Aula 05 - Protozoários emergentes

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ – CE
FACULDADE DE FARMÁCIA, ODONTOLOGIA E ENFERMAGE
DEPARTAMENTO DE ANÁLISES CLÍNICAS E TOXICOLÓGICAS 
Protozoários emergentes
Profa Dra. Maria de Fátima Oliveira
 2017.2
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Criptosporidiose 
		Histórico
- Tyzzer C. muris
1910 - Tyzzer propôs o gênero Cryprosporidium 
 - Tyzzer descreve C.parvum 
 - C. meleagridis associado a diarreia de peru
 - Os primeiros casos de criptosporidiose em humanos
 a) crianças de 3 anos idade saudável com sintomas gastrenterite 
 
 b) Indivíduo imunossuprimido com diarreia 
1980 – Surto de criptosporidiose humana com 21 casos nos EUA 
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Criptosporidiose 
• Agente etiológico: Cryptosporidium parvum (Tyzzer, 1907)
Filo: Apicomplexa
Classe: Conoidasida 
Ordem: Eucoccidiida
Família: Cryptosporidiidae
Gênero: Cryptosporidium
Espécie: C. parvum, C. hominis 
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Estrutura de um apicomplejo: 1-anel polar, 2-conoide, 3-micronemas, 4-roptries, 5-núcleo, 6-nucleolo, 7-mitocondria, 8-anel posterior, 9-alveolos, 10-aparelho de Golgi, 11-microporo.
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Parasitoses emergentes
Agentes etiológicos
Protozoários coccídios intestinais
• Cryptosporium parvum - Criptosporidiose *
• Cyclospora cayetanensis - Ciclosporose *
• Cytoisospora belli - Citoisosporose *
 
