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Qualidade e preferência alimentar Impacto da percepção refrescante sobre o humor, desempenho cognitivo e oscilações cerebrais: um estudo exploratório RESUMO O objetivo da presente pesquisa foi avaliar o efeito da percepção refrescante sobre a energia mental em termos de ativação cortical e desempenho cognitivo. A percepção refrescante foi induzida pelo consumo de um gelo de água com sabor cítrico otimizado com propriedades sensoriais específicas que levam ao resfriamento e sensações de molhar a boca. Os tratamentos de comparação eram gelos de água padrão que diferiam em intensidade refrescante, mas combinados com sabor e conteúdo de energia e um copo de água. Em um primeiro experimento, a atividade eletroencefalográfica dos participantes foi monitorada enquanto realizava uma tarefa de atenção sustentada. Em relação aos dois tratamentos de comparação, os resultados revelaram que o gelo de água otimizado melhorou a ativação cortical nos potenciais alfa e beta conhecidos por estar envolvidos em circuitos neurais de atenção, memória funcional e integração sensório-motor. Em um segundo experimento, os resultados revelaram melhor desempenho de atenção após o consumo do gelo de água otimizado em relação aos tratamentos de comparação. No total, nossos resultados fornecem evidências preliminares que suportam o impacto benéfico da percepção refrescante, refletida no aprimoramento da ativação cortical necessária para recrutar ótimos recursos para o desempenho da tarefa. 1. Introdução De acordo com pesquisas anteriores revisadas recentemente (Labbe et al., 2009a), propomos definir "refrescante" como referencia a uma percepção complexa semelhante à vivida durante o consumo de água gelada e correspondente ao alívio de sintomas físicos desagradáveis, como temperaturas elevadas do corpo ou secura da boca (Brunstrom, 2002; Phillips, Rolls, Ledingham e Morton, 1984). Foram identificadas propriedades sensoriais específicas de alimentos e bebidas a favor de uma percepção tão refrescante. Por exemplo, usando uma gama de géis de alimentos variando em suas composições (níveis de açúcar, ácido cítrico, resfriamento e sabor), o resfriamento apareceu como um direcionamento sensorial chave do refrescante (Labbe, Gilbert, Antille e Martin, 2009b). A importância da percepção do frio na experiência refrescante é corroborada por outros dados que mostram que a água a 5 ° C é percebida como mais queima de água do que a água quente a 22 ° C (Brunstrom e MacRae, 1997). Conforme sugerido, esta superioridade das estimulações a frio na boca pode ser devida a mudanças internas da temperatura e do fluxo de saliva em favor da percepção da sensação de sede (Brunstrom, MacRae, Roberts, 1997; Brunstrom, Tribbeck e MacRae, 2000, Sandick, Engell, & Maller, 1984). A Sourness é outra característica sensorial identificada como um motorista de refrescos em géis de alimentos (Labbe et al., 2009a) e de sedimentação em bebidas (McEwan & Colwill, 1996). Sour tastants adiciona um valor refrescante aos produtos alimentares, provavelmente porque aumentam a experiência de extinção de soja estimulando o fluxo de saliva. Os estímulos olfativos associados a frutas cítricas, como o limão ou a laranja, parecem estar associados a uma intensidade refrescante através de um possível ecossistema de aprendizagem associativa perceptual (Zellner & Durlach, 2002). Em conjunto, esses estudos sensoriais sugerem que ingredientes com propriedades refrigerantes / frias e azedas em alimentos ou bebidas podem melhorar o molhamento da boca, intensidade de secura na boca e, portanto, percepção refrescante. A idéia de que alimentos ou bebidas podem influenciar de forma confiável o desempenho cognitivo recebeu grande atenção ao longo da última década e o conceito de "alimentos funcionais" foi amplamente examinado (para revisões, veja Dye, Lluch & Blundell, 2000; Messier, 2004). Além da energia fornecida por macronutrientes, outros fatores podem influenciar a cognição, como o estímulo refrescante induzido pela secura da boca. O impacto do consumo de água em alguns aspectos da cognição e do humor já foi investigado com relação à sede (Neave et al., 2001; Rogers, Kainth, & Smit, 2001). O impacto do consumo de água em alguns aspectos da cognição e do humor já foi investigado com relação à sede (Neave et al., 2001; Rogers, Kainth, & Smit, 2001). No estudo de Rogers et al. (2001), 60 participantes foram distribuídos aleatoriamente para um dos seguintes tratamentos: não-bebida, 120 ml de água (10 C), 330 ml de água (10 C). Eles foram divididos, posteriormente, em grupos de sede baixa e alta de acordo com classificações de sede de pré-tratamento. Em comparação com a condição de não-bebida, o consumo de água induziu imediatamente (2 min após o tratamento), mas não sustentado, sensações subjetivas de "alerta" e "revitalizado", tanto nos participantes de baixa e alta sede. Em contraste, o efeito do consumo de água em desempenhos de atenção sustentada e memória de trabalho, conforme medido com uma tarefa de processamento rápido de informações visuais de 6 min (RVIP), dependia do nível anterior de sede. O consumo de água aumentou as taxas de acerto quando a sede era alta e diminuiu quando a sede era baixa. Estas alterações foram observadas 25 e 50 minutos após o tratamento e ocorreram de forma dependente da dose. Neave et al. (2001) conduziu