Relatório meio de cultura em ÁGAR NUTRIENTE

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INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO CIÊNCIA E TECNOLOGIA DE MATO GROSSO
CAMPUS AVANÇADO LUCAS DO RIO VERDE
BACHARELADO EM BIOTECNOLOGIA
GLEISE MACHADO
JHONATAN MEREL
KÁSSIO DE MARCO
STELLA PALUDO
PREPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA
Disciplina: Técnicas de cultivo de microrganismos
Docente: Jucicléia Arrigo
LUCAS DO RIO VERDE
SETEMBRO/2018
1. MATERIAL E MÉTODOS
1.1 Material
Na aula prática, utilizaram-se os seguintes materiais para preparação do meio de cultura semi-solida de microrganismos. 
	Pipeta/Pêra de sucção
	Vidro de relógio
	Funil
	Espátula 
	Béquer
	Tubos de ensaio
	Erlenmeyer
	Micro-ondas
	Autoclave
	Meio de cultura semi-sólida
	Água destilada.
	Balança
1.2 Metodologia
Na aula de laboratório, realizada segunda-feira, dia 10 de Setembro de 2018, pode-se preparar diferentes meios de cultura para crescimento de microrganismos. Primeiramente, a turma foi dividida em grupos, onde cada grupo preparou um tipo de meio de cultura (líquido sólido e semi-sólido).
Para a preparação do meio semi-sólido, utilizou-se o AN (Ágar Nutriente). A primeira etapa consistiu na pesagem do meio, utilizando-se uma balança de precisão (0,001 g), com o auxilio de uma espátula e vidro de relógio como tara. Após pesados 0,84 g, o meio foi diluído em 30 ml de água destilada e acondicionados em um erlenmeyer, conforme orientações da bula do produto (28 g.L-1). Para uma homogeneização e completa dissolução do meio em água, utilizou-se o forno micro-ondas, na temperatura de 40oC, por 3 min (Figura 1). 
Com o meio completamente diluído, utilizou-se a pipeta volumétrica e a pêra de sucção para passar 6 ml do erlenmeyer para os 5 tubos de ensaio, posteriormente os tubos foram identificados e acondicionado em béquer de vidro para depois serem submetidos a 121oC, por 15 min em auto-clave. Depois de retirados da autoclave os meios de cultura foram inclinados em um ângulo de 45º e deixados resfriar para seu uso (Figura 1).
	a)
	b)
	c)
	d)
	
	
	
	
	e)
	f)
	g)
	
	
	
	
	
Fig. 1. Etapas do processo de preparação do meio de cultura semi-sólido AN. a) Orientações do rótulo do produto; b) Pesagem do produto; c) transferência do meio pesado para o Erlenmeyer; d) adição de água destilada; e) transferência para os tubos de ensaio; f) rotulagem e acondicionamento e g) autoclavagem.
2. RESULTADOS E DISCUSSÃO
Na aula prática prepararam-se diferentes meios de cultura, esta é uma atividade básica, em um laboratório de microbiologia, contudo de fundamental importância no estudo de microrganismos. Dessa forma, utilizam-se meios quimicamente definidos para isolar microrganismos específicos, pois cada tipo de microrganismo precisa de um nutriente para se desenvolver.
Os meios de cultura podem ser classificados como: líquidos, sólidos ou semi-sólidos. Os meios líquidos (também conhecidos como caldos), assim como os semi-sólidos, são acondicionados em tubos de ensaio. Já os meios sólidos são preparados adicionando-se ágar ao meio líquido e posterior colocação em tubos de ensaio ou placas de Petri, onde o meio se solidifica.
Dentre os meios solidificantes utilizados nos meios de cultura, destaca-se o ágar, pois poucos microrganismos conseguem degradar este componente e, portanto ele permanece sólido quando é adicionado ao meio de cultura. O ágar é extraído de várias espécies de algas vermelhas e rochas, como a Pterocladia e a Gelidium. 
O ágar é um carboidrato de cadeia polimérica que consiste de unidades de galactose. Quando ele é dissolvido em água fervente e submetido a um resfriamento, ele gelifica para formar uma massa gelatinosa. Esse processo ocorre entre 34 e 36°C e o ágar permanece firme até 65°C. Essa substância também agüenta forças de cisalhamento, então o gel produzido retém a sua firmeza sob as condições laboratoriais. Embora a gelatina tenha propriedades gelificantes similares, ela não é resistente a ataques de enzimas bacterianas. O que não acontece com o ágar, então é possível preparar um meio de cultura sem o uso de inibidores, que podem interferir no crescimento do micróbio sendo desenvolvido.
Dentre os meios de cultua mais usuais, destacam-se o meio EC, que é constituído de um caldo de lactose tamponado com a adição de 0,15% de Mistura de Sais Biliares e é utilizado para a detecção de coliformes a 37°C e Escherichia coli em temperaturas elevadas (44,5 e 45,5°C). O meio BDA, que é composto de infusão de batata desidratada, dextrose que estimula o crescimento exuberante de fungos e ágar como o agente solidificante, sendo utilizado para o cultivo de fungos, harmonizado de acordo com os requerimentos e o meio NA, que é utilizado para o cultivo de uma ampla variedade de micro-organismos, é considerado o meio de propósitos gerais amplamente utilizado para o crescimento de micro-organismos não exigentes. Quando necessário, enriquecimentos podem ser adicionados a esse meio.
Meios de enriquecidos são utilizados para o cultivo de alguns microrganismos com crescimento muito complicado, portanto, é necessário fornecer um ambiente enriquecido de nutrientes para que ele possa se manter e crescer, possibilitando a sua análise.
3. CONCLUSÃO
Por meio desta aula prática foi possível aprender as técnicas de preparo dos meios de cultura, assim como suas especificidades e composição do diferentes meios.