Todos são parasitas intracelulares obrigatórios
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Agente etiológico:Cyclospora cayetanensis (Ashford, 1979)
Família: Eimeriidae
Gênero: Cyclospora
Espécie: Cyclospora cayetanensis 
Gênero: Cytoisospora 
Espécie: Cytoisospora belli
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Criptosporidiose 
MORFOLOGIA
Oocisto – esféricos ou ovóides (5 x 4,5μm) com 4 esporozoítos
HABITAT
Microvilosidades de células epiteliais do TGI (trato respiratório, vesícula biliar, ductos pancreáticos, esôfago e faringe)
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Criptosporidiose 
TRANSMISSÃO 
 Ingestão de oocistos presentes na água ou alimentos
 Inalação
 Auto-infecção
 Fecal-oral (homossexuais masculinos)
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CICLO BIOLÓGICO – Cryptosporidium 
Ciclo Assexuado
Ciclo Sexuado
Auto-infecção
Esporozoíto
Merozoíto 1º
Merozoíto 2º
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CICLO BIOLÓGICO – Cryptosporidium 
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Criptosporidiose
Quadro clínico
INDIVÍDUOS IMUNOCOMPETENTES
Diarréia aquosa e autolimitada com regressão em 1 a 2 semanas 
Outros sintomas: dor abdominal que piora com alimentação, náuseas, vômitos, anorexia, flatulência, desidratação e perda de peso
Tratamento 
 Nitazoxanida – tratar crianças de 1 a 11 anos com esquema terapêutico de 3 dias 100mg/5mL
 Paramomicina 500mg por 7 a 10 dias 
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Criptosporidiose
Quadro clínico
INDIVÍDUOS IMUNODEPRIMIDOS
T CD4 - inferior a 200 células/mm sangue- os sintomas tornam se graves tendendo a cronicidade e debilitando o paciente 
Diarréia transitória – duração menos de 60 dias
Diarréia Crônica - aquosa volumosa crônica (alta morbidade) – duração superior a 60 dias 
Dor abdominal em cólica
Perda de peso, desidratação, má absorção de gorduras e vitaminas
Intolerância a lactose
Febre e envolvimento do trato biliar
A forma mais temida da criptosporidiose em pacientes imunodeprimidos é a tóxica fulminante com perda de 20 litros de fezes por dia 
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Criptosporidiose 
MANIFESTAÇÕES EXTRA-INTESTINAIS
TRATO BILIAR
Colecistite aguda
Colangite esclerosante
Estenose da papila
TRATO RESPIRATORIO
Tosse
Dispinéia
Rouquidão
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Epidemiologia 
Prevalência de criptosporidiose humana: 
África (2,6-21,3%), 
Américas do Sul e Central (3,2 -31,5%),
Ásia (1,3-3,1%) 
Europa (0,11- 4,1%),
América do Norte (0,3- 4,3%).
Transmissão hídrica - principal fonte de infecção
 Os oocistos são sensíveis 
Congelamento.
Formol a 10% 
Fervura, filtro com poro menor 1µm 
Água oxigenada 10 volumes 
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Epidemiologia 
Resistência dos oocistos nas concentrações habituais 
Cloro 
Iodo 
Amônia
Sobrevivência de oocistos por 3 meses: 
Ambientes úmidos 
Água, piscina 
Grupos de risco mais sujeitos a doença: 
Crianças (abaixo de 5 anos), 
mulheres grávidas 
 imunodeprimidos.
 Oocistos NÃO são retidos no processo de filtração da água.
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Pesquisa de oocistos nas fezes
Biópsia intestinal
Aspirado da mucosa
TÉCNICAS DE CONCENTRAÇÃO
Ritchie (centrifugação em formol-éter)
Sheather (flutuação em solução saturada de açúcar)
TÉCNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR
PCR (reação em cadeia da polimerase)
TÉCNICAS IMUNOLÓGICAS
Pesquisa de antígenos nas fezes
Pesquisa de anticorpos no soro (ELISA, IFI)
MICROSCOPIA ELETRÔNICA
MICROSCOPIA ÓPTICA
 Diagnóstico
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Cryptosporidium sp.
Oocistos de Cryptosporidium sp
Exame direto 
Exame direto 
(contraste de fase) 
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Cryptosporidium sp.
TÉCNICAS DE COLORAÇÃO
Ziehl-Neelsen modificado
Kinyoun modificado
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Cryptosporidium sp.
Oocistos esporulados
(esporozoítas vísiveis)
Oocistos de C. parvum
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Criptosporidiose
Diagnóstico laboratorial
Diagnóstico imunológico:
• Detecção de antígenos em amostras fecais utilizando-se anticorpos monoclonais
 
 Ensaios imunoenzimáticos - ELISA 
• Detecção de anticorpos por ELISA
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Cryptosporidium sp.
Diagnóstico imunológico:
C. parvum: Testes de detecção de antígenos fecais (ELISA)
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Cryptosporidium sp.
Diagnóstico imunológico:
Oocisto de C. parvum
 (Imunofluorescência direta)
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Diagnóstico laboratorial
Criptosporidiose
Outros métodos:
• Biópsia do jejuno
 PCR 
 
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Criptosporidiose 
 
PROFILAXIA
Saneamento básico
Evitar contato com animais e adotar rigorosa higiene pessoal
Medidas rigorosas de higiene em ambientes de alta densidade 
TRATAMENTO
Esquema recomendado 
 Paromomicina: 500mg 4 x dia, v.oral durante 14 dias 
Terapia de manutenção: a mesma dose 2xdia até melhorar a imunidade ( 3 a 6 meses)
Paramomicina 1g/2xdia + Azitromicina 600mg/dia, v.oral durante 1 mês
Terapia de manutenção: Azitromicina 600mg/dia até melhorar a função imune 
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Criptosporidiose 
 