uma experiência similar para verificar os benefícios de beber água sobre a energia mental em participantes de alta sede. A sede foi induzida por um procedimento de restrição alimentar e bebedoura de 11 h (durante a noite). Além de uma tarefa RVIP de 3 minutos e um questionário de humor, os autores usaram uma série de tarefas cognitivas que medem outros aspectos da memória e da atenção. Vinte e quatro participantes participaram de um estudo de cruzamento randomizado e equilibrado empregando uma água (150 ml a 10 ° C) e uma condição de não-bebida. De acordo com as descobertas anteriores de Rogers et al. (2001), o consumo de água melhorou o estado de alerta subjetivo imediato em comparação com a condição de não-bebida. No entanto, os desempenhos cognitivos não foram afetados positivamente nem negativamente pelo consumo de água em participantes com alto estado de sede. Diferenças substanciais na metodologia (por exemplo, níveis de sede e fome dos participantes, paradigma experimental e procedimento de restrição) entre os dois estudos podem explicar esta controvérsia nos achados. No entanto, continua a ser difícil concluir sobre o efeito potencial da percepção refrescante induzida pelo consumo de água na energia mental, medido com classificações de humor e tarefas cognitivas de atenção e memória Além do desempenho cognitivo e do estado de humor, as mudanças na ativação cerebral foram relatadas após refrescamentos estimulantes orais. O efeito da saturação da sede no estado do cérebro durante a baixa carga cognitiva (contagem mental) foi investigado com eletroencefalografia (EEG) em indivíduos com privação de água e seden após o consumo de 400 ml de água (Hallschmid, Molle, Fischer e Born , 2002). Os resultados revelaram um aumento da atividade oscilatória cerebral na banda alfa inferior (8-10 Hz) somente em indivíduos privados de água, em comparação com as medidas iniciais obtidas antes de beber. Com base nisso, os autores propuseram o aprimoramento de oscilações neuronais de 8-10 Hz como um marcador eletrofisiológico de extinção de sede, visto como uma resposta de recompensa em relação a motivação. Alterações semelhantes no estado funcional do cérebro em repouso foram relatadas nas bandas alfa (8-12 Hz) e beta (13-30 Hz) após o consumo de produtos de confeitaria com propriedades refrescantes (Morinushi,Masumoto, Kawasaki e Takigawa, 2000) . Estas alterações foram obtidas após a mastigação de uma goma aromatizada; Os principais constituintes dos quais foram óleos aromáticos com propriedades de resfriamento (hortelã) e azedo (bálsamo de limão). Ao longo dos últimos anos, tornou-se claro que as oscilações geradas no cérebro são cruciais para os processos cognitivos (para revisões explícitas, ver Klimesch, 1999; Tallon-Baudry, 2003; Ward, 2003). Por exemplo, a ativação cortical no intervalo alfa aparece mais intimamente associada aos processos de atenção; e ativação cortical na faixa theta (4-8 Hz) com a memória. Oscilações mais rápidas, como as da faixa beta, parecem contribuir para a coordenação do motor sensorial durante o processamento da informação. A partir destes, o aumento das oscilações corticais mantidas após a água (Hallschmid et al., 2002) e o consumo de goma de mascar (Morinushi et al., 2000) podem refletir uma melhora dos recursos fisiológicos para um ótimo desempenho das tarefas. No entanto, na ausência de avaliação cognitiva, as mudanças na atividade oscilatória cerebral devem ser interpretadas com cautela. O presente estudo é uma primeira tentativa de explorar a relação entre percepção refrescante e energia mental através do desempenho cognitivo, atividade cerebral e medidas do humor. Replicamos parcialmente o experimento de Rogers et al. (2001) e medições incorporadas de oscilações cerebrais e classificação de humor. Os benefícios de um gelo da água com propriedades sensoriais otimizadas para a percepção refrescante foram investigados em comparação com um copo de água doce e um gelo de água padrão combinado com temperatura e sabor com o tratamento otimizado. Nós hipotetizamos que a percepção refrescante não era apenas o resultado de benefícios fisiológicos conseqüentes ao consumo ou à bebida, como a saturação da sede, mas também o resultado de benefícios induzidos pela energia mental (para uma revisão sobre os fatores psicofisiológicos envolvidos na fundação da percepção refrescante, veja Labbe et al., 2009a). Em particular, antecipamos que as propriedades sensoriais anteriormente identificadas como impulsionadores da percepção refrescante (McEwan & Colwill, 1996; Labbe et al., 2009a) aumentariam as oscilações cerebrais alfa e beta, como observado em estudos anteriores de EEG (Hallschmid et al., 2002; Morinushi et al., 2000). Nós hipotetizamos que essas mudanças na ativação do cérebro levariam a uma melhoria no desempenho das tarefas, uma vez que as oscilações alfa e beta estiveram envolvidas em alguns dos processos cognitivos necessários para realizar a tarefa rápida de processamento de informação visual (RVIP), como atenção sustentada e memória de trabalho (Besserve et al., 2008; Dockree, Kelly, Foxe, Reilly & Robertson, 2007; Gross et al., 2004; Klimesch, Doppelmayr, Russegger, Pachinger e Schwaiger, 1998; Tallon-Baudry, 2003). Finalmente, o impacto da percepção refrescante sobre a energia mental foi explorado ao longo do tempo (imediatamente e 15 minutos após o consumo), pois estudos anteriores relataram as propriedades duradouras perceptivas dos fatores sensoriais da percepção refrescante, como a frieza (Gwartney & Heymann, 1995; Westerink & Kozlov, 2004). 