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28/04/2016 1 ENZIMAS Universidade Estadual da Paraíba Centro de Ciências Biológicas e da Saúde Departamento de Biologia DISCIPLINA: BIOQUÍMICA Prof. Dr.Thyago Moreira de Queiroz No final do século XVII e início do XVIII se sabia da digestão da carne, da conversão do amido em açúcar, mas não se entendia o processo. No século XIX, Louis Pasteur conclui que a fermentação do açúcar em álcool pelas leveduras é catalisada por “fermentos”. Indispensáveis para a vida da levedura Louis Pasteur Introdução � 1850 � Louis Pasteur - fermentação de açúcar em álcool por “fermentos”– vitalismo � 1897 � Eduard Buchner – extratos de leveduras podiam fermentar açúcar em álcool � fermentação realizada por moléculas que continuavam ativas mesmo após removidas das células. � Frederick W. Kühne� deu nome às enzimas Introdução � Conceito � São proteínas especializadas na catálise de reações biológicas; �Catalisadores biológicos; � Aceleram a velocidade de uma reação, sem no entanto participar dela como reagente ou produto; Enzima Substrato Produto Introdução O que é um catalisador? Quimicamente: É uma substância que afeta a velocidade de reação, mas emerge do processo inalterada. Catalisador de automóveis Acelera a conversão de gases tóxicos para gases menos poluentes Introdução � Cada enzima recebe dois nomes: � 1º é um nome curto, nome recomendado, conveniente para uso corriqueiro; Geralmente recebem o sufixo “ase” adicionado ao nome do substrato da reação (Ex.: glicosidase, urease, sacarase) ou à descrição da ação realizada (Ex.: lactato-desidrogenase, adenilato-ciclase) e algumas enzimas mantêm o nome trivial (Ex.: tripsina e pepsina); Nomenclatura 28/04/2016 2 � 2º é um nome sistemático, o qual é utilizado quando uma enzima precisa ser identificada sem ambiguidades Designado pela União Internacional de Bioquímica e Biologia Molecular (IUBMB); Sistema de nomenclatura no qual as enzimas são divididas em seis classes principais, cada uma com numerosos subgrupos. Nomenclatura A International Union of Biochemistry A International Union of Biochemistry and Molecular Biology (IUBMB)and Molecular Biology (IUBMB) Seis grandes GruposSeis grandes Grupos Tipo de reação que Tipo de reação que catalisamcatalisam Nomenclatura Cada enzima - no de código (E.C.- Enzime Comission) com 4 dígitos que caracterizam o tipo de reação; 1o dígito - classe 2o dígito - subclasse 3odígito - sub-subclasse 4odígito - indica o substrato Nomenclatura Nomenclatura Exemplo: (EC) = 2.7.1.1 ATP: glicose-fosfotransferase 1o dígito - Transferase 2o dígito - Fosfotransferase 3odígito – Grupo hidroxil como aceptor 4odígito – D-glicose OxidorredutasesOxidorredutases � Catalisam reações de oxidação-redução � O substrato oxidado é um hidrogênio ou doador de elétron � Ex: Lactato-desidrogenase LactatoLactatoLactatoLactato PiruvatoPiruvatoPiruvatoPiruvato Classificação 28/04/2016 3 Transferases � Catalisam a transferência de grupos entre duas moléculas; � Ex: alanina aminotransferase AlaninaAlanina α-cetoglutaratoα-cetoglutarato Classificação Hidrolases � Catalisam a reação de hidrólise de várias ligações covalentes � Ex: Catálise de ligações peptídicas Classificação LiasesLiases � Liases são enzimas que catalisam a clivagem de ligações C-C, C-O, C-N, entre outras; � Ex: Piruvato descarboxilase PiruvatoPiruvato acetaldeídoacetaldeído Classificação Isomerases � Catalisam a modificação de uma única molécula, sem participação de outra; � Produzem um rearranjo na estrutura; � Ex.: Alanina racemase Classificação LigasesLigases � Catalisam reações de síntese de uma nova molécula a partir da ligação entre duas moléculas; � Gasto de ATP � Ex.: Glutamato-amônia ligase ou glutamina sintetase Classificação Enzimas como Catalisadores � As moléculas sobre a qual uma enzima atua é conhecida como SUBSTRATO SUBSTRATO PRODUTO OU PRODUTOS A característica distintiva de uma reação catalisada enzimaticamente é que ela ocorre no interior dos limites de uma fenda, na estrutura molecular da enzima chamada SÍTIO ATIVO. 