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Profa. Dra. Roberta Fariello Microbiologia – ramo da biologia que estuda os microorganismos ◦ Vírus ◦ Bactérias ◦ Fungos ◦ Protozoários Microorganismos – organismos geralmente unicelulares que só podem ser vistos ao microscópio ◦ Dos milhares de microorganismos conhecidos, apenas um número reduzido causam doenças Contaminação Descontaminação Limpeza Antissepsia Assepsia Desinfecção Esterilização Contaminação É definida como a presença de qualquer substância química (ou seus resíduos) ou material vivo (matéria orgânica/microorganismos) em equipamentos ou outros organismos, com risco potencial de prejuízo à saúde das pessoas Descontaminação É um procedimento utilizado em artigos (material hospitalar, instrumento ou superfície) contaminados por matéria orgânica (sangue, pus, secreções corpóreas) para a destruição de microorganismos patogênicos antes de iniciar o processo de limpeza Um processo de descontaminação não significa, necessariamente, que este material está seguro para sua utilização no paciente, uma vez que o procedimento de descontaminação pode variar desde um processo de esterilização ou desinfecção até a simples lavagem com água e sabão. Descontaminação prévia Realizada pela imersão dos materiais com presença de matéria orgânica, microorganismos e outros resíduos decorrentes do uso, em uma solução desinfetante por um determinado tempo de exposição Objetivo – Eliminar ou reduzir os microorganismos presentes, antes de submetê-los à limpeza mecânica com água e sabão Proteger as pessoas que irão proceder a limpeza dos artigos Limpeza É o processo que remove fisicamente a contaminação por microorganismos, material orgânico e resíduos decorrentes do uso de um artigo. É essencial para o sucesso da desinfecção e da esterilização Limpeza mecânica geralmente realizada com água e sabão (detergente) Importante Dependendo do material orgânico, microorganismo ou resíduo ao qual tem contato Dependendo da quantidade desse material contaminante 1 • Limpeza 1 • Limpeza 2 • Esterilização ou Desinfecção 1 •Descontaminação prévia 2 •Limpeza 3 •Esterilização ou Desinfecção Antissepsia É o método através do qual se impede a proliferação de microorganismos em tecidos vivos com o uso de substâncias químicas (anti-sépticos) Inibição ou destruição de microorganismos na superfície de tecidos vivos Utilização Nome Substância Mesma substância química Desinfetante Objetos inanimados Anti-séptico Tecidos vivos Assepsia Procedimento onde se impede que determinado equipamento, objeto, medicamento, cosmético ou ambiente estéril venha a ser contaminado Os seres vivos podem ser classificados: ◦ Quanto ao número de células ◦ Quanto a organização do núcleo Unicelulares e Pluricelulares Procariontes e Eucariontes Considerando que: ◦ Todos os seres vivos são constituídos por células ◦ O número de células varia de um ser para o outro ◦ A palavra unicelular tem origem no latim uni, que significa "um, único” ◦ Os seres unicelulares são formados por apenas uma célula ◦ Ex.: bactérias, cianobactérias, protozoários, as algas unicelulares e as leveduras ◦ A palavra pluricelular tem origem no latim pluri, que significa "mais, maior“ ◦ Os seres pluricelulares são formados por várias células ◦ Ex.: animais, vegetais e alguns fungos (cogumelos) Unicelulares x Pluricelulares * Malária, Leishmaniose, Toxoplasmose, Giardíase e Doença de Chagas Dependendo do tipo de estrutura celular que apresentam, os seres vivos podem ser divididos em Procariontes e Eucariontes ◦ Organização do núcleo Procariontes (proto = primitivo; cario = núcleo) ◦ São unicelulares ◦ Têm a estrutura celular mais simples ◦ Sem núcleo individualizado Conteúdo nuclear (material genético) não está envolvido nem separado do citoplasma por membrana nuclear (carioteca) Portanto o conteúdo nuclear está misturado com os outros componentes celulares São representados por: bactérias, cianobactérias e micoplasmas Eucariontes (eu = verdadeiro; cario = núcleo) ◦ São unicelulares ou pluricelulares ◦ Têm a estrutura celular mais complexa ◦ Possui núcleo individualizado Conteúdo nuclear (material genético) está envolvido e separado do citoplasma por membrana nuclear (carioteca) Portanto o conteúdo nuclear está separado com os outros componentes celulares Apresentam outras estruturas que não aparecem nos procariontes São representados por: Protozoários, algumas algas e certos fungos (unicelulares) Animais, plantas e fungos em geral (pluricelulares) • Algumas espécies de bactérias originam, sob certas condições ambientais (desfavoráveis para manter seu material genético), estruturas resistentes denominadas esporos • Gram positivas: Clostridium, Bacillus e Sporosarcina • Altíssima resistência a agentes físicos e químicos • Resistência ao calor, às radiações, aos desinfetantes e à desidratação • A esporulação tem início quando os nutrientes bacterianos se tornam escassos, geralmente, pela falta de fontes de carbono e de nitrogênio • Esporulação – mecanismo de conservação de informações genéticas • O esporo apresenta uma parede grossa e sua atividade metabólica torna-se muito reduzida • Certos esporos são capazes de se manter em estado de dormência (latência) por dezenas de anos • Ao encontrar um ambiente adequado, o esporo se reidrata e origina uma bactéria ativa • Portanto... O esporo é uma camada