Como fazer um Portfólio de Microbiologia

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Portfólio de Microbiologia 
Discentes: Ayumi Ikuta, Carina Ramos e Francielle Paiva.
Docente: Zulane Lima
PRÁTICA I – EXPERIMENTO DE PRICE
Aula 01/03/18
PRÁTICA I – EXPERIMENTO DE PRICE
Materiais Utilizados
Sabonete Prótex
Sabonete Líquido (Detergente)
Placa de Petri – Ágar Sangue
Swab
Bico de Bunsen
Álcool 70%
Solução Salina 0,85%
Estufa de Incubação
PRÁTICA I – EXPERIMENTO DE PRICE
Metodologia
Organizar todos os materiais que será utilizado;
Dividir a Placa de Petri em (SEM LAVAR, LAVADA e LAVADA + ÁLCOOL);
Abrir o swab, flambar a tampa do tubo da solução salina 0,85%
 Mergulhar o swab na solução e esfregar na mão SEM LAVAR;
Após esfregar o swab na mão, passar na parte indicada;
LAVADA – Lavar a mão por 3 minutos (Fazer Espuma) com Sabonete Prótex ou Detergente;
Com outro swab, repetir o processo de (Flambar a tampa da solução e Emergir o swab na solução) e esfregar na mão lavada, em seguida passar na Placa no indicado;
LAVADA + ÁLCOOL – Após ter lavado anteriormente, passar álcool 70% e esfregar 1 minuto, e depois esfregar o swab, e em seguida passar na Placa de Petri.
1* Identificar na Placa de Petri o nome da equipe, os 3 passos do Experimento de Price
2* Flambar o tubo da solução salina de 0,85%
3* Imergir o swab na solução salina
4* Passar o swab na mão sem lavar
5* Esfregar o swab no local marcado com SEM LAVAR
6* Lavar a mão por 3 minutos ( Fazer espuma) com sabonete proétex ou detergente
7* Enxaguar abundantemente e esperar secar a mão
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8* Passar o swab na mão após lavado e seco, e esfregar na marcação de LAVADO
9* Passar álcool 70% e esfregar por 1 min, após isso esfregar o swab
10* Esfregar o swab coletado após lavado e passado álcool 70% na marcação LAVADO + ÁLCOOL 70%
PRÁTICA I - PESQUISA DE MICRORGANISMO NO MEIO AMBIENTE
Aula 01/03/18
PRÁTICA I – PESQUISA DE MICRORGANISMO NO MEIO AMBIENTE
Materiais Utilizados
Placa de Petri – Ágar Nutriente (5)
Swab (3)
Bico de Bunsen
Solução Salina 0,85%
Estufa de Incubação (25⁰C)
Metodologia
PRÁTICA I – PESQUISA DE MICRORGANISMO NO MEIO AMBIENTE
Usar o Ágar Nutriente (Ele cresce numa gama variada de microrganismo);
Cada grupo irá usar 5 placas de Petri de Ágar Nutriente
A primeira Placa é de Controle (Para comparar com os outros resultados e deve estar estéril);
A segunda Placa é para o bico de Bunsen (Para verificar se a área do Bico está estéril ou contaminada);
Após a primeira e a segunda Placa, a partir da terceira coletar microrganismo no meio ambiente (No caso da Faculdade).
1* identificar as placas, e organizar a bancada
controle
Bico de bunsen
Celular
Notebook da Xerox
Marçaneta do Laboratório
2* Após separar a placa de controle, fazer a coleta de microrganismo próximo ao bico de bunsen, para saber se aquela área esteril está contaminada
3* As outras coletas foram de: Celular de Ayumi, Marçaneta, Notebook da Xerox
4* Após as coletas, enfileirar as placas uma em cima da outra, enovolver com plástico filme, identificar o grupo, a data da prática, o curso e o prazo de validade
5* Colocar as placas com os microrganismos na Estufa de Incubação na temperatura aproximadamente de 25,6.. Conforme na foto.