2. Experimento 1 2.1. Métodos 2.1.1. Participantes Para este primeiro experimento exploratório, foram selecionados seis voluntários destros saudáveis entre 18 e 35 anos entre os funcionários do Centro de Pesquisa Nestlé (Lausanne, Suíça). Eles eram saudáveis conforme determinado por um questionário médico e tinham um índice de massa corporal (IMC) na faixa de 18-30. Os critérios de exclusão incluíram distúrbios alimentares, diabetes, doenças neurológicas, história de traumatismo craniano, patologia do nariz ou infecção do trato olfativo superior. Todos os participantes deram o seu consentimento por escrito e foram pagos pela participação. O experimento aqui descrito foi conduzido de acordo com a Declaração de Helsínquia e foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa Clínica de Medicina e Faculdade de Biologia (Universidade de Lausanne, Suíça). 2.1.2. Tratamento e projeto Um projeto de cruzamento aleatório, equilibrado e de três tratamentos foi empregado para explorar o efeito do tratamento na energia mental. Os participantes receberam 70 g de um gelo de água otimizado servido em 17 C, 70 g de um gelo de água padrão servido em 17 C ou um copo de 70 ml de água servido a 7 ° C. Os gelados de água padrão e otimizado foram baseados em uma receita de água de sacarose com sabor cítrico. Um agente de arrefecimento e ácido cítrico foram ingredientes adicionados ao gelo de água otimizado para refresco em proporção de 1: 6. Selecionamos o agente de resfriamento à base de carboxamida mentan (WS-3, Givaudan, Dubendörf), uma vez que não afeta o olfato na concentração utilizada. Este agente de arrefecimento é comumente usado em receitas de muitos produtos comerciais de cuidados bucais e de confeitaria (Furrer et al., 2008). Os dois gelados de água foram combinados com sabor e conteúdo energético (266 kcal). O valor refrescante do gelo de água otimizado foi previamente validado por um estudo de consumo realizado com 160 participantes franceses. O produto otimizado foi julgado significativamente mais refrescante em intensidade do que o padrão de gelo de água usando escalas de classificação de 10 pontos de "não atualizadas" para "extremamente refrescantes". O copo de água foi escolhido como um tratamento de comparação devido ao seu valor refrescante para os consumidores (Zellner & Durlach, 2002), propriedades de extinção de soja (Brunstrom & MacRae, 1997) e efeitos previamente relatados na energia mental (Hallschmid et al., 2002 Rogers et al., 2001). Assumimos que os ingredientes otimizados apresentariam efeitos maiores do que a água a 7 ° C. O uso do gelo de água padrão como um tratamento de comparação suplementar foi justificado com base no pressuposto de que tal tratamento explicaria quaisquer efeitos comuns devido à ingestão de energia ou outros estímulos sensoriais (incluindo gosto, cheiro, temperatura e textura) e, portanto, isolar especificamente os efeitos relacionados à atualização. 2.1.3. Procedimento Os participantes completaram três sessões de teste separadas a partir das 11:00 da manhã, bem como uma sessão de prática anterior para se familiarizarem com a tarefa cognitiva e as classificações subjetivas a serem concluídas durante o estudo. Eles foram informados para abster-se de beber álcool durante 12 horas (durante a noite) antes das sessões de teste e chegar ao laboratório EEG às 7:30 da manhã para obter um café da manhã padronizado. Os participantes foram informados de que não devem beber ou comer até a sessão de teste começar às 11:00 da manhã. Durante uma sessão de teste, os participantes completaram o questionário de humor e a tarefa cognitiva nesta ordem antes do tratamento (pré), imediatamente após o tratamento (Post1) e 15 minutos após o tratamento (Post2). Após a conclusão das avaliações pré-tratamento, foram alocados 5 min para consumir o tratamento. Os participantes completaram as sessões de prática e teste individualmente enquanto se sentavam confortavelmente na frente de uma tela de computador 1700, em uma sala mal iluminada, protegida por som e eletricamente. 2.1.4. Gravação e redução de dados EEG A atividade de EEG contínua foi adquirida através de um sistema Biosemi Active Two (Biosemi, Amsterdã, Netherlands), enquanto os participantes realizaram uma tarefa cognitiva. O EEG foi gravado a partir de 16 eletrodos ativos do couro cabeludo anexados a um headcap e referenciados ao solo CMS-DRL (que funciona como um circuito de feedback conduzindo o potencialmédio em toda a montagem o mais próximo possível do zero do amplificador). As gravações foram amostradas em 256 Hz com configurações de filtro de alta e baixa passagem de 0,33 e 128 Hz, respectivamente. As épocas EEG de 1000 ms foram computadas usando o software CarTool (http://brainmapping.unige.ch/Cartool.htm). A primeira EEG-epoch começou aleatoriamente 500- 1500 ms após a apresentação do primeiro início do estímulo; e a última EEG-epoca começou antes da apresentação do último estímulo iniciado. Além da aplicação de um critério de artefato automatizado de ± 100 lV, a inspeção visual de dados de EEG foi realizada para excluir épocas que contenham artefatos devido a movimentos faciais ou outras fontes de ruído transitório. As épocas de pré-tratamento foram utilizadas