28/04/2016 4 Enzima SubstratoSubstrato ProdutoProduto � As Enzimas aceleram a velocidade da reação, mas NÃO participam da reação como reagente ou produto!!!! Enzimas como Catalisadores Como ocorre essa aceleração? - Toda reação química ou metabólica é dirigida para transformar substratos em produtos SUBSTRATO PRODUTOS Reação química ou metabólica Barreira Energética Energia de Ativação Enzimas como Catalisadores � A energia de ativação representa a energia necessária para o alinhamento dos grupos químicos reagentes, formação de cargas transientes instáveis, rearranjo de ligações e outras transformações. �A energia de ativação reflete a velocidade da reação; SUBSTRATO PRODUTOS Reação química ou metabólica Barreira Energética Energia de Ativação Enzimas como Catalisadores Como ocorre essa aceleração? -Toda transformação química depende de uma energia de ativação (Ea) Produto Ea Enzimas como Catalisadores - Enzima diminui a energia de ativação necessária para a formação dos produtos aumentando a velocidade da reação. Ea Enzimas como Catalisadores � As enzimas são altamente ESPECÍFICAS �Catalisam uma única reação (substrato único) ou um tipo de reação (um tipo de substrato). �As enzimas permitem que o Equilíbrio da reação seja alcançado muito mais rápido. Enzimas como Catalisadores 28/04/2016 5 • Como ocorre a ligação da Enzima ao Substrato??? � Sítio de Ligação � região da enzima que se ligará de forma reversível ao substrato (ou substratos) � Sítio Catalítico � região onde ocorrerá a catálise da reação, ou seja, onde ocorrerão as mudanças necessárias para transformar o substrato no seu produto. * Sítio ativo � contem o sítio catalítico e o de ligação. Apresentam uma fenda típica, onde os resíduos de aminoácidos da molécula enzimática podem atuar sobre o substrato Enzimas como Catalisadores no nosso organismo seriam extremamente Sem as enzimas, as reações que ocorrem no nosso organismo seriam extremamente lentas Enzimas como Catalisadores Enzimas como Catalisadores � Especificidade �Cada Ez catalisa uma reação específica; �Absoluta: atividade exclusiva para o substrato; �Relativa: atua sobre um grupo semelhante de substrato Substrato Sítio ativo Enzimas como Catalisadores � Cofatores: Coenzimas � São moléculas orgânicas pequenas que se separam facilmente das enzimas; �Ativadores metálicos � Íons firmemente presos à molécula da enzima; � Grupos prostéticos �Grupo orgânico ou inorgânico preso à enzima e funciona como seu grupo ativo HEME da hemoglobina Vitamina K Fe, S Grupos Químicos 28/04/2016 6 � Fatores que afetam a atividade enzimática � Temperatura e pH; V r ea çã o pH ou T Situação ótima Cinética Enzimática � Quanto maior a temperatura, maior a velocidade da reação � A enzima é desnaturada caso haja um aumento exacerbado (variação do pH) � Sob condições de hipertermia, a atividade enzimática é deprimida � Fatores que afetam a atividade enzimática �Concentração do substrato; V r ea çã o [substrato] Velocidade máxima Cinética Enzimática � Velocidade máxima: número de moléculas de substrato convertidas em produto por unidade de tempo; � A velocidade da reação catalisada por enzimas aumenta até atingir uma velocidade máxima. Enzimas como Catalisadores � Fatores que afetam a atividade enzimática � Presença de inibidores ou ativadores: [p ro du to ] f or m ad o Tempo Ativador Sem ativadorInibidor Cinética Enzimática � Enzimas Inativas � Zimogênio: só se tornam ativas quando necessárias; Protrombina ECA (enzima conversora de angiotensina) Cinética Enzimática � Inibidores � São compostos que reduzem a atividade enzimática; � Análogos dos substratos, competem com o mesmo sítio de ligação; - Fluoracil (antimetabolito) - Etanol/Metanol (álcool-desidrogenase) E I S Inibição competitiva Inibição Enzimática 28/04/2016 7 � Inibidores �Ocorre ligação em outro sítio diferente do substrato; � AINES inibe a cicloxigenase S I I S E Inibição não-competitiva Inibição Enzimática Inibição irreversível � Ligação irreversível (inativação, lig. Covalente; suicida); � Fígado �Alanina aminotransferase (ALT) �Aspartato aminotransferase (AST) � Coração �Creatina cinase (CK-MB) �Lactato desidrogenase (LD1 e LD2) Icterícia obstrutiva, Hepatites infecciosa ou não Infarto no miocárdio Enzimas Importantes ENZIMAS Universidade Estadual da Paraíba Curso de Nutrição DISCIPLINA: BIOQUÍMICA
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