Micro biologia

Prévia do material em texto

Fundação de Ensino de Contagem-Funec/Centec
  Ensino Médio Entregado ao Ensino Técnico
  Departamento de Química 
   Química Industrial
 
 
 
MICROBIOLOGIA
PRÁTICA MEIOS DE CULTURA
Contagem
2017
Introdução
 Os micro-organismos são universais. As correntes de ar carregam os micro-organismos das superfícies terrestres para a atmosfera, e de continente para continente. (PELCZAR JR., 1996)
 Em laboratório foi feita a análise de diversos microrganismos em diferentes meios de cultura. Meios de cultura são composições de substâncias que fornecem nutrientes necessários para o desenvolvimento de microrganismos. Sendo favorecido o crescimento, é possível a identificação desses organismos através das suas atividades bioquímica e metabólica.
	
Objetivos
 O objetivo da aula prática foi informar às técnicas de assepsia aos acadêmicos; os materiais e equipamentos utilizados e o preparo de um meio de cultura PCA para micro-organismos.
Materiais e reagentes
Microscópio,
Meios de cultura,
Metodologia
 Fui utilizado de placas como forma do meio de cultura para microrganismos, sendo todas elas já esterilizadas; “a finalidade da esterilização é tornar inativos ou remover todos os micro-organismos vivos. (LIGHTFOOT; MAIER, 2003)”.
 Houve a contaminação das placas em diversos ambientes da instituição, sendo usado uma placa (ou seja, não foram precisos os experimentos) para a captação do contaminante em uns foram usados amostras de dedos em outros colhidos do ar.
Resultados e discussão
CULTURA DO BANHEIRO, AR:
Crescimentos de fungos e bactérias de várias formas obtidas no banheiro.
 
 Microorganismo propício ao banheiro:
Vírus gastrointestinais causam distúrbios estomacais em humanos. Esses incluem o norovírus, que já foi documentado como um dos principais causadores de surtos em navios. Porém, esses vírus não estão apenas presentes nos barcos, eles podem ser encontrados no assento da sua privada, “são facilmente transmitidos e podem permanecer em uma superfície sólida por mais de uma semana”.
Patógenos entéricos, que são encontrados nas comidas (e, naturalmente, nas fezes). Esses incluem o E. coli, salmonela, shigela e campilo bactéria. O E. coli O157:H7 é particularmente desagradável, causando diarreias severas e com sangue. “É a bactéria que matou quatro crianças e causou um surto em alguns restaurantes da Califórnia em 1993”, diz Donna Duberg, professora assistente do laboratório de ciências clínicas na Universidade de St. Louis, nos EUA;
Organismos da pele e do sistema respiratório, como a bactéria Staphylococcus aureus, incluindo um grupo resistente a alguns antibióticos, e um outro grupo conhecido como “bactérias comedoras de carne”;
Fungos dermatofíticos, encontrados em pés de atletas, podem ser transmitidos apenas por caminhar descalço no banheiro e;
Outro fungos residuais podem agir sem causar infecções, mas exacerbam asma e alergias, como mofo e bolor (devido aos esporos liberados).
Mas, antes de você evacuar o seu banheiro e inundar ele de produtos, há uma boa notícia. “Apenas cerca de 1-2% dos germes são patogênicos”, diz Tierno. “Há uma possibilidade de você pegar alguma doença, mas se você praticar uma boa higiene, os riscos são muito pequenos”
NOS GRUPOS:
CULTURA DO AR:
Houve crescimento de colônias de fungos e bactérias de cores e tamanhos diferentes, na cultura de MacConkey não houve crescimento de fungos ou bactérias pois a cultura de Macconkey não isolar bacilos Gram negativos (enterobactérias e não fermentadores) a fermentação ou não da lactose no ambiente.
CULTURA DA PELE:
Crescimento de fungos e bactérias de cores e tamanhos diferentes com o dedo não lavado com detergente ou álcool 70%, proliferou abundante, já na que foi lavado com detergente e álcool 70% houve uma pequena colônia de cor rosa mostrando que a lavagem não foi 100% e proliferou a cultura.
CULTURA DA TOSSE:
Colônia pequena de cor branca indicando bactérias mucosa.
Ágar nutriente: Simples, de fácil preparo e barato, é utilizado na análise de água, alimentos e leite como meio para cultivo de amostras submetidas a exames bacteriológicos e isolamento de organismos para culturas puras.
Ágar MacConkey: Destinado para o crescimento de bactérias Gram negativas e indica a fermentação de lactose. Colônias de bactérias que fermentam lactose tornam o meio rosa choque e as bactérias que não são fermentadoras de lactose tornam o meio amarelo claro.
Finalidade
Ágar MacConkey MBiolog é um meio seletivo para enterobactérias destinado à detecção, isolamento, contagem de coliformes e patógenos intestinais da água, laticínios e materiais biológicos.
Princípio de ação
Organismos que fermentam lactose, produzem pH localizado, o qual, seguido pela absorção do vermelho neutro contido no meio, confere uma coloração vermelha ou rósea à colônia, enquanto que colônias não fermentadoras de lactose permanecem incolores ou transparentes.
Amostra
Amostras biológicas, águas de esgotos e alimentos, suspeitos de conterem enterobactérias. As amostras devem ser colhidas seguindo cuidados específicos de forma a se obter representatividade do processo infeccioso, assepsia na coleta da amostra e sem interações medicamentosas. Não é aconselhado o armazenamento da amostra. Em casos extremos, em que não se pode realizar o inoculo imediato, a amostra deve ser conservada sob refrigeração.
Procedimento
 Inocular a amostra por estrias através de esgotamento da alça de platina. Obedecer os critérios internos do laboratório acerca das condições de assepsia e esterilidade do local de trabalho. Incubar a placa inoculada à 35 ± 2oC por 24 horas. Após incubação, observar as placas.
Interpretação
 Não havendo crescimento bacteriano, constata-se amostra isenta de bactérias. As bactérias fermentadoras de lactose produzem colônias vermelhas ou rosadas. Outros bastonetes Gram-negativos, como Pseudômonas sp. E Aeromonas sp. também apresentam crescimento, formando colônias cuja coloração varia de incolor até verde café. Bastonetes Gram-positivos têm seu crescimento inibido pelos sais biliares e pelo cristal violeta.
Aparência do meio
O meio se apresenta na cor rosa translúcido.
Apresentação
Meio de cultura pronto para uso em placa de petri.
Embalagem com 10 placas.
Ágar Sangue: De coloração vermelha escura e opaca, oferece excelentes condições de crescimento para a maioria dos microrganismos.
Ágar Salmonella-Shigella: Possui componentes que inibem microrganismos gram positivos. Permite selecionar e isolar espécies de Salmonella e Shigella em amostras de fezes, alimentos e água.
Ágar chocolate: Utilizado para o cultivo de microrganismos exigentes, embora cresçam neste meio quase todos os tipos de microrganismos. À base do meio, é adicionado sangue de cavalo, carneiro ou coelho em temperatura alta, o que faz com que as hemácias lisem, liberando hemina e hematina, compostos fundamentais para o crescimento dos microrganismos exigentes.
Finalidade
Ágar Chocolate Suplementado MBiolog é um meio de cultura pronto para uso, destinado ao isolamento e cultivo de diversos microrganismos, dentre eles os fastidiosos como Neisseria spp. e Haemophilus spp., microrganismos de difícil crescimento em meios simples.
 
