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Faculdade de Americana FAM Natália Buccato RA: 20161812 3º Semestre FARMACOGNOSIA Americana – Outubro 2017 FACULDADE DE AMERICANA CURSO DE FARMÁCIA DISCIPLINA DE FARMACOGNOSIA ATIVIDADE PRÁTICA SUPERVISIONADA Suponha que você tenha coletado uma espécie vegetal desconhecida (apenas com informações etnofarmacológicas sobre uma possível ação antinociceptiva). Como você procederia para iniciar a pesquisa e extração dos princípios ativos deste vegetal? Resposta: Método maceração a frio com solventes polares e de média polaridade para se fazer uma análise da matéria prima para testar sua autenticidade, pureza, identidade, contaminantes e adulterantes, conhecer qual parte do vegetal a ser trabalhada (folha, fruto, flores, etc). É um método eficaz para extrair princípios ativos de uma forma mais rápida para esse caso de planta desconhecida. 2) Observe o fluxograma de obtenção dos extratos brutos de uma espécie vegetal do cerrado brasileiro: Casca seca e moída (200 g) Etanol 70% Extração a frio Extração a quente Extrato bruto hidroalcoólico a frio (73.7g) Extrato bruto hidroalcoólico a quente (96.4g) Proponha um método de extração a frio e um a quente para a preparação dos extratos brutos desta espécie vegetal e justifique sua resposta: Resposta: Método de extração a frio: Remaceração, pois é uma método que dá um esgotamento do material aumentando o seu rendimento Método de extração a quente: Refluxo ou Soxhlet, pois é um solvente que sempre é renovado aumentando a extração. b) Qual o rendimento final resultante dos dois processos extrativos (em %)? Como você explicaria esta diferença? Resposta: Método de extração a frio: 200gr – 100%g 73,7 gr – x X = 36,85 Método de extração a quente: 200gr – 100% 96,4gr – x X = 48,2 No método de extração a quente o solvente álcool tende evaporar, em uma concentração maior do extrato. 3) A sazonalidade é um fator que interfere diretamente na concentração dos princípios ativos em uma espécie vegetal, como exemplificado abaixo: Variação alcaloídica (atropina) de Datura suaveolens durante uma ano (%) Mês Folha Caule 1 38.3 30.7 2 34.1 51.6 3 32.1 37.0 4 29.0 21.0 5 30.0 24.0 6 33.4 24.0 7 31.7 13.4 8 21.8 13.5 9 33.8 23.4 10 52.7 24.6 11 42.2 26.6 12 41.8 26.2 Para a obtenção da maior quantidade possível de atropina, qual órgão e em qual período do ano você realizaria a coleta desta espécie vegetal? Resposta: Para a folha coletaria o vegetal no mês 10. E para o caule coletaria o vegetal no mês 2 b) Elabore uma metodologia para avaliar a variação anual de atropina presente em Datura suaveolens : Leia os textos abaixo para responder as questões seguintes: a) “Os caules de D. rugosa coletados foram secos em estufa com ventilação e posteriormente moídos (403 g). Em seguida foram submetidos a refluxo com metanol. No extrato obtido foi adicionado água e particionado entre hexano e posteriormente clorofórmio, fornecendo assim as respectivas fases: hexânica (2,16g) e clorofórmica (1,82 g). O extrato hidrometanólico foi concentrado de modo a eliminar o metanol e este foi submetido novamente a partição seqüencial com acetato de etila, fornecendo assim a fase acetato de etila (1,36g).”(David, J.M; Souza, J.C; Guedes,M.L.S; David, J.P. Estudo fitoquímico de Davilla rugosa: flavonóides e terpenóides. Brazilian Journal of Pharmacognosy 16(1): 105-108, Jan./Mar. 2006. MODIFICADO) 1) Qual o processo extrativo utilizado no preparo do extrato de D. rugosa? Quais são as vantagens desse método? Resposta: O método de extração utilizado foi o refluxo que é um sistema fechado e tem a vantagem de aumentar a temperatura e sua solubilidade aumentando o seu rendimento. Se o objetivo dos autores do trabalho acima fosse preparar uma tintura a partir de 403g de D. rugosa , eles deveriam utilizar 2.015 mL de metanol p.a., por percolação ou maceração. Esta afirmação está verdadeira ou falsa? Justifique sua resposta. Resposta: A quantidade de solvente esta certa logo que: 1g --------- 5ml 403g -----x X = 2.015 ml Qual foi o procedimento utilizado no fragmento sublinhado do texto acima? Qual o objetivo de sua realização? Resposta: O procedimento utilizado foi extração liquidos-liquidos, onde se mistura solvente imiscíveis com seu extrato bruto que tem objetivo o fracionamento de substancias químicas de polaridades diferentes purificando o extrato. b) “....O extrato bruto foi submetido à Cromatografia em Coluna (CC) de adsorção, utilizando diferentes sistemas eluentes, sendo eles: hexano, clorofórmio, clorofórmio:acetato de etila 95:5, clorofórmio:acetato de etila 90:10, clorofórmio:acetato de etila 50:50, acetato de etila, acetona, metanol,metanol:água.”(Celso V. Nakamura, Adriana O. Santos, Michele C. Vendrametto, Patrícia S. Luize, Benedito P. Dias Filho, Diógenes A.G. Cortez, Tânia Ueda- Nakamura. Atividade antileishmania do extrato hidroalcoólico e de frações obtidas de folhas de Piper regnellii (Miq.) C. DC. var. pallescens (C. DC.) Yunck. Brazilian Journal of Pharmacognosy 16(1): 61-66, Jan./Mar. 2006.) Qual a finalidade da realização da cromatografia em coluna e da utilização dos diferentes sistemas de eluentes pelos autores do artigo acima? Após o término da cromatografia, o que você faria para dar continuidade ao estudo? Resposta: A finalidade da cromatografia seria o fracionamento e purificação de substancias presentes no extrato com diferentes eluentes e separação das substancias de acordo com suas respectivas polaridades e para dar continuidade, estudaria cada principio ativo fazendo as analises precisas e testes biológicos para constatar determinada atividade terapêutica.
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