embriologia e histologiaaulapreparodelâminas aulas de 26 e 28 08 2014 (1)

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HISTOLOGIA E EMBRIOLOGIA 
 
Preparados permanentes ( lâminas) para 
estudo ao microscópio óptico 
Profª Silvia Mello - UNISUAM 
PREPARO DE LÂMINAS PARA OBSERVAÇÃO AO 
MICROSCÓPIO 
 
►Os objetos são observados devido a transparência 
 
Estruturas vivas que permitem a passagem de luz: 
 
- Cauda de girino; 
 
-Bolsa da bochecha do Ramster. 
 
Preparo de órgãos → Precisam ser reduzidos a cortes 
finos → micrótomo. 
 
 
 
 
 
 
PREPARO DE LÂMINAS PARA OBSERVAÇÃO AO 
MICROSCÓPIO 
 
►ETAPAS 
 
1- Fixação com fixador simples ou mistura fixadora. 
 
Ex: Líquido de Bouin - solução aquosa de ácido pícrico 
(75 ml); formol (25ml); ácido acético glacial (5 ml); 
 
Fixador simples – formol a10% 
 formol a 4% 
 
2- Desidratação em álcool etílico: 
 
-Concentração crescente de 70% até álcool absoluto. 
 
 
 
 
 
PREPARO DE LÂMINAS PARA OBSERVAÇÃO AO 
MICROSCÓPIO 
 
3- Clareamento em benzol, xilol ou toluol ( solventes 
do álcool e da parafina). A peça e embebida em 
substância miscível com parafina. 
 
 
 
 
 
 
 
- 
 
 
PREPARO DE LÂMINAS PARA OBSERVAÇÃO AO 
MICROSCÓPIO 
 
 
4- Impregnação pela parafina fundida (60ºC) → a 
parafina penetra nos vasos, espaços intercelulares e 
interior da célula. Facilita corte. 
 
 
 
 
- 
5-Inclusão: A peça é colocada em molde 
retangular contendo parafina fundida → Obtenção 
de bloco de parafina para ser cortado. 
 
 
PREPARO DE LÂMINAS PARA OBSERVAÇÃO AO 
MICROSCÓPIO 
 
6- Corte no micrótomo 
Corte com micrótomo – 3 a 8 µm 
1 µm = 0,001 mm 
 
PREPARO DE LÂMINAS PARA OBSERVAÇÃO AO 
MICROSCÓPIO 
 
 
 
PREPARO DE LÂMINAS PARA OBSERVAÇÃO AO 
MICROSCÓPIO 
 
 
 
► Depois do corte são estirados em água quente e 
depois colocados em lâminas. 
 
 
 
 
 
 
 
 
PREPARO DE LÂMINAS PARA OBSERVAÇÃO AO 
MICROSCÓPIO 
 
 
Coloração 
 
► A maioria dos tecidos é incolor dificultando a 
visualização; 
► Corantes utilizados em histologia se 
comportam como ácidos ou bases. 
 
Corantes básicos: azul de metileno, azul de 
toluidina, hematoxilina. 
 
Componentes teciduais que reagem com corantes 
básicos: nucleoprotéinas, glicoproteínas. 
 
 
- 
 
 
PREPARO DE LÂMINAS PARA OBSERVAÇÃO AO 
MICROSCÓPIO 
 
 
Coloração 
 
 
Corantes ácidos: Orange B, eosina, fuccina . 
 
 
► A coloração dupla pela hematoxilina e eosina (HE) é 
a mais utilizada. 
 
 
- 
►Antes do do uso do corante é necessário 
desparafinar a lâmina por meio de banhos de 
xilol, reidratar o corte por meio da passagem 
em concentrações decrescentes de álcool 
etílico (100%, 95%, 90%, 80%, 70%). Técnica 
mais utilizada Hematoxilina e Eosina ( HE). 
 
 
 
 
 
 
PREPARO DE LÂMINAS PARA OBSERVAÇÃO AO 
MICROSCÓPIO 
 
 
Coloração 
 
 
 
 
 
PREPARO DE LÂMINAS PARA OBSERVAÇÃO AO 
MICROSCÓPIO 
 
 
Coloração 
 
Hematoxilina – Cora o núcleo de azul e as fibras 
elásticas de forma irregular; 
 
Eosina – Cora o citoplasma e as fibras colágenas de 
róseo; cora as fibras elásticas de forma irregular. 
 
Hematoxilina Férrea- Cora o núcleo de preto 
 
Solução de sais de prata – Cora as fibras colágenas 
de castanho -escuro e as fibras reticulares de preto. 
 
 
 
► Duração do preparo das lâminas – 12 a 48 horas 
 
 
PREPARO DE LÂMINAS PARA OBSERVAÇÃO AO 
MICROSCÓPIO 
 
Interpretação 
 
-Ocorre alteração do tecido pela técnica empregada; 
 
-Para se compreender a arquitetura de um órgão ou 
tecido, torna-se necessário o estudo de cortes 
realizados em diferentes direções; 
 
-Órgãos pequenos ou a parte de órgãos maiores 
podem ser estudados pelos cortes seriados; 
 
-Quando se cora um preparado histológico, de acordo 
com a técnica empregada, apenas alguns aspectos 
das estruturas são evidenciados; 
 
- 
 
 
PREPARO DE LÂMINAS PARA OBSERVAÇÃO AO 
MICROSCÓPIO 
 
 
Interpretação 
 
- É impossível o preparo de uma lâmina que mostre 
todos os componentes celulares e todos os detalhes 
do tecido. 
 
 
Tireóide 
Adipócito 
Tendão 
Preparação de lâmina de extensão sanguínea 
(esfregaço de sangue)