Dosagem de Salicilato em Urina

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TOXICOLOGIA 
Prática 3 – DOSAGEM DE SALICILATOS EM URINA 
 
 
Salicilatos 
Os salicilatos estão presentes nos compostos do tipo ácido acetil salicílico com 
ação analgésica, antinflamatória e antipirética. Apresenta em sua toxicodinâmica os 
seguintes efeitos: 
- Ligante forte à proteínas plasmáticas  interações medicamentosas - metabolização 
- Estímulo do centro respiratório: hiperventilação = alcalose respiratória (excreção de 
bicarbonato como mecanismo compensatório), 
- Alteração da coagulação sanguínea: antiagregante plaquetário (ácido tromboxano) e 
atividade antifibrinogemia. 
- Aumento do metabolismo lipìdico: produção corpos cetônicos, ácido láctico = acidose 
metabólica. 
O Ácido Acetil Salicílico (AAS, Aspirina®) é biotransformado em salicilato, 
portanto poderá representar efeitos tóxicos iguais ao do salicilato. 
 
 
A) Relação de Materiais Necessários: 
Material 
Amostra (urina) 
 Salicilato de sódio ou ácido salicílico 
 Metanol 
 Ácido nítrico concentrado 
 Nitrato férrico 
 Estante para tubos 
 Balão volumétrico 10 mL (para o preparo da curva padrão) 
 Pipeta volumétrica 2,5 mL (para o preparo da curva padrão) 
 Pipeta volumétrica 5 mL( para o preparo da curva padrão) 
 Pipetas de 1 mL na bancada do professor (para pipetar a urina) 
 Pipetas de 2 mL na bancada do professor (para pipetar os reagentes) 
 Tubos de ensaio 10 mL 
 Tubos de ensaio 10 mL na bancada do professor ( p/ curva padrão) 
 
 
 
B) Relação de Equipamentos Necessários: 
Equipamentos 
 Espectrofotômetro 
Balança analítica 
 
C) Descrição do Preparo de Soluções e Reagentes: 
 Solução padrão de salicilato– 500 g/ml: Dissolver 58mg de salicilato de sódio ou 
50mg de ácido salicílico em q.s. de metanol e completar o volume para 100 ml com 
água destilada. 
 Solução de Ácido Nítrico 0,07 N: Diluir 4,69 ml de ácido nítrico concentrado (d = 1,42 
g/ml e Teor = 70,5 %) para 1000 ml com água destilada. 
 Solução de Nitrato Férrico à 1% em Ácido Nítrico 0,07 N. 
 
D) Procedimentos Experimentais: 
I. Curva de Calibração: deve ser feita a partir da solução-padrão 500g/ml, diluindo 
paras as concentrações de 125 g/ml e 250 g/ml. 
 Solução padrão de salicilato 125 g/ml: Transferir 2,5 mL da solução-padrão de 
salicilato 500 g/ml para um balão volumétrico de 10 mL e completar o volume. 
 Solução padrão de salicilato 250 g/ml: Transferir 5 mL da solução-padrão de 
salicilato 500 g/ml para um balão volumétrico de 10 mL e completar o volume. 
 
II. Preparo das amostras: 
 Colocar em dois tubos de ensaio marcados "A" (Amostra) e "BA" (Branco da 
Amostra) alíquotas de 0,4 ml de urina; 
 Em outros três tubos marcados "P1, P2, e P3" (Padrões) colocar alíquotas de 0,4 
ml das soluções-padrão de salicilato 125g/ml, 250g/ml, 500g/ml 
respectivamente. 
 Em um tubo marcado como BP ( Branco do Padrão), adicionar 0,4 mL da solução 
padrão 500g/ml. 
 Adicionar 1,6 ml de água destilada em todos os tubos; 
 Adicionar 2 ml de solução de nitrato férrico aos tubos "P" e "A". 
 Nos tubos "BP" e "BA" adicionar 2 ml da solução de ácido nítrico 0,07 N; 
 Homogenizar e aguardar 5 minutos; 
 Efetuar as leituras das absorbâncias em 540nm usando o branco 
correspondente. 
Desenho das amostras experimentais: 
AMOSTRA BRANCO AMOSTRA PADRÃO BRANCO PADRÃO 
0,4 ml amostra 0,4 ml amostra 0,4 ml padrão 0,4 ml padrão 
1,6 ml água 1,6 ml água 1,6 ml água 1,6 ml água 
2,0 ml nitrato férrico 2,0 ml ácido nitrico 2,0 ml nitrato férrico 2,0 ml ácido nitrico 
 
 
E) Cálculo: 
Conc. salicilato amostra = Abs amostra X Fator Pd 
onde: 
Abs amostra = absorbância da amostra 
Fator Pd: meia da leitura de cada concentração do padrão  F = concentração 
 ABS 
Valor de Referência: até 200g/ml. Consultar nomograma de Done. 
F) Limpar e organizar todas as vidrarias e a bancada.