TRATAMENTO
 Roxitromicina: 300mg 1 ou 2 x dia, durante 30 dias
 Espiramicina: 2 a 3 g/dia nas primeiras duas semanas 
 Terapia de manutenção: 1g/dia
NITAZOXANIDA
Crianças de 1 a 12 anos - 7,5 mg/kg 
Adultos ou maiores de 12 anos - 1 comp de 500 mg 
2 x dia por 3 dias, para todas as indicações. 
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Ciclosporíase
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Ciclosporose/Ciclosporíase
MORFOLOGIA 
Oocisto – mede 8-10 μm esféricos, membrana dupla espessa (2x maiores do que os oocistos de Cryptosporidium)
 Oocisto – esporula no meio externo em média dentro de 5 dias (7 a 14 dias) 
• Os oocistos maduros apresentam dois esporocistos com 2 esporozoítas em cada
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 Ciclo biológico Ciclosporose/Cistoisosporeose 
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Ciclosporose/Ciclosporíase
Patogenia e Sintomatologia
Assintomáticos:
• Sintomáticos:período de incubação 7 dias 
Diarréia aguda: autolimitada que dura 3 a 4 dias; podem ocorrer recaídas frequentes durante um período de 2 a 3 semanas;
Outros sintomas: dor abdominal, náuseas, flatulência, vômitos,anorexia,astenia,perda de peso, fadiga, febre baixa
 Em indivíduos imunodeficiente: o quadro diarréico é crônico e intermitente, trato biliar 
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Ciclosporose/Ciclosporíase
Epidemiologia
O primeiro caso de infecção humana por Cyclospora
foi descrito em 1979
• Cyclospora - distribuição universal 
 
 Prevalência é alta no Peru, Haiti, Nepal, Republica Dominicana, México, Índia
• Nos países (EUA e Canadá) foi observado surto de ciclosporose relacionado ao consumo de framboesas e manjericão. 
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Ciclosporose/Ciclosporíase
Diagnóstico laboratorial - Parasitológico 
Pesquisa de oocistos nas fezes
Biópsia intestinal
Aspirado da mucosa
TÉCNICAS DE CONCENTRAÇÃO
Ritchie (centrifugaçãoem formol-éter)
Sheather (flutuação em solução saturada de açúcar)
Técnicas de coloração:
Kinyoun (oocistos de coloração vermelha) - oocisto ácido resistente-variável
Safranina-azul-de-metileno - oocisto de coloração uniforme alaranjada 
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Ciclosporose/Ciclosporíase
Diagnóstico laboratorial - Parasitológico 
Pesquisa de oocistos (imaturos) nas fezes
Microscopia por contraste de fase
Técnica de autofluorescência (microscopia UV fluorescente) 
Filtro: 330-365 nm (oocistos de coloração azul )
450-490 nm (oocistos de coloração verde)
MICROSCOPIA ELETRÔNICA - ideal 
MICROSCOPIA ÓPTICA – Satisfatória 
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Ciclosporose/Ciclosporíase
Diagnóstico diferencial de Cyclospora com Cryptosporidium
tamanho do oocisto 
ácido-resistência-variável 
necessidade de esporulação
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Ciclosporose/Ciclosporíase
Oocistos de Cyclospora cayetanensis
 (Exame direto)
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Ciclosporose/Ciclosporíase
Oocistos de C. Cayetanensis
Autofluorescência
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Ciclosporose/Ciclosporíase
Método de Kynioun
Safranina-azul-de-metileno
Oocistos de C. cayetanensis
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CITOISOSPOROSE
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CITOISOSPOROSE
DEFINIÇÃO
É uma infecção causada pela Cytoisospora belli, acomete cerca de 2 – 15% dos pacientes com AIDS, desenvolvendo diarréia crônica
MORFOLOGIA
Oocisto – elíptico com duplo contorno, medindo cerca de 30μm/10 μm;
 2 esporocistos com 4 esporozoítos no seu interior.
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CITOISOSPOROSE
HABITAT Intestino delgado
Trato biliar
QUADRO CLÍNICO
Infecções benignas: Assintomáticas
Período de incubação: 7 – 10 dias.
Período pré -patente: 2 – 4 semanas após a ingestão de oocistos esporulados 
 