como medições de linha de base, a fim de isolar as mudanças de ativação específicas da tarefa induzidas pelos tratamentos (Barry, Clarke, Johnstone, Magee e Rushby, 2007; VaezMousavi, Barry, Rushby e Clarke, 2007). As épocas sem artefatos foram submetidas a uma rápida transformação de Fourier usando uma janela 100% Hanning. A amplitude de potência média foi calculada para quatro bandas de freqüência separadas (delta: 1-3 Hz, theta: 4- 7 Hz, alfa: 8-12 Hz e beta: 13-30 Hz) para cada tratamento (Otimizado, Padrão e Água ), participante, período de teste (Pre, Post1 e Post2) e região do couro cabeludo (frontal: eletrodos F3, Fz, F4, central: eletrodos C3, Cz, C4, parietal: eletrodos P3, Pz, P4 e occipital: eletrodos O1 Oz, O2). Os quatro eletrodos restantes foram colocados nas posições frontopolar (Fp1 e Fp2) e temporais (T7 e T8) onde geralmente uma grande quantidade de artefato facial é gravada. Eles não foram incluídos nas análises por este último motivo. 2.1.5. Tarefa cognitiva Os desempenhos de atenção sustentada foram medidos usando uma versão difícil da tarefa de processamento rápido de informações visuais (RVIP) que exige memória de trabalho para conclusão. Os dígitos únicos de amarelo (1-9) foram apresentados em rápida sucessão (100 dígitos / min) em uma ordem pseudo-aleatória em um fundo preto durante 6 minutos (via pacote de software E- Prime, E-Prime 1.1, Psychology Software Tools, Summit Software Company). Cerca de 48 sequências alvo de três números ímpares ou pares tiveram que ser detectadas com um botão pressionado com a maior rapidez e precisão possível. As medidas de resultado para cada teste foram o número de batidas e o tempo médio de reação para a detecção correta de alvo. 2.1.6. Classificação de humor O humor foi avaliado usando as escalas analógicas visuais Bond e Lader padronizadas (Bond & Lader, 1974), consistindo de 16 escalas bipolares de 100 mm ancoradas em cada extremidade por antonimos (por exemplo, alerta sonolento, excitante de calma) de acordo com três dimensões de humor : "alerta" (nove itens), "contente" (cinco itens) e "calma" (dois itens). As pontuações para cada dimensão foram o número médio de milímetros (máximo 100) das escalas individuais que contribuem para a dimensão. 2.2. análise estatística O EEG, a tarefa cognitiva e os dados de pré-tratamento de classificação de humor foram considerados como medidas de linha de base e utilizados como covariáveis nos modelos. A principal vantagem desta abordagem é a eliminação da variância entre os indivíduos no poder EEG, desempenho e níveis de humor. Essas análises enfocaram a correspondência entre as mudanças subjetivas do estado subjetivo e as mudanças nos parametros de espectro EEG, não em termos de humor ou desempenho bruto e dados EEG. O poder médio de EEG foi submetido a análises de covariância usando um modelo misto com medidas repetidas para cada faixa de freqüência (delta, theta, alfa e beta). Os fatores "tratamento" (Otimizado, Padrão e Água), "topografia" (Frontal, Central, Parietal e Occipital) e 'período' (Post1 e Post2) foram definidos como fixos e o sujeito do fator foi definido como aleatório. Da mesma forma, os desempenhos cognitivos foram submetidos a análises de covariância usando um modelo misto com medidas repetidas para cada medida de resultado da tarefa RVIP (número de hits, tempos de reação). Os fatores "tratamento" (Otimizado, Padrão e Água) e "período" (Post1 e Post2) foram definidos como fixos, e o sujeito do fator foi definido como aleatório. As classificações de humor foram submetidas a análises de covariância usando um modelo misto com medidas repetidas para cada dimensão de humor (alerta, calma e contente). Os fatores "tratamento" (Otimizado, Padrão e Água) e "período" (Post1 e Post2) foram definidos como fixos, e o sujeito do fator foi definido como aleatório. Todos os cálculos foram realizados com o software NCSS versão 2007 (Number Cruncher Statistical Systems, Karysville, Utah, EUA). As comparações de par post hoc foram avaliadas por testes t de Student. O nível dse confiança foi estabelecido para 95% para todas as análises. 2.3. Resultados 2.3.1. Dados EEG Os resultados das análises estatísticas realizadas nos dados EEG do Experimento 1 em função do tratamento, topografia e período para cada banda de freqüência são apresentados na Tabela 1. A Fig. 1 ilustra a atividade oscilatória em cada faixa de freqüência em função do tratamento e do período. O tratamento fatorial teve um impacto significativo apenas no poder beta (Tabela 1). As comparações em pares revelaram que esse efeito se deveu a uma maior potência beta na condição otimizada durante Post2, em comparação com as condições padrão e de água durante Post2 e com as três condições durante Post1 (Fig. 1D). Um período significativo de efeito e tratamento? A interação do período foi obtida no poder alfa (ver Tabela 1). O poder alfa foi geralmente maior durante Post2 do que Post1 e o tratamento? a interação do período foi causada pela condição otimizada que foi associada com maior potência alfa durante Post2, em comparação com as outras duas condições durante Post2 e todas as condições durante Post1 de acordo com as comparações em pares (Fig. 1C). Por fim, a potência alfa na condição de água foi significativamente maior do que nas condições otimizadas e padrão durante Post1. Não foi identificada alteração de atividade oscilatória