Princípio de ação
Os suplementos contidos no poli enriquecimento fornecem todos os substratos necessários ao crescimento dos patógenos.
 
Amostra
Secreções coletadas de áreas genitais, como uretra e reto, e de outras áreas, tais como orofaringe, articulações, lesões cutâneas e líquidos corporais estéreis.
As amostras, quando não inoculadas imediatamente após a coleta, devem ser transportadas em meios como o de Ameis ou Stuart. O tempo de transporte deve ser o mais breve possível, não excedendo 12 horas, à temperatura ambiente, até 30ºC. Evitar a refrigeração da amostra. As amostras devem ser colhidas, seguindo cuidados específicos, de forma a se obter representatividade do processo infeccioso, assepsia na coleta da amostrae sem interações medicamentosas.
 
Procedimento
Inocular a amostra por estrias, através de esgotamento da alça de platina. Obedecer aos critérios internos do laboratório acerca das condições de assepsia e esterilidade do local de trabalho. Incubar a placa inoculada em atmosfera úmida, com 5 a 10% de CO2, a 35ºC, durante 24 a 72 horas. Após incubação, observar as placas.
 
Interpretação
Não havendo crescimento bacteriano, constata-se amostra isenta de bactérias patogênicas. Havendo crescimento, realizar, a partir de colônias suspeitas, coloração de Gram e proceder a testes complementares (provas bioquímicas, provas sorológicas, etc.).
 
Aparência do meio
O meio se apresenta na cor marrom chocolate.
 
Figura 1 ágara chocolate. Cultura tose
 
Figura 2 Cultura do AR, A base de Ágar de chocolate e Ágar de MacConkey
 
Conclusão
O crescimento dos microrganismos nos diferentes meios de cultura utilizados fornece as primeiras informações para a sua identificação. É importante conhecer o potencial de crescimento de cada meio de cultura e adequar ao perfil bacteriano esperado para cada material.
Referencias
VANESSA. Relatório de microbiologia. {Online}. Disponível na Internet via https://www.passeidireto.com/arquivo/1880776/relatorio-de-microbiologia. Arquivo capturado em 03 de jul. 2017
AYRES, Adriana Lopes. Meios de cultura de microrganismos. {Online}. Disponível na Internet via https://www.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/biologia/meios-de-cultura-de-microrganismos/57896. Arquivo capturado em 03 de jul. 2017
RAPHAELLA. Preparação de meios de cultura. {Online}. Disponível na Internet via https://www.passeidireto.com/arquivo/3230249/preparacao-de-meios-de-cultura. Arquivo capturado em 03 de jul. 2017
NICÉRO, Raphael Gonçalves. Conheça os principais meios de cultura. {Online}. Disponível na Internet via http://www.biomedicinabrasil.com/2010/09/meios-de-cultura.html. Arquivo capturado em 03 de jul. 2017
PROLAB. Quais são os tipos de meio de cultura. {Online}. Disponível na Internet via http://www.prolab.com.br/blog/quais-sao-os-tipos-de-meios-de-cultura/. Arquivo capturado em 03 de jul. 2017
KASVI. Meios de Cultura – Como diferenciar meio enriquecido, seletivo e diferencial. {Online}. Disponível na Internet via http://www.kasvi.com.br/meios-de-cultura-diferenca/. Arquivo capturado em 03 de jul. 2017