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Cultura de amostras de microrganismos comensal humano em meio de cultura sólido. Introdução Microbiota Comensal e Patogênica Os microorganismos que sempre estão em determinada região do nosso corpo, ali permanecem de forma comensal, ou seja, ambos estão sendo beneficiados. Possuem importante função de proteção e defesa do organismo na tentativa de colonização de patógenos, estimulação do sistema imune em recém-natos, além de auxiliar na absorção de nutrientes. O número de bactérias chega a ultrapassar em dez vezes o número de células do corpo humano. A flora de microorganismos dentro e sobre o corpo humano está submetida a constantes mudanças. Fatores como a idade, alimentação,higiene, regulação hormonal podem alterar o balanço desses microorganismos. A maioria das infecções humanas são causadas por patógenos oportunistas, ou seja, aqueles que tipicamente compõem a microbiota normal do paciente e passam a gerar processo patológico quando inseridos em sítios desprotegidos (ex: sangue e tecidos), como Escherichia coli e Candida albicans. Já os patógenos estritos são poucos e possuem como exemplo a Neisseria gonorrhoeae e o Mycobacterium turbeculosis. Existem dois tipos de microbiota: Microbiota residente: microorganismos que se encontram em grande quantidade em um determinada região anatômica, em uma dada população. Microbiota transitória: microorganismos aparecem em determinado local, que não o habitual, de maneira temporária, sendo eliminada por mecanismos naturais de defesa ou por ações de limpeza como anti-sépse. Caso a microbiota residente esteja intacta, a microbiota transitória não causa danos e é eliminada. Porém, se os microorganismos permanentes estiverem em desequilíbrio, a microbiota transitória pode provocar doenças. Microorganismos de dada região também podem se tornar patógenos se encontrados em outro local que não o habitual. Objetivo O objetivo dessa análise é determinar os tipos de microbiotas comensal de diferentes partes do corpo humano. Material Como toda análise é fundamental o uso de equipamentos. ➢ Equipamento individual de proteção (luvas, óculos de proteção, jaleco); ➢ Bico de Busen; ➢ Swabs ➢ Estufa bacteriológica ➢ Meios de cultura utilizados: Agar Sangue, Agar Manitol e Agar EMB. 1) Agar Sangue: Meio enriquecido e não seletivo , usando uma base rica, oferece ótimas condições de crescimento a maioria dos microorganismos.. A conservação dos eritrócitos íntegros favorecem a formação de halos de hemólise nítidos. 2) Agar Manitol: Meio seletivo e diferencial. O cloreto de sódio em alta concentração inibe parcial ou completamente outros micro-organismismos bacterianos. A degradação do manitol pela produção de ácido muda a cor do meio para amarelo. Utilizado para selecionar Staphylococci, que crescem em altas concentrações de sal; Diferencia Staphylococcus aureus de outros Staphylococci; Após o crescimento, Staphylococcus aureus é amarelo (fermenta o manitol), outros Staphylococci são brancos. 3) Agar EMB: Meio diferencial e seletivo. Possui uma combinação de eosina e azul de metileno como indicadores, promovendo uma diferenciação entre colônias de lactose positiva e negativa. Utilizado para o isolamento e diferenciação de bacilos entéricos gram-negativos (Enterobacteriaceae e outros bastonetes gram-negativos). Metodologia Foram coletadas através de swabs amostras de dois locais: 1° Fossas nasais e 2° Lingua , em seguida foi ligado o bico de Bunsen controlamos a chama até ficar azulada (cor ideal para iniciar a semeadura), depois de ter obtido o campo de 10 cm estéreo foi promovida a semeadura nas respectivas placas de culturas Agar Sangue; Agar Manitol e Agar EMB, após serem identificadas foram colocadas na estuda a 37°C por 48 horas. Resultado AMOSTRAS AGAR SANGUE AGAR MANITOL AGAR EMB Fossas Nasais Gama hemolítica ------- -------- Língua Beta hemolítica Staphifococcus Aureus Lactose neg Conclusão Lingua: A microbiota da cavidade oral é bastante grande e diversificada. Calcula-se que a saliva contém 108bactérias/ml. Participam da microbiota da cavidade oral numerosos gêneros, tais como Staphylococcus, Streptococcus, Neisseria, Bacteroides, Antinomyces , Treponema, Mycoplasma e outros. 1) No meio Agar Sangue foram observados padrões Alfa e Beta Hemolíticas. Alfa hemolítica onde são degradas parcialmente as hemácias, logo forma um halo de cor meio marrom. Beta hemolítica onde são totalmente degradadas as hemácias, formando um halo de cor amarelo. 2) No meio Agar Manitol foi observado a presença de staphifococcus aureus. Colonização comum nesse meio. 3) No meio Agar EMB o resultado foi negativo para lactose. Salmonella e Shigella são incolores ou têm uma cor âmbar transparente, não fermentam lactose. Escherichia coli poderão apresentar um reflexo verde metalizado característico, devido à rápida fermentação da lactose. Fossas Nasais: A microbiota da cavidade oral é grande e muito diversificada. Participam desta microbiota muitos gêneros, como Staphylococcus, Streptococcus, Neisseria, Bacteroides, Actinomyces, Treponema, Mycoplasma dentre outros. Nas fossas nasais predominam Staphylococcus e Corynebacterium. 1) No meio Agar Sangue não foi identificado nenhum microorganismo. Fato que não é comum nessa região do corpo. 2) No meio Agar Manitol não foi observado nenhum tipo de microorganismo. Fato não muito comum. 3) No meio Agar BEM o resultado também foi negativo. Resultado condizente com a região. Bibliografia Microbiologia Medica Patrick Murray- 6° edição.
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