significativa nas bandas de freqüência delta e theta (Fig. 1A e B). A topografia do fator teve um efeito significativo na atividade oscilatória nas energias delta, theta e alfa (Tabela 1). A distribuição da potência de EEG para cada banda de frequência é dada na Fig. 2 como uma função da topografia e, para valor ilustrativo, em função dos três períodos de tempo. As comparações em pares devido à topografia do fator revelaram que o poder delta foi significativamente maior no occipital do que nas outras regiões do couro cabeludo para todos os períodos (Fig. 2A). O poder de Theta foi significativamente maior nas regiões frontal e occipital do que nas regiões do couro cabeludo central e parietal (Fig. 2B). A energia alfa foi significativamente maior no occipital do que nas outras regiões do couro cabeludo (Fig. 2C). Um período significativo X A interacção topográfica foi observada nesta banda de frequência alfa (Tabela 1). As comparações em pares revelaram que essa interação se deveu a maior potência alfa durante Post2 do que Post1 nas regiões frontal, parietal e occipital. 2.3.2. Desempenho cognitivo As análises estatísticas não revelaram nenhum efeito significativo do tratamento dos fatores e o período para o número de êxitos (F (2,24) = 0,3; p = 0,7; ns; e F (1,24) = 1,2; p = 0,3; ns, respectivamente) e tempos de reação (F (2,24) = 0,1; p = 0,9; ns; e F (1,24) = 0,2, p = 0,6; ns, respectivamente).As interações entre os dois fatores não foram significativas para ambas as medidasde êxitos e tempos de reação (F (2,24) = 1,56; p = 0,2; ns; e F (2,24) = 1,0; p = 0,4; ns; respectivamente). 2.3.3. Classificação de humor A prevalência foi afetada pelo período de fator (F (1,24) = 5,91; p = 0,05) devido a uma diminuição progressiva das classificações de Post1 (média = 74,2 ± 1,9) para Post2 (média = 67,6 ± 1,9). Nenhum efeito significativo do tratamento ou interações entre os dois fatores foram observados nas classificações de alerta (F (2,24) = 0,9, p = 0,4, n.s., F (2,24) = 0,1; p = 0,9; n.s., Respectivamente). As classificações de calma e contente não foram afetadas pelo tratamento dos fatores (F (2,24) = 0,0; p = 0,9; ns; e F (2,24) = 0,4; p = 0,7; ns; respectivamente) e período (F (2,24) = 0,03, p = 0,86; ns e F (2,24) = 0,08; p = 0,79; ns; respectivamente) nem por qualquer interação entre os dois fatores (F (2,24) = 1,9; p = 0,2; ns; e F (2,24) = 0,6; p = 0,5; ns, respectivamente). 3. Experimento 2 Na Experiência 1, com uma amostra de seis participantes, podemos estabelecer um efeito do gelo de água otimizado na atividade cerebral oscilatória nas faixas de freqüência alfa e beta durante o pós2, mas nenhum efeito foi observado nos níveis de desempenho e humor. A fim de investigar ainda mais se essas mudanças no EEG poderiam ser associadas ao ótimo desempenho da tarefa, repetimos uma versão simplificada do protocolo desenvolvido no Experimento 1 usando um número maior de participantes, como estatisticamente definido com base nos resultados da tarefa cognitiva da Experiência 1. 3.1. Métodos 3.1.1. Participantes Cerca de 18 participantes foram selecionados utilizando critérios inclusivos e exclusivos semelhantes aos aplicados na Experiência 1. O experimento foi conduzido de acordo com a Declaração de Helsinque e foi aprovado pelo Comitê de Ética para Pesquisa Clínica de Medicina e Faculdade de Biologia (Universidade de Lausanne, Suíça) . O número de sujeitos foi calculado com base em um desvio padrão intra-individual na Experiência 1 de 8.3 para o número de sucessos. Ao considerar: (1) erro tipo I igual a 5% e potência igual a 80%; (2) uma diferença de número de sucesso clinicamente relevante entre produtos iguais a 8; e (3) um desvio padrão da diferença igual a 12 (p2, 8,3), é necessário um número mínimo de 18 assuntos. 3.1.2. Tratamento e projeto Utilizou-se um design de cruzamento randomizado, equilibrado e de três tratamentos, que compreende otimizar o gelo da água, um gelo de água padrão e um copo de água conforme descrito na Seção 2.1.2. 3.1.3. Procedimento Os participantes completaram três sessões de teste separadas a partir das 11:00 da manhã, bem como uma sessão de treino anterior. Eles foram informados para se abster de beber álcool durante 12 horas (durante a noite) antes das sessões de teste e chegar ao laboratório às 7:30 da manhã para obter um café da manhã padronizado. Os participantes foram informados de que não devem beber ou comer até a sessão de teste começar às 11:00 da manhã. Durante uma sessão de teste, os participantes completaram o questionário de humor e a tarefa cognitiva nesta ordem antes do tratamento (pré), imediatamente após o tratamento (Post1) e 15 minutos após o tratamento (Post2). Após a conclusão das avaliações pré-tratamento, foram alocados 5 min para consumir o tratamento. 3.1.4. Tarefa cognitiva e classificações de humor Os desempenhos de atenção e humor sustentados foram medidos usando a tarefa RVIP e as escalas Bond e Lader (1974), respectivamente, conforme descrito para a Experiência 1. 