que protege a bactéria e é responsável pela resistência ao ataque dos agentes físicos e químicos da esterilização e desinfecção Na fase esporulada, as bactérias não realizam atividade biossintética e reduzem sua atividade respiratória. Nesta fase também não ocorre a multiplicação e crescimento bacteriano •Processo físico ou químico para reduzir o número de microorganismos para um nível menos prejudicial •Método capaz de eliminar muitos ou todos os microorganismos patogênicos, com exceção dos esporos Desinfecção •Processo físico ou químico que elimina todos os tipos de microorganismos (bactérias, vírus, fungos e inclusive esporos) •Processo usado para prover um produto livre de todas as formas de microorganismos Esterilização DESINFECÇÃO: classificação MÉTODOS E SOLUÇÕES GERMICIDAS Desinfecção de baixo nível: são destruídas as bactérias em forma vegetativa, alguns vírus e alguns fungos. O Mycobacteriumtuberculosis, os esporos bacterianos ,o vírus da Hepatite B (HBV) e os vírus lentos sobrevivem. Álcool etílico e isopropílico Hipoclorito de Sódio (100ppm) Fenólicos Iodóforos* Quaternário de amônia obs.: tempo de exposição< ou= a 10 minutos. Desinfecção de médio nível: além dos microorganismos destruídos na desinfecção de baixo nível são atingidos o Mycobacterium tuberculosis, a maioria dos vírus (inclusive o HBV)e a maioria dos fungos. Ainda sobrevivem os Mycobacterium intracelulare, os esporos bacterianos e os vírus lentos. Álcool etílico e isopropílico (70 a 90%) Fenólicos Iodóforos* Hipoclorito de Sódio (100ppm) Pasteurização 75o C a 30 minutos. Obs.: depende da concentração e/ou período de exposição. Desinfecção de alto nível: resistem apenas alguns tipos de esporos bacterianos mais resistentes e os vírus lentos. - Glutaraldeído - Solução de Peróxido de Hidrogênio - Hipoclorito de sódio (1000 ppm) - Cloro e compostos clorados - Ácido peracético. -Orthophtalaldeído. - Água super oxidada - Pasteurização 75o C a 30 minutos. Obs.: Tempo de exposição >ou= 20 minutos. A desinfecção pode ser classificada de acordo com a tabela abaixo Moléculas proteicas que possuem propriedades infectantes Se distinguem de vírus e bactérias comuns por serem desprovidos de carga genética Existe um gene, denominado prinp, que é responsável pela síntese da proteína príon celular (PrPc) ◦ Na sua forma normal e saudável, essa proteína, além de participar do processo de diferenciação neural, defende os neurônios de condições que podem levar à sua destruição ◦ Uma mutação do gene prinp provoca a formação defeituosa da PrPc, que se transforma em príon ◦ Essa molécula é capaz de alterar a forma de outras proteínas saudáveis, que, a partir daí, também adquirem um comportamento priônico ◦ Os príons podem até mesmo produzir réplicas de si mesmos (por mecanismos ainda desconhecidos) Possuem estruturas bastante estáveis e são resistentes a enzimas digestivas, calor, algumas substâncias químicas e à radiação ultravioleta ◦ Condições que normalmente degradam proteínas e ácidos nucleicos Afetam exatamente os neurônios A infecção por tais moléculas pode ocorrer por herança genética, consumo da carne de animais infectados, aplicação de hormônios, utilização de instrumentos cirúrgicos contaminados ou por uma mutação casual As doenças provocadas por príons não têm cura e são frequentemente classificadas como encefalopatias espongiformes, devido ao aspecto esponjoso que o cérebro adquire com a infecção A mais conhecida dessas doenças é a Encefalopatia Espongiforme Bovina (EEB), conhecida popularmente como mal da vaca louca Importante Desinfetantes diferem entre si basicamente quanto ao espectro antimicrobiano e à rapidez com que agem O número de microorganismos no material a ser desinfetado é proporcional ao tempo que o desinfetante leva para destruí-los Materiais compostos por várias peças devem ser desmontados para que o agente desinfetante possa agir sobre toda a sua superfície Características ideais de um desinfetante ◦ Amplo espectro ◦ Ação rápida ◦ Não ser afetado por fatores ambientais (ex. luz) ◦ Ser ativo na presença de matéria orgânica ◦ Atóxico (não deve ser irritante para o usuário) ◦ Não corrosivo em superfícies metálicas ou causar deterioração de outros materiais tais como: borrachas e plásticos ◦ Fácil manuseio ◦ Inodoro ou de odor agradável ◦ Econômico ◦ Não poluente A proposta da pasteurização é destruir os microorganismos patogênicos Entretanto, não elimina os esporos Métodos de esterilização ◦ Esterilização por vapor ◦ Óxido de etileno Materiais que não podem ser autoclavados ◦ Esterilização por calor seco Estufas – para materiais sensíveis ao calor úmido ◦ Radiação ionizante Tecidos destinados a transplantes e drogas ◦ Químicos líquidos Materiais que não podem ser esterilizados por calor ou óxido de etileno ◦ Filtração Filtros Millipore – fluidos farmacêuticos ◦ Ondas curtas Eficaz para inativar culturas bacterianas, vírus e alguns esporos bacterianos Esterilização por vapor ◦ Vapor quente sob pressão ◦ Método mais usado para esterilização de materiais médico-hospitalares ◦ Não é tóxico ◦ Baixo custo ◦ Possui ação esporicida – temperatura de 121° C ◦ É realizado em autoclaves As autoclaves devem ser validadas e frequentemente deve-se comprovar a sua eficácia de esterilização através de indicadores microbiológicos e de temperatura
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