Resultados
Bico de Bunsen
controle
Celular de Ayumi
A placa de Petri denominada Bico não deveria apresentar crescimento microbiano porque subentende-se que exista uma área estéril que inibe a contaminação do microrganismo
A placa de controle deveria estar estéril com forma de comparação com as outras placas de petri utilizada para cultura. No caso da placa de controle de nossa equipe já veio contaminada, possivelmente na hora da esterilização da placa, ou na adição do ágar nutirente, ou no transporte, um dos possíveis motivos pelo qual veio contaminar
Notebook da Xerox
Resultado: Experimento de Price
Marçaneta da porta
PRÁTICA II – COLORAÇÃO DE GRAM
Aula 22/03/18
PRÁTICA II – COLORAÇÃO DE GRAM
Materiais Utilizados
Lâminas (2)
Água Destilada
Solução Salina 0,85%
Alça de Inoculação
Bico de Bunsen
Álcool ou Solução Descolorante
Fucsina
Lugol
Cristal Violeta
Placa de Petri com Bactérias em Meio de Cultura
1* Flambar a alça de inoculação, (para esterelizar) e esperar por alguns segundos para esfriar.
Colocar a alça na lateral (inclinado), a área central da chama é menos quente. E por isso coloca-se na lateral para pegar ao todo e mais quente ( por que está perto do ar)
A alça deve ficar incandencente e esperar por alguns segundos, após flambar..deixar esfriar a alça próxima a área estéril
2* Flambar o tubo de solução salina
3* Imergir a alça de inoculação na solução salina, para pegar uma gota
4* Colocar a gota da solução salina mo meio da lâmina
5* Flambar novamente a alça de inoculação com os mesmos procedimentos anteriores
6* Pegar a placa com meio de cultura de preferência, no caso utilizamos do microrganismos coletados no celular de Ayumi
7* Coletar as bactérias sem pegar o ágar nutriente
8* Esfregar as bactérias em cima da gota de solução salina na lâmina
9* Flambar novamente a alça após uso
10* Fixação da bactéria na lâmina, deve-se passar a lâmina por 4 vezes na chama do Bico de Bunsen (Não pode demorar, tem que passar rápido sob a chama por 4 vezes)
11* Aplicação do Cristal Violeta, e deixar agir por 1 min
12* Após aplicar o Cristal Violeta nas duas lâminas, esperar por 1 min, e tirar o excesso
1* Cristal Violeta (1 min)
2* Lugol (1 min)
3* Água destilada
4* Álcool ou solução descolorante
5* Água destilada
6* Fucsina (30 segundos)
7* Água destilada
* Aplicar a Fucsina e esperar por 30segundos
* Lavar com água destilada
* Após todo o processo de coloração, e lavar por último com água destilada, secar cuidadosamente
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* Os resultados foram observados no laboratório com microscópio
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Ao observar os resultados, a coloração de Gram além de apresntar diferentes colorações entre células Gram-positiva ou Gram-negativa, permite observar as diferentes dormas de bactérias que serão observadas no microscópio.
Cocos- têm formato de esfera; e têm vários tipos de cocos:
Diplococos- dois cocos
Estreptococos – Cocos enfileirados
Estafilococos – Cocos em cachos.
Bacilos – formato de bastonete;
Espirilos – com formato de espiral;
Vibriões – com formato de vírgula;
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Bacilos, estas bactérias têm formato de um bastonete.
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Estafilococos (Cocos em cacho), é uma das diferentes formas de cocos, bactérias que têm formato de esfera e quando agrupados formam uma colônia.
PRÁTICA III – PREPARO DE MEIOS DE CULTURA
Aula 19/04/18
1* Organização dos materiais utilizados, cordão barbante, algodão, as gases, 4 tubos de ensaios, e um Erlenmeyer
2* Abrir a gase, e depois dobrar fazendo um quadrado e cortar
3* Coloque um quadrado de gase e colocar em cima da boca do Erlenmeyer, e pegar um pedaço de algodão pra preencher o espaço do meio da tampa, e enrolar com um cordão
4* Com os tubos a mesma coisa
5* Fazer um tampão para os tubos e o Erlenmeyer
Explicar o passo a passo mais específico
* Após fazer os tampões
* Cortar um pedaço de papel alumínio, e envolver na tampa do Becker
* Pegar um pote do meio que irá preparar, no caso este é Ágar nutriente e observar o meio de preparo
* Colocar o papel do alumínio na balança analítica e tarar
* Não esquecer de avisar a professora que esta foi tirada alguns segundos depois de tarar e colocar
*Pesar até chegar o valor necessario para o preparo do meio, conforme o meio de preparo do pote, quantidade de placas/tubo e de água destilada
* Medir a quantidade de água necessária de água destilada para fazer este meio.