3.2. análise estatística Os desempenhos cognitivos foram submetidos a análises de covariância usando um modelo misto com medidas repetidas para cada medida de resultado da tarefa RVIP (número de êxitos e tempos de reação). Os fatores "tratamento" (Otimizado, Padrão e Água) e "período" (Post1 e Post2) foram definidos como fixos, e o sujeito do fator foi definido como aleatório. As classificações de humor foram submetidas a análises de covariância usando um modelo misto com medidas repetidas para cada dimensão de humor (alerta, calma e contente). Os fatores "tratamento" (Otimizado, Padrão e Água) e "período" (Post1 e Post2) foram definidos como fixos, e o sujeito do fator foi definido como aleatório. Todos os cálculos foram realizados com o software NCSS versão 2007 (Number Cruncher Statistical Systems, Karysville, Utah, EUA). As comparações de par post hoc foram avaliadas por testes t de Student. O nível de confiança foi estabelecido para 95% para todas as análises. 3.3. Resultados 3.3.1. Tarefa cognitiva Os desempenhos da tarefa RVIP e os tempos de reação obtidos no Experimento 2 são ilustrados na Fig. 3. O tratamento e o período dos fatores exibiram um efeito significativo no número de êxitos (F (2,84) = 3,37; p = 0,04; e F ( 1,84) = 11,14; p <0,01; respectivamente). As comparações de Pairwise revelaram que o número de êxitos aumentou durante Post2 em comparação com Post1. Além disso, o número de êxitos marcados durante o Post2 foi significativamente maior na condição Otimizada em comparação com a condição da Água durante o Post2 e com todas as condições durante o Post1. Para os tempos de reação, observou-se uma tendência para o tratamento fatorial (F (2,84) = 2,0; p = 0,1; ns) sem efeito do período do fator (F (1,84) = 0,96; p = 0,33; ns). Essa tendência pode ser explicada por tempos de reação mais curtos na condição otimizada em comparação com as condições padrão e de água durante o Post1 e Post2. Não foi observada interação significativa entre os dois fatores para ambas as medidas de hits e tempos de reação (F (2,84) = 0,63, p = 0,53; ns e F (1,84) = 0,28; p = 0,75; ns; respectivamente ). 3.3.2. Classificação de humor As classificações de alerta foram impactadas por ambos os fatores: tratamento (F (2,84) = 20,7; p <0,01) e período (F (1,84) = 24,5; p <0,01). Como no Experimento 1, os índices de alerta de gravidade diminuíram progressivamente de Post1 (média = 70,2 ± 0,9) para Post2 (média = 63,6 ± 0,9). O efeito do tratamento fatorial se deveu a pontuações significativamente menores na condição de água durante Post1 e Post2, em comparação com as condições otimizadas e padrão. A calma foi significativamente impactada pelo tratamento dos fatores (F (2,84) = 4,9; p <0,01), mas não pelo tratamento do período (F (2,84) = 1,7; n.s.). Este efeito deveu-se a classificações de calma significativamente mais altas na condição de água durante Post1 e Post2, em comparação com as condições otimizadas e padrão. A satisfação foi afetada pelo tratamento fatorial (F (2,84) = 5,6; p <0,01), mas não pelo período do fator (F (2,84) = 2,5; ns) nem por uma interação entre esses dois fatores (F ( 2,84) = 0,2; ns). As classificações de satisfação foram significativamente maiores nas condições otimizadas e padrão do que na condição da água. 4. Discussão geral 4.1. Aumento da atividade oscilatória cerebral No Experimento 1, os efeitos benéficos do gelo da água otimizado para a percepção refrescante foram examinados nas oscilações cerebrais durante a conclusão de uma tarefa RVIP de 6 minutos imediatamente (Post1) e 15 minutos após a ingestão (Post2). Os tratamentos de comparação eram um gelo de água padrão combinado com sabor e conteúdo de energia e um copo de água doce. O poder de EEG em duas bandas de freqüência (alfa e beta) foi significativamente afetado pela condição de tratamento. As mudanças oscilatórias na energia alfa foram as mais proeminentes e foram afetadas por uma interação entre o tratamento e os fatores do período (Fig. 1C). São dignas de nota três mudanças principais nas oscilações alfa. Primeiro, durante o Post1, o poder de EEG na potência alfa foi aumentado nacondição da água, em comparação com os dois gelos de água. Essa descoberta é paralela à de um estudo prévio sobre o EEG e a saturação da sede relatando um aumento geral do poder EEG no intervalo alfa imediatamente após o consumo durante um período de 7 minutos (Hallschmid et al., 2002). Em segundo lugar, enquanto a energia alfa permaneceu inalterada com o tempo na condição da água, a atividade oscilatória nesta faixa de freqüência mostrou um grande aumento nas duas condições de gelo da água de Post1 a Post2. As mudanças no poder de EEG após o consumo de alimentos foram relatadas anteriormente, principalmente em termos de aumento de alfa e diminuição da atividade delta durante o repouso (Hoffman & Polich, 1998; Wang, Szabo e Dykman, 2004). Tais mudanças foram vistas como um efeito geral da excitação devido à ingestão de nutrientes. Nossa descoberta mostrou que a atividade oscilatória no poder alfa foi aprimorado no Post2 nas duas condições de gelo da água em comparação com o copo de água também pode refletir um efeito da ingestão de nutrientes e, em particular, de carboidratos. Em terceiro lugar, o aprimoramento do poder alfa durante o Post2 foi significativamente maior na condição otimizada do que o padrão, sugerindo um impacto superior das propriedades sensoriais otimizadas para a percepção de atualização. Alterações oscilatórias semelhantes obtidas na faixa de freqüência beta (Fig. 1D) reforçam essa suposição de um impacto superior da percepção refrescante durante Post2. 