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Fisiologia bacteriana Cláudio Marcos Lauer Júnior Fisiologia bacteriana - Necessidades energéticas e nutricionais; - Crescimento bacteriano; - Metabolismo bacteriano. http://www.brasilpost.com.br/2014/04/30/bacteria-antibiotico-oms_n_5243348.html • Os substratos do ambiente são usados para construir novos componentes celulares ou para obter energia. Carbono (autotroficas e heterotroficas) Oxigênio (transporte de e- aeróbia) Hidrogênio (todo material celular); Nitrogênio (vitaminas, proteínas e NA); -- Enxofre (aminoácidos, vitaminas); Fósforo (nucleotídeo e c/ fósforo inorg.). Macronutrientes • O ferro, zinco, molibdênio sódio, cloro, cobre, alumínio e outros são encontrados sempre na forma inorgânica. - componentes de proteínas; - cofatores de enzimas; - componentes de estruturas; - osmorreguladores. Micronutrientes Requisitos para o bom crescimento dos microrganismos: Condições de cultivo; Meios de Cultura • líquidos • sólidos : - seletivos. Ex. MacConkey cresce MO G - ; - diferenciais. Acréscimo de sangue ou indicadores de pH. Fatores de crescimento; Triple Sugar Iron Agar (TSI) • O Agar Tríplice Açúcar Ferro é usado para a diferenciação de bacilos entéricos patogênicos gram-negativos através de sua capacidade de fermentar dextrose, lactose e sacarose e pela produção de sulfureto de hidrogênio Influência dos fatores ambientais: As variações quanto ao requerimento térmico permite classificar as bactérias segundo a temperatura ótima para o seu crescimento, em: Temperatura : - psicrófilas – 12 - 17 ºC; - mesófilas – 28 - 37 ºC; - termófilas – 57 - 87 ºC. pH • Os valores de pH em torno da neutralidade são os mais adequados para absorção de alimentos para a grande maioria das bactérias. Existem, no entanto, grupos adaptados a viver em ambientes ácidos e alcalinos. • A bactéria que causa as cáries acompanha os humanos desde o berço africano, há milhares de anos. Pesquisadores da New York University encontraram evidências genéticas de que o Streptococcus Mutans já acompanha o homem há cerca de duzentos mil anos. pH • Helicobacter pylori • Substâncias que neutralizam os ácidos (pH <4)consegue ultrapassar a barreira de muco que o estômago possui para se proteger da própria acidez, aderindo-se à mucosa, área abaixo do muco, onde a acidez é bem menos intensa. • A H.pylori produz uma série de enzimas, algumas delas diretamente irritantes para as células do estômago, outras ativas contra a camada de muco, tornando-a mais fraca, deixando a parede do estômago desprotegida contra o conteúdo ácido. Influência dos fatores ambientais O oxigênio pode ser indispensável, letal ou inócuo para as bactérias, o que permite classificá-las em: - estritas ex.: gên. Acinetobacter. - microaerofilas ex .: C. jejuni - aeróbias - facultativas ex.: Escherichia coli - aerotolerante ex.: Lactobacillus. - anaeróbias estritas . Ex.: Clostridium tetani Clostridium botulinum. Influência dos fatores ambientais • Aeróbias estritas: exigem a presença de oxigênio, como as do gênero Acinetobacter. • Microaerófilas: necessitam de baixos teores de oxigênio, como o Campylobacter jejuni. • Facultativas: apresentam mecanismos que as capacitam a utilizar o oxigênio quando disponível, mas desenvolver-se também em sua ausência. Escherichia coli e vária bactérias entéricas tem esta característica. • Anaeróbias estritas: não toleram o oxigênio, ex.: Clostridium tetani,bactéria produtora de potente toxina que só se desenvolve em tecidos necrosados carentes de oxigênio. metanogênicos = eliminam metano a causa da sua respiração. Methanococcus janaschii Halofílicos extremos=vivem em ambientes muito salinos (Great salt lake, Utah; Mar morto) Influência dos fatores ambientais: Metabolismo Bacteriano Tipos Nutritivos Tipo de Energia Fototróficas -- utilizam luz luminosa; Quimiotróficas – utilizam sustâncias químicas. Fotoautotróficos: são organismos que usam a luz como fonte de energia e o carbono inorgânico (CO2) como fonte de carbono. (cianobactérias, algas e plantas verdes. Existem cerca de 60 espécies de bactérias fotoautotróficas. Fotoheterotróficos: usam luz como fonte de energia e compostos orgânicos (álcool, carboidratos, ácidos orgânicos, etc.) como fonte de carbono. São as bactérias verdes não sulfurosas (exemplo: Chloroflexus) Fisiologia bacteriana As necessidades energéticas microbianas podem ser classificadas em três categorias principais: 1) Quimiotrofia – derivação de energia biológica de reações que ocorrem sem luz (reações de oxido-redução). Quimioorganotrofia – reações de oxido-redução de compostos orgânicos exógenos; Quimiolitotrofia – reações de oxido-redução de compostos inorgânicos exógenos produzindo energia e libertando enxofre ou gás sulfídrico. Fisiologia bacteriana Metabolismo Bacteriano Obtenção de energia; - Oxidação aeróbia Carboidratos; Proteínas; Açúcar, frutose, lactose, glicose... Metabolismo Bacteriano - Oxidação anaeróbia fermentação carboidratos. Ex.: E. coli, Salmonela, Shigela fermentação de aminoácidos. Ex.: Clostridium perfringens; Clostridium botulinum. Metabolismo Bacteriano 1- Conceito: O crescimento é um somatório dos processos metabólicos progressivos, que normalmente conduz a divisão (reprodução – divisão binária ou brotamento) com concomitante produção de duas células-filha a partir de uma bactéria. Crescimento Bacteriano Crescimento Bacteriano Curva de Crescimento Embora as bactérias desenvolvam-se bem em meios de cultura sólidos, os estudos de crescimento são feitos essencialmente em meios líquidos. Fases da Curva de Crescimento: 1- Fase de Lag (latência); 2- Fase logarítimica (crescimento exponencial); 3- Fase estacionária; 4- Fase de declínio. Crescimento Bacteriano Curva de Crescimento Crescimento bacteriano • Fase lag (A): esta fase de crescimento ocorre quando as células são transferidas de um meio para outro ou de um ambiente para outro. Tais células estão sintetizando DNA, novas proteínas e enzimas, que são um pré- requisito para divisão. • Fase exponencial ou log (B): as células estão se dividindo a uma taxa geométrica constante até atingir um máximo de crescimento. Como as células na fase exponencial estão se dividindo a uma taxa máxima, elas são muito menores em diâmetro que as células na fase Lag. A fase de crescimento exponencial normalmente chega ao final devido à depleção de nutrientes essenciais, diminuição de oxigênio em cultura aeróbia ou acúmulo de produtos tóxicos. • Fase estacionária (C): há rápido decréscimo na taxa de divisão celular. A energia necessária para manter as células na fase estacionária é denominada energia de manutençãoe é obtida a partir da degradação de produtos de armazenamento celular, ou seja, glicogênio, amido e lipídeos. • Fase de morte ou declínio (D): quando as condições se tornam fortemente impróprias para o crescimento, as células mortas aumentam em números elevados. Nesta fase o meio se encontra deficiente em nutrientes e rico em toxinas produzidas pelos próprios microrganismos. Crescimento bacteriano
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