genes * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos DNA e RNA Gene (DNA) Esquema geral do controle genético Formação de RNA Formação de proteína Estrutura da célula Enzimas da célula Funcionamento da célula * * Estrutura dos Ácidos Nucleícos Formados por monômeros de nucleotídeos Nucleotídeos Açúcar: desoxirribose ou ribose Grupo fosfato (Ácido fosfórico) Bases Nitrogenadas * * Estrutura dos Ácidos Nucleícos Representação do nucleotídeo * * Estrutura dos Ácidos Nucleícos Há dois tipos de ácidos nucleicos: Ácido desoxirribonucleico conhecido como DNA Ácido ribonucleico conhecido como RNA. Essas substâncias apresentam, respectivamente, os açucares, desoxirribose e ribose em suas moléculas. * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos Diferentemente dos resíduos de açúcar e fosfato, as bases nitrogenadas de uma molécula de ácido nucleico variam. A sequência de bases identifica o ácido nucleico e determina sua função. * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos Quatro tipos de bases nitrogenadas são comumente encontradas no DNA ADENINA (A) CITOSINA (C) GUANINA (G) TIMINA (T) O RNA também apresenta quatro tipo de bases nitrogenadas ADENINA (A) CITOSINA (C) GUANINA (G) URACILA (U) * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos As bases nitrogenadas são classificadas em pirimídicas e púricas . As bases nitrogenadas são constituídas por anéis heterocíclicos de carbono (C) e por átomos de nitrogênio (N). Púricas: Possuem dois anéis interligados – Adenina e Guanina; Pirimídicas: Possuem um anel simples – Citosina, Timina e Uracila. * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos * * DNA - A Dupla Hélice As fitas complementares de DNA unem-se através de pontes de hidrogênio e se torcem para formar a dupla-hélice. 0,34 nm de distância de cada par de base 10 pares de bases por giro * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos DNA - A Dupla Hélice A adenina emparelha-se e forma ponte de hidrogênio com timina; a guanina emparelha-se e forma ponte de hidrogênio com citosina. ADENINA (A) CITOSINA (C) GUANINA (G) TIMINA (T) * * A Dupla Hélice Cerne Hidrofóbico: contribui para a estabilidade molecular. Arcabouço Açúcar-fosfato Sulcos: São importantes para interações DNA-Proteínas * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos DNA - A Dupla Hélice Como as ligações fosfodiéster conectam os carbonos 3’ e 5’ de resíduos de açúcar sucessivos, as duas extremidades de uma fita simples de DNA são diferentes. A extremidade 5’ apresenta um resíduo de açúcar no qual o carbono 5’ não está conectado a outro resíduo de açúcar. A extremidade 3’ apresenta um resíduo de açúcar cujo carbono 3’ não está envolvido em uma ligação fosfodiéster. * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos DNA - A Dupla Hélice * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos RNA A adenina emparelha-se e forma ponte de hidrogênio com uracila; a guanina emparelha-se e forma ponte de hidrogênio com citosina. ADENINA (A) CITOSINA (C) GUANINA (G) URACILA (U) Moléculas de RNA são geralmente formadas por cadeia única, que se enrola sobre si mesma. Alguns vírus, no entanto, possuem RNA de dupla-cadeia. * * Estrutura dos Ácidos Nucleicos RNA O RNA tem origem a partir da molécula de DNA. O RNA, ou ácido ribonucleico, é uma molécula em cadeia simples, apresentando uma estrutura primária semelhante à do DNA. * * Diferenças entre DNA e RNA * * Tipos de RNA Os RNA, existem na célula como produto direto de genes e pertencem a 3 classes distintas: mRNA (Mensageiro) – 1 a 5 % do RNA total rRNA (Ribossômico) – 75 % do RNA total tRNA (Transportador) – 10 a 15 % do total * * Tipos de RNA O RNA mensageiro (mRNA), o qual alberga informação que posteriormente será traduzida numa proteína; O RNA ribossomal (rRNA), componente principal do ribossoma; O RNA transportador (tRNA), que funciona como uma molécula transportadora de aminoácidos no decorrer do processo de tradução. * * Citoplasma Transcrição Núcleo Translação Proteína Ribossoma (Complexo rRNA/Proteína) Tipos de RNA * * Replicação do DNA - Teorias O modelo estrutural do DNA proposto por Watson e Crick explica a duplicação dos genes: as duas cadeias do DNA se separam e cada uma delas orienta a fabricação de uma metade complementar. O experimento dos pesquisadores Meselson e Stahl confirmou que a duplicação do DNA é semiconservativa, isto é, que metade da molécula original se conserva íntegra em cada uma das duas moléculas-filhas. * * Replicação semi-conservativa Durante a replicação do DNA as duas fitas velhas ou mães servem de molde para cada fita nova. * * Replicação do DNA No processo de replicação do DNA, as pontes de hidrogênio entre as bases se rompem e as duas cadeias começam a se separar. À medida que as bases vão sendo expostas, nucleotídeos que vagam pelo meio ao redor vão se unindo a elas, sempre respeitando a especificidade de emparelhamento: * * DNA polimerase Enzimas que catalisa a reação de síntese do DNA Adiciona nucleotídeos tri-fosfato à extremidades 3’OH livre Alongamento da cadeia de DNA