Determinação de ácido ascórbico

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Universidade Federal de Goiás – UFG 
 Unidade Acadêmica Especial de Química 
 Análise Instrumental Experimental 
 
DETERMINAÇÃO INDIRETA DE ÁCIDO ASCÓRBICO 
Larissa C. P. Barreto a, Marcos E. G. do Carmo a, Matheus S. de Barros, Jéssica S. 
Silva a. 
a Universidade Federal de Goiás – Regional Catalão, Goiás, 75705-291, Brasil. 
 
OBJETIVO 
Quantificação do ácido ascórbico presente na amostra “desconhecida” através da 
espectrofotometria de absorção molecular (UV-Vis). 
INTRODUÇÃO. 
O Cr (VI) oxida a difenilcarbazida a difenilcabazona (reação 1), onde o complexo formado entre 
eles absorve luz em 543 nm. 
 
Reação 1 
Sabendo que o Cr (VI) também oxida o ácido ascórbico (reação 2), é possível então fazer uma 
determinação indireta da quantidade de ácido ascórbico presente em uma amostra já que o Cr 
(VI) que não reage com o ácido ascórbico (excesso) pode reagir com a difenilcabazida, 
acrescentada posteriormente, produzindo um complexo colorido. No entanto uma curva de 
calibração para este experimento seria decrescente, pois quanto maior a concentração de ácido 
ascórbico na solução, menor seria a absorbância da amostra. 
Cr2O72-(aq) + 3C6H8O6(aq) + 8H+(aq) ⇄ 3C6H6O6(aq) + 2Cr2+(aq) + 7H2O(l) 
Reação 2 
1. PREPARAÇÃO DA SOLUÇÃO PADRÃO DE Cr(VI) 25 mg/L. 
Foi realizado o preparo de 100 mL de uma solução de Cr(VI) 25mg/L a partir de uma solução 
estoque de 1000 mg/L utilizando 2,5 mL pra tal diluição: 
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C1V1=C2V2 
100.25=1000.X 
X= 2,5 mL da solução estoque de Cr(VI) 
Cálculo I 
2. PREPARO DA SOLUÇÃO DE 1,5 DIFENILCARBAZIDA 0,05% m/v. 
Preparou-se 25 mL de solução 1,5 difenilcarbazida 0,05% m/v contendo acetona e H2SO4 0,1% 
v/v. Para isso pesou-se 12,5 mg do reagente 1,5 difenilcarbazida em 10 mL de acetona e 
adicionou-se 2,5 mL de H2SO4 1 % v/v, completando-se o volume para 25 mL com acetona. 
Esta solução foi armazenada em frasco âmbar até a sua utilização. 
3. PREPARAÇÃO DA CURVA DE CALIBRAÇÃO DE ÁCIDO ASCORBICO. 
Preparou-se a curva de ácido ascórbico com um intervalo de 2 a 12 mg/L com adição do volume 
adequado do analito de uma solução estoque de 100 mg/L, 0,5mL difenilcarbazida, 2,5 mL de 
Cr (VI) e 5 mL de H2SO4 0,1% v/v em balões de 25 mL. Considerou-se o cálculo da diluição 
para obtenção dos volumes do padrão (tabela I). 
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Tabela I. Determinação dos volumes de solução padrão para a curva de calibração. 
Concentração (mg/L) 
Cálculo de diluição 
C1·V1=C2·V2 
Volume do Padrão (µL) 
Branco 100·V1=0,0·(25·103) 0 
2 100·V1=2·(25·103) 500 
4 100·V1=4·(25·103) 1000 
6 100·V1=6·(25·103) 1500 
8 100·V1=8·(25·103) 2000 
10 100·V1=10·(25·103) 2500 
12 100·V1=12·(25·103) 3000 
 
4. DETERMINAÇÃO DAS ABSORÇÕES DA CURVA DE CALIBRAÇÃO 
As absorções foram lidas em 543nm no UV-vis de bancada zerado com o branco (tabela II e 
gráfico I). 
Tabela II. Absorções obtidas para a curva de calibração. 
Concentração (mg/L) Absorbância 
2 0,346 
4 0,450 
6 0,493 
8 0,229 
10 0,042 
12 0,013 
Gráfico I. Curva de calibração do ácido ascórbico 
 
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Para a construção da reta não foram considerados o primeiro e segundo ponto, pois a absorção 
dos mesmos não seguiram uma linearidade, contrariando a lei de Lambert – Beer. 
 
5. DETERMINAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO DE ÁCIDO ASCÓRBICO NA AMOSTRA 
DESCONHECIDA. 
A amostra (1 cápsula de vitamina C, certificada pela empresa como tendo uma concentração de 
500 mg de ácido ascórbico por cápsula) foi dissolvida em um litro de água e, posteriormente, 
diluída em 50 vezes. Então foi realizada a leitura da amostra desconhecida no mesmo UV-vis 
zerado com o branco da curva de calibração, onde foi obtido uma absorbância de 0,114. Sendo 
assim a partir dos valores de coeficiente angular (b) e coeficiente linear (a) representados no 
gráfico I é possível determinar a concentração de ácido ascórbico na amostra montando uma 
equação de reta (cálculo III). 
y = a + b·X 
0,114 = 0,9264 - 0,0813·X 
X = 9,9926 mg/L 
Cálculo III 
Considerando a diluição de 50 vezes a concentração da amostra desconhecida é de 499,63 mg/L 
de ácido ascórbico. 
CONCLUSÃO 
Diante do experimento realizado foi possível determinar a concentração do analito através da 
complexação do Cr (VI) em excesso com a 1,5-difenilcarbazida, acompanhada por 
espectrofotometria de absorção molecular (UV-Vis), com a construção de uma curva de 
calibração indireta com concentrações conhecidas de Cr (VI) e ácido ascórbico apresentando um 
erro de -0,3700 mg em relação ao informado pela empresa responsável. 
REFERÊNCIAS 
1. SKOOG, D. A.; WEST, D. M.; HOLLER, F. J.; CROUCH, S. R. Fundamentos de Química Analítica. 
8ª ed. São Paulo, Pioneira Thomson Learning, 2005. 
2. SILVERSTEIN, R. M.; BASSLER, G. C.; MORRILL, T. C. Identificação espectrométrica de 
compostos orgânicos. 3 ed. Rio de Janeiro: Editora Guanabara Dois S.A. 1979.