Fluorescência da clorofila

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INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO, CIÊNCIA E TECNOLOGIA DO ESPIRITO SANTO IFES- Campus SANTA TERESA
Curso: Agronomia
Disciplina: Fisiologia Vegetal
	Professor: Hediberto Nei Matiello
	
Relatório de Aula Prática:
RELATÓRIO 3: Fluorescência da clorofila 
Aluno: Vinicius Bonatto Roldi
Santa Teresa
2017
1 - Introdução
A energia luminosa absorvida pela clorofila pode seguir diferentes destinos. Pode ser utilizada na fotoquímica vegetal via elétrons com alto nível de energia, se perder em forma de calor ou por fluorescência. O nível de fluorescência indica a saturação das vias de transporte de elétrons e o quanto de energia luminosa a planta pode processar sob dada condição ambiental.
2 - Materiais e métodos
Materiais:
- Folhas de Croton sp e Ixora sp recém colhidas;
- Almorafix;
- Carbonato de cálcio (CaCO3);
- Ácido clorídrico;
- Lâmpada com luz dicróica;
- Papel celofone azul;
- Gaze;
- Funil;
- Tubo de ensaio;
- Anilina verde;
- Becker de 100 a 500 mL;
- Álcool etílico;
- Banho-maria.
Métodos:
- Separar das nervuras cerca de 10 g de folhas de Croton sp e Ixora sp;
- Colocar em Becker de 100 mL com água e uma pitada de carbonato de cálcio (CaCO3);
- Colocar em banho-maria a 100°C/10 min;
- Retirar a água, substituir por álcool etílico e colocar em banho-maria a 100°C/15 min;
- Recolher o estrato filtrando-o em gaze;
- Colocar amostra em tubo de ensaio;
- Levar amostra em local escuro e aplicar luz dicróica com filtro azul de papel celofone;
- Observar a amostra comparando-a com tubo preenchido com anilina verde. Observe a coloração da interface vidro/líquido;
3 - Resultado e discussão
Para a realização dessa pratica, foi preciso fazer um extrato da clorofila das folhas para podermos observar a fluorescência. Utilizando- se de uma lâmpada com luz dicroica envolta por um papel celofane de azul (translucido) em um local de baixa claridade foi possível observar a fluorescência da clorofila. 
Ao se aproximar a luz ao recipiente contendo o extrato da clorofila de folhas de Batata doce (Ipomeabatata), foi possível observar que ouve uma mudança de cor do extrato passando da cor verde para uma cor vermelho, essa mudança de cor se deu pelo fato das clorofilas absorverem a radiação fotossinteticamente ativa (400-700 nm) proveniente da luz artificial, e como elas não conseguirem repassar essa energia para as outras clorofilas até o centro de reação do fotossistema II. Este fenômeno ocorre pelo fato das clorofilas não estarem mais organizadas na biomembrana do tilacoide, onde foram extraídas dos cloroplastos.
Durante o processo os elétrons excitados das clorofilas voltam ao estado de baixa energia emitindo radiação na forma de luz e calor. A luz que emitem possui comprimento de onda longo, possibilitando assim a visualização da cor vermelha.
 
4 - Conclusão
Foi possível obervar a fluorescência da clorofila das folhas, submetendo o seu extrato a uma fonte de luz envolta de um papel celofane azul.
5 - Questionamentos
Porque a interface apresentou tal coloração?
A fluorescência da clorofila ocorre devido à emissão de luz vermelha escura quando os elétrons da parábola da clorofila voltam ao estado não excitado emitindo fótons no comprimento de onda na região do vermelho escuro.
Qual a característica da luz obtida com o filtro de papel celofone? Porque utiliza-la?
O papel celofone tem a característica de ser seletivo e permitir a passagem de luz azul. O espectro de luz vai do violeta ao vermelho, os comprimentos de onda mais curtos são os mais energéticos, a luz de comprimento de onda azul é a mais energética para a fotossíntese, por isso foi utilizada.
Porque ocorre florescência? Faça um esquema dos fotossistemas I e II e identifique o local por onde a energia está se dissipando em forma de energia fluorescente.
Ocorre fluorescência porque a energia não é utilizada na produção de ATP nos fotossistemas. Então a energia não utilizada na etapa fotoquímica, voltando para a clorofila e sendo liberada na forma de fótons e a fluorescência na cor vermelha por ser um comprimento de onda menos energético. 
Em quais situações de campo poderia haver um elevado grau de perda de energia luminosa por fluorescência? O nível de fluorescência poderia indicar a aptidão de determinada cultivar a um sistema de plantio ou situação de estresse ambiental? 
Se a planta fosse submetida a condições de estrese hídrico, alta intensidade luminosa, temperatura elevada e alta concentração de CO2. Todos estes fatores interferem no processo metabólico da planta. Observando-se o nível de fluorescência pode-se indicar a aptidão de cada planta, uma vez que se observa em qual situação está ocorrendo maior perda e energia absorvida.
6 - Referências
TAIZ, L.; ZEIGER. E. Fisiologia vegetal. São Paulo: Artmed, 2009.