sempre é feito na direção 5’>3’ (endonuclease 5’>3’) * * Replicação do DNA - Polimerase DNA Polimerase III Sentido 5’ → 3’ Nucleotídeos 3P são adicionados * * Replicação do DNA - Teorias * * Forquilha de replicação Fita líder (leading strand) 5’ 3’ Fita retardada (lagging strand) 3’ 5’ * * Forquilha de Replicação * * Desenovelamento do DNA Retirada das histonas Proteínas de ligação a fita simples (SSBPs) DNA helicase Quebra pontes de H DNA topoisomerases Tiram a tensão DNA polimerase * * TRANSCRIÇÃO Processo pelo qual uma molécula de RNA é produzida usando como molde o DNA. A síntese de RNA (mensageiro, por exemplo) se inicia com a separação das duas fitas de DNA. Apenas uma das fitas do DNA serve de molde para a produção da molécula de RNAm. A outra fita não é transcrita. Essa é uma das diferenças entre a duplicação do DNA e a produção do RNA. * * DNA Transcrição DNA RNA * * TRANSCRIÇÃO – Síntese do RNA Durante a síntese do RNA, os dois filamentos da molécula de DNA se separam temporariamente; um desses filamentos é, então, usado como molde para síntese da molécula de RNA; As trincas do código no DNA causam a formação de trincas complementares do código (chamadas códons) de RNA; Esses códons, controlam a sequência dos aminoácidos da proteína que será sintetizada no citoplasmas. * * TRANSCRIÇÃO – Síntese de RNA O RNA é complementar a fita molde do DNA, apresentando a mesma orientação 5’ 3’ e a mesma sequencia de bases, exceto que U substituio T da fita de DNA oposta que serviu como molde; A fita de DNA que não serviu como molde é chamada de fita senso; A fita de DNA que serviu como molde para transcrição é chamada de fita antissenso; * * TRANSCRIÇÃO * * TRADUÇÃO – Síntese de proteína RNAm (mensageiro) leva a informação da sequência proteica a ser formada do núcleo para o citoplasma, onde ocorre a tradução. Ele contém uma sequência de trincas correspondente a uma das fitas do DNA. Cada trinca (três nucleotídeos) no RNAm é denominada códon e corresponde a um aminoácido na proteína que irá se formar. * * TRADUÇÃO – Síntese de proteína * * TRADUÇÃO – Síntese de proteína Quando o RNAm chega ao citoplasma ele se associa ao ribossomo. Após essa associação os RNAt levam os aminoácidos, que serão ligados, formando assim a proteína. * * TRADUÇÃO – Síntese de proteína * * A U G U U U C U U G A C C C C U G A U A C A A A Quando o RNAm chega ao citoplasma, ele se associa ao ribossomo. Nessa organela existem 2 espaços onde entram os RNAt com aminoácidos específicos. Somente os RNAt que têm sequência do anti-códon complementar à sequência do códon entram no ribossomo. * * A U G U U U C U U G A C C C C U G A U A C A A A Uma enzima presente na subunidade maior do ribossomo realiza a ligação peptídica entre os aminoácidos. * * A U G U U U C U U G A C C C C U G A U A C A A A O RNAt “vazio” volta para o citoplasma para se ligar a outro aminoácido. * * A U G U U U C U U G A C C C C U G A U A C A A A G A A O ribossomo agora se desloca uma distância de 1 códon. o espaço vazio é preenchido por um outro RNAt com sequência do anti-códon complementar à sequência do códon. * * A U G U U U C U U G A C C C C U G A U A C A A A G A A Uma enzima presente na subunidade maior do ribossomo realiza a ligação peptídica entre os aminoácidos. * * A U G U U U C U U G A C C C C U G A U A C A A A G A A O RNAt “vazio” volta para o citoplasma para se ligar a outro aminoácido. e assim o ribossomo vai se deslocando ao longo do RNAm e os aminoácidos são ligados. * * A U G U U U C U U G A C C C C U G A G G G Códon de terminação Quando o ribossomo passa por um códon de terminação nenhum RNAt entra no ribossomo, porque na célula não existem RNAt com sequências complementares aos códons de terminação. * * A U G U U U C U U G A C C C C U G A G G G Então o ribossomo se solta do RNAm, a proteína recém formada é liberada e o RNAm é degradado. * * Tradução: Molécula de mRNA A U G G C A U G C G A C G A A U U C G G A C A C A U A Met Ala 5’ 3’ Direção do avanço do ribossomo Ribossomo Proteína tRNA aa livre codon * * A U G G C A U G C G A C G A A U U C G G A C A C A U A Met Ala 5’ 3’ * * A U G G C A U G C G A C G A A U U C G G A C A C A U A Met Ala Cys 5’ 3’ * * A U G G C A U G C G A C G A A U U C G G A C A C A U A Met Ala Cys Asp 5’ 3’ * * A U G G C A U G C G A C G A A U U C G G A C A C A U A Met Ala Cys Asp Glu 5’ 3’ * * A U G G C A U G C G A C G A A U U C G G A C A C A U A Met Ala Cys Asp Glu Phe 5’ 3’ * * A U G G C A U G C G A C G A A U U C G G A C A C A U A Met Ala Cys Asp Glu Phe Gly 5’ 3’ * * A U G G C A U G C G A C G A A U U C G G A C A C A U A Met Ala Cys Asp Glu Phe Gly His 5’ 3’ * * A U A A A A U U A A U G A A C C C A C A A U A A A A A Ala Cys Asp Glu Phe Met Gly His Ile Lys Leu Met Asn Pro Gln 5’ 3’ STOP * * DESSA FORMA.... A informação genética, armazenada nos cromossomos, é transferida às células filhas através da replicação do DNA, é expressa através da transcrição em RNAm e tradução subsequente em cadeias polipeptídicas. * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *
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