4.2. Possíveis mecanismos subjacentes às mudanças na ativação cortical induzidas pela percepção refrescante. As sensações de resfriamento são mediadas por receptores específicos encontrados em neurônios de detecção de frio trigeminais amplamente distribuídos sobre a língua, garganta e cavidade nasal (Patapoutian, Peier, Story e Viswanath, 2003). Estes receptores são ativados tanto por temperaturas frias quanto por agentes refrigerantes. As suas contribuições para a tentação e o consequente impacto sobre a excitação foram destacadas em artigos de revisão (Eccles, 2000; Labbe et al., 2009a). Eccles (2000) sugeriu que a ativação do sistema trigeminal através de uma combinação de estímulos frios e refrigerantes desencadeia mecanismos cerebrais específicos que levam a um aumento do nível de ativação excitante e cortical. Um recente estudo funcional de neuroimagem em humanos revelou ativação em uma grande rede de áreas cerebrais em resposta a estímulos térmicos orais (Guest et al., 2007). Esta rede inclui os cortises somatossensoriais primários, partes do córtex do gosto primário, o córtex premotor, o córtex operatório fronto-parietal e o córtex orbito-frontal. O pressuposto de que as estimulações do trigêmeo induzindo sensações de resfriamento / resfriamento podem melhorar a energia mental é corroborada por outros estudos usando compostos refrigerantes voláteis de mentol a partir de óleo de hortelã-pimenta que ativa os receptores nasais de detecção de frio. O olor da hortelã-pimenta foi encontrado para reduzir a sensação de sonolência (Norrish & Dwyer, 2005), para aumentar o estado de alerta subjetivo (Moss, Hewitt, Moss e Wesnes, 2008) e aumentar os desempenhos em uma variedade de tarefas cognitivas (Barker et al ., 2003; Ho & Spence, 2005; McBride, Johnson, Merullo & Bartow, 2004; Moss et al., 2008). É interessante notar que as propriedades olfativas de outros odorantes podem não induzir qualquer benefício em energia mental, como por exemplo ylang-ylang (Moss et al., 2008), ou podem desencadear efeitos relaxantes opostos, como a lavanda (Moss , Cook, Wesnes e Duckett, 2003). Os compostos de gosto amargo ativam células de gosto específicas localizadas na língua e expressam os receptores de detecção de prótons responsáveis pela percepção aguda. De todas as qualidades do sabor, o sabor amargo induz a secreção do maior volume de saliva por glândulas salivares (Hodson & Linden, 2006). O aumento da taxa de fluxo de saliva e da concentração de cortisol salivar foi observado em resposta ao estresse mental induzido pela atividade cognitiva (Bakke et al., 2004). A exposição aguda ao estresse, como a provocada por uma demanda ou desafio cognitivo, pode atuar como facilitador do humor e facilitador cognitivo (Duncko, Cornwell, Cui, Merikangas e Grillon, 2007, Sandi & Pinelo-Nava, 2007). No entanto, a ligação entre as mudanças na taxa de fluxo de saliva e a liberação de hormônios do estresse, como cortisol ou adrenalina, permanece inexplorada. Em contrapartida, a saliva tem múltiplas funções essenciais bem conhecidas em relação à sensação bucal (lubrificação) e ao processo digestivo, incluindo as chamadas "respostas de fase cefálica" (Mattes, 2000). Acredita-se que essas respostas fisiológicas estimulam o corpo a absorver e usar nutrientes ingeridos melhor. Eles coincidem com um rápido aumento da insulina, promovendo a absorção de glicose para células metabólicas ativas. Essa facilitação da disponibilidade de glicose induzida por processos digestivos pode ser melhorada por estimulação ácida, possivelmente contribuindo para o impacto superior do gelo de água otimizado sobre a ativação cortical sobre o gelo de água padrão. A possível ligação entre a estimulação ácida e a ativação do cérebro permanece puramente teórica, já que o impacto da acidez na energia mental nunca foi investigado. Pesquisas adicionais são necessárias para responder a esta pergunta. Tomados em conjunto, nossos achados de EEG sugerem que, além de carboidratos ou outros nutrientes, o consumo de alimentos com propriedades refrescantes pode aumentar as oscilações cerebrais durante a carga de trabalho cognitiva em bandas de freqüência conhecidas como envolvidas em processos cognitivos. A ativação de redes neurais específicas em resposta à estimulação trigeminal, juntamente com uma liberação hormonal hipotética ou facilitação da disponibilidade de glicose por estimulação ácida, provavelmente aumentará a energia mental. 4.3. Significado comportamental das oscilações cerebrais aumentadas durante o desempenho da tarefa O sucesso na detecção de alvos na tarefa RVIP é criticamente dependente dos recursos atencionais e na manutenção bem sucedida da representação neuronal dos estímulos previamente apresentados, até três dígitos, na memória de curto prazo. Numerosos estudos investigaram o significado funcional das oscilações alfa em relação aos processos cognitivos. Considerando que as oscilações alfa geralmente aumentam durante o relaxamento ou quando os sujeitos estão em um estado passivo, pesquisas recentes descrevem essas oscilações como componentes-chave de vigilância, processos seletivos de atenção e comportamento orientado por objetivos (Dockree et al., 2007; Jensen, Gelfand, Kounios, Lisman, 2002; Klimesch et al., 1998; Palva & Palva, 2007). Usando uma tarefa visual de desempenho contínuo de atenção e memória, Klimesch et al. (1998) descobriram que as oscilações alfa, e em particular nas regiões centrais posteriores e bilaterais, desempenham um papel crucial nos circuitos neurais responsáveis pela memória funcional. No