100ml de água destilada
2 gramas de ágar nutriente
* Colocar cuidadosamente a 2 gramas de ágar nutriente no Erlenmeyer
* Após colocar o ágar nutriente, adicionar o 100ml de água destilada
*
Mexer em movimentos circulatórios, para dissolver o ágar na água destilada até chegar a forma homogênea
Embalar o Erlenmeyer, após feito o Ágar nutriente e estar homogêneo, cortar um pedaço de papel madeira, fechando totalmente a tampa, passando o durex, e identificando com o nome do grupo, curso, data realizado, validade
Preparo do Caldo Nutriente
* Colocar o papel aluminio e tarar a balança
* Pesar até a quantidade desejada, de 0,16 gramas
* Colocar o pó do caldo nutriente no Becker
* Com a chapa, ferver 20ml de água destilada (até formar bolhinhas) por um becker, usar uma luva termica para pegar a água já fervida
* Após adicionar a água destilada fervida, no becker com o pó do caldo nutriente, o calor proprio da água dissolve o pó..misture se for o caso para ficar homogêneo
* Com uma pisseta, medir 5ml para cada tubo de ensaio, e inserir esse caldo no tubo
* Identificar o tubo com o nome do grupo
Esterelização das placas
* Envolver as 5 placas em um papel madeira, e fechar devidamente
* Após esse processo de dobramento, fixar com a fita
* Identificar a placa envolta pelo papel madeira, com nome do grupo, curso, data da realização e validade
* Juntaram todos os tubos realizados por todos os grupos, em uma lata de leite ninho, e envolveu por um papel madeira
* Após envolver e dobrar, fixar com fita a cima e as laterais
*Fomos para a sala de esterilização
* Abrir a autoclave, retirar a cesta, e observar o nível da água, se está no nível correto de água
* Colocar as vidrarias cuidadosamente, as mais pesadas por baixo, e as mais leves por cima
*Fechar a autoclave de forma paralela
*Observar sempre a temperatura, para que nem seja abaixo de 110 graus e nem a mais
PRÁTICA IV – CULTURA DE FUNGOS E BACTÉRIAS
Aula 03/05/18
Pegar o Ágar nutriente feito na prática anterior, flambar a tampa do Erlenmeyer, e adicionar uma quantidade suficiente para preencher todo o fundo da placa de petri,
Repetir o mesmo processo de flambar sempre que for preencher uma placa, e sempre na área estéril, próximo ao Bico de Bunsen.
* Flambar a alça de inoculação (ficar incandencente por 5 segundos e deixar esfriar depois)
* Fazer um pequeno furo no meio do ágar nutriente
* Flambar a alça de inoculação
*Flambar o tubo de ensaio
* Pegar o fungo, com a alça de inoculação em L.
Cultivo de Fungos
*OBS: Fizemos o cultivo de fungos na placa de petri que deveria ser no meio ágar sabourad, fizemos no ágar nutriente.
* Colocar o fungo nos furos do meio do ágar inclinado do tubo de ensaio
*Flambar e fechar
Cultivo de Bactéria
* Pegar a alça de inoculação com formato redondo, e flambar, deixar esfriar
*Pegar a bactéria no meio de cultura
*Flambar o tubo de ensaio com ágar sabourad
*OBS: Fizemos o cultivo de bactérias com 4 tubos de caldo nutriente, e 1 tubo com ágar sabourad (Inclinado)
*Colocar a bactéria no furo no meio do tubo com ágar sabourad
*Flambar o tubo e fechar imeditamente
*Flambar a alça de inoculação sempre que usar
Resultado da Cultura de Fungos e Bactérias
PRÁTICA V – ESGOTAMENTO
Aula 03/05/18
*Flambar a alça de inoculação redonda (para bactérias)
* Coletar a bactéria no meio de cultura
Resultado do Esgotamento
PRÁTICA V – MÉTODO DE CONTROLE MICROBIANO
Aula 17/05/18
*Flambar a alça de inoculação redonda (para bactérias)
* Coletar a bactéria no meio de cultura
* Flambar o tubo de ensaio, colocar a bactéria na solução salina formando um (Inóculo)
*Agite bem o inóculo, para as bactérias se espalharem
*Imergir o swab no inóculo
*Esfregar 8 vezes, em zig zag pegando todo o fundo, e girando e alternando..
* Método Físico – raio uv
*Método químico – Pinho sol, hipoclorito, água oxigenada, água boricada e álcool 70
*utilizou discos, em placas diferentes
*Identificou na placa o nome do grupo, e marcou as posiçoes aonde ficará os discos
*colocou cada disco de cada produto químico na sua devida marcação
resultado
antes
depois
Resultado do método de controle
controle
Produtos químicos
Método físico – raio UV