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CITOISOSPOROSE
EM INDIVÍDUOS IMUNOCOMPETENTES
Diarréia aguda e autolimitada com evolução para cura espontânea dentro de 10 dias com eliminação de oocistos durante 1 mês. 
SINTOMAS: Evacuações frequentes (diarreia),cólicas abdominais, meteorismo, febre (38-39ºC).
EM INDIVÍDUOS IMUNODEPRIMIDOS
Se caracteriza por diarréia crônica de longa duração 
Diarreia aquosa volumosa, dor abdominal em cólica, acentuada perda de peso, desidratação, esteatorréia, má absorção de gorduras e vitaminas, intolerância a lactose, febre e envolvimento do trato biliar, eosinofilia.
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CISTOISOSPOROSE/EPIDEMIOLOGIA
Endêmico: América do Norte, Sudeste da África e Ásia
 Brasil/CE: a prevalência é de 5 – 20% em pacientes com AIDS.
 EUA: a prevalência é de 0,2 – 2% em pacientes com AIDS.
 HAITI: a prevalência é de 15% em pacientes com AIDS
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DIAGNÓSTICO/CITOISOSPOROSE
Pesquisa de oocistos não esporulados nas fezes, biópsia intestinal ou aspirado de mucosa.
Oocisto 
Oocisto 
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DIAGNÓSTICO/CITOISOSPOROSE
TÉCNICAS DE CONCENTRAÇÃO
Ritchie (centrifugação em formol-éter)
Sheather (flutuação em solução saturada de açúcar)
Técnicas de coloração:
Kinyoun (oocistos de coloração vermelha) -
Ziehl-Neelsen modificada - mais indicada 
Tricrômio 
Hematoxilina –eosina 
Auramina – rodamina 
Técnica de autofluorescência - utilizando filtros ultravioleta de 330 - 380 nm
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DIAGNÓSTICO/CITOISOSPOROSE
Oocistos de C. belli (biópsia de duodeno)
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 DIAGNÓSTICO/CITOISOSPOROSE
Cristais de Charcort – Leyden
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TRATAMENTO
 
Sulfametoxazol -SMT – Trimetoprim -TMT (Cotrimoxazol)
Esquema 
SMT 800mg + TMP 160mg, 2x dia, durante 10 dias (Imunocompetente)
 SMT 800mg + TMP 160mg, 4x dia , durante 10 dias (Imunodeprimido ) 
Manutenção SMT 800mg + TMP 160mg, 2xdia, 3 vezes por semana 
 Metronidazol 
 Sulfadiazina – pirimetamina 75mg + ácido folínico 10mg/dia 
 Sulfadoxina – pirimetamina 
Cystoisospora e Cyclospora 
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TRATAMENTO
 
NITAZOXANIDA
7,5 mg/kg para crianças de 1 a 12 anos ou 1 comprimido de 500 mg 2x dia para adultos e maiores de 12 anos, por 3 dias, para todas as indicações.
Terapia de suporte - hidratação, hidroeletrolíticos 
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CRYPTOSPORIDIUM 
CYSTOISOSPORA
CYCLOSPORA 
EDUCAÇÃ SANITÁRIA 
SANEAMENTO BÁSICO
TRATAMENTO DA ÁGUA 
CUIDADOS HIGIÊNICOS 
LAVAR E DESINFECTAR AS VERDURAS CRUAS 
COMBATER OS INSETOS 
TRATAMENTO DAS PESSOAS INFECTADAS 
 
PROFILAXIA 
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CRYPTOSPORIDIUM 
CYSTOISOSPORA
CYCLOSPORA 
 
PROFILAXIA 
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CRYPTOSPORIDIUM 
CYSTOISOSPORA
CYCLOSPORA 
 
PROFILAXIA 
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CRYPTOSPORIDIUM 
CYSTOISOSPORA
CYCLOSPORA 
 
PROFILAXIA 
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CRYPTOSPORIDIUM 
CYSTOISOSPORA
CYCLOSPORA 
 
PROFILAXIA 
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COCCÍDIOS INTESTINAIS
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COCCÍDIOS INTESTINAIS
Cytoisospora 
Cryptosporidium 
Cyclospora