presente estudo, as oscilações alfa foram mais proeminentes sobre a região occipital, enquanto os participantes realizaram a tarefa RVIP, mas a condição de tratamento não mostrou diferenças na topografia. Além de um envolvimento claro nos processos cognitivos, o poder das oscilações cerebrais em bandas alfa e beta tem sido identificado como valiosas medidas preditivas de desempenho durante tarefas de atenção visual sustentada (Besserve et al., 2008; Dockree et al., 2007) . A atividade oscilatória nas gamas de freqüência beta ou superior parece desempenhar um papel importante na organização funcional da atividadeneuronal subjacente à percepção visual, atenção e memória funcional (Gross et al., 2004; Tallon-Baudry, 2003). A possibilidade de prever o desempenho com base na atividade oscilante de EEG é ainda suportada por outros dados que mostram que as oscilações abaixo de 20 Hz, especialmente aquelas que atingem um pico entre 7-12 e 16-20 Hz, estão positivamente correlacionadas com performances de condução (Liang et al., 2005) . A partir desses dados EEG, as oscilações alfa e beta podem representar um aumento da sincronia antero-posterior com melhor desempenho, possivelmente refletindo a ativação de uma rede neural envolvida no controle da atenção visual. No Experimento 1, embora tenham sido observados efeitos claros do tratamento sobre a ativação cortical nos seis participantes envolvidos, nenhum efeito foi observado no desempenho da tarefa e nos níveis de humor. O monitoramento de mudanças nas oscilações cerebrais foi validado como um método altamente sensível para avaliar os efeitos dos psicossimilhantes no cérebro humano (Siepmann & Kirch, 2002), mesmo na ausência de mudanças relacionadas no desempenho, avaliadas usando uma tarefa cognitiva específica (Deslandes et al., 2005). No entanto, para entender melhor a contribuição das mudanças observadas nos poderes alfa e beta no desempenho da tarefa, realizamos o Experimento 2 com um tamanho de amostra estatisticamente relevante para a avaliação cognitiva. Um padrão de resultados consistente com as mudanças de EEG observadas em potências alfa e beta como função do tratamento e do período (Fig. 2) foi obtido para o número de batidas e para as classificações subjetivas de alerta e calma. A precisão na detecção de alvos aumentou durante Post2 (Fig. 3), e essa melhoria foi significativamente maior na condição otimizada do que na água. Os participantes também relataram maior estado de alerta e baixos níveis de calma na condição Otimizada durante o Post2. Curiosamente, os participantes se sentiram mais felizes após o consumo de qualquer um dos gelados de água do que o copo de água, sendo as classificações de satisfação as mais baixas na última condição. Um número maior de participantes, portanto, produziu um padrão diferente de resultados no Experimento 2 do que na Experiência 1, com efeitos significativos do tratamento no desempenho da atenção e níveis de humor. Não se pode excluir a possibilidade de obter diferentes padrões de resultados no EEG com um aumento do poder estatístico, como na banda de frequência theta para qual o tratamento? a interação do período pode atingir o nível de significância (ver Tabela 1). No entanto, no presente estudo exploratório, podemos demonstrar um impacto significativo do gelo de água otimizado sobre a ativação cerebral nas faixas de freqüências alfa e beta como a hipótese. Neste contexto, o efeito do produto foi significativamente maior do que outras fontes de variabilidade, como a variabilidade natural existente na atividade oscilatória alfa e beta entre os indivíduos. A partir disso, é razoável supor que um maior número de participantes no estudo EEG levaria a mudanças semelhantes nessas duas bandas de freqüência. 5. Perspectivas Os dados obtidos nas duas experiências descritas neste relatório sugerem que as principais propriedades sensoriais da percepção refrescante são susceptíveis de induzir mudanças na energia mental, conforme revelado pelo aumento do estado de alerta subjetivo, desempenho da atenção e ativação do EEG nos intervalos alfa e beta. As mudanças específicas na ativação cerebral induzidas pela percepção refrescante podem refletir os melhores recursos fisiológicos para o desempenho das tarefas. Esta última hipótese deve ser explorada em um estudo futuro em que a atividade elétrica do cérebro deve ser medida em um número maior de participantes durante a avaliação do desempenho cognitivo do que o utilizado neste trabalho exploratório. Além disso, o impacto respectivo das propriedades sensoriais que impulsionam a percepção refrescante e seus potenciais efeitos sinérgicos na energia mental representam uma avenida de pesquisa aberta. Reconhecimentos Agradecemos a equipe da Unidade Metabólica do Centro de Pesquisa Nestlé pelo apoio médico, assistência com recrutamento e agendamento de participantes. O software CarTool (http://brainmapping.unige.ch/Cartool.htm) foi programado por Denis Brunet do Laboratório de Mapeamento do Cura Funcional (Genebra, Suíça) e é apoiado pelo Centro de Imagem Biomédica (www.cibm.ch) de Genebra e Lausanne. Agradecemos a Jean-François Knebel e Micah Murray (CIBM) por seu apoio ao design do estudo, e Sabrina Rami por seu apoio nas análises estatísticas. Os autores desejam expressar sua gratidão aos revisores anônimos por seus comentários.
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