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GENES, DNA E RNA Figura 1 – Dupla Hélice de DNA Fonte: Microsoft CONTEÚDOS Transcrição e tradução gênica Mutações gênicas O fenótipo e o genótipo 2 AMPLIANDO SEUS CONHECIMENTOS Transcrição e tradução gênica Todos os genes estão organizados e armazenados entre os 23 pares de cromossomos humano localizados dentro do núcleo celular, juntos formam o genoma, o patrimônio genético de cada ser vivo. Cada gene do genoma fornece um código para produção de uma proteína. Portanto, há uma associação direta, um gene uma proteína. Figura 2 - Relação Cromossomo – Gene – Proteína Fonte: Microsoft Um gene é composto por DNA, (ácido desoxirribonucleico), em termos químicos o DNA é uma molécula relativamente simples, pois apresenta poucos compostos químicos. Em sua estrutura, observa-se a presença de duas fitas paralelas de nucleotídeos. Cada nucleotídeo, por sua vez, é formado por uma molécula de pentose (açúcar) associada a uma ou mais moléculas de fosfato e a uma base nitrogenada. Existem quatro subunidades de nucleotídeos diferentes e as duas cadeias unem-se através de pontes de hidrogênio entre um nucleotídeo e outro. Observe nas figuras a seguir, como é a estrutura e os tipos de nucleotídeos na dupla-fita de DNA: Proteína Cromossomo Gene 3 Figura 3 - Constituição do nucleotídeo Fonte: Fundação Bradesco Os nucleotídeos na molécula de DNA apresentam um padrão de emparelhamento entre as fitas. Observe na figura abaixo, que o pareamento das bases nitrogenadas é sempre preciso: A (adenina) sempre se liga à T (timina) e a (C) citosina sempre se liga à (G) guanina, veja: Figura 4 - Estrutura da dupla hélice de DNA Fonte: The Amazing Biology (A) ADENINA (C) CITOSINA (G) GUANINA (T) TIMINA P D Na estrutura do nucleotídeo, a única variável é a base nitrogenada, a qual poderá ser uma ADENINA, CITOSINA, GUANINA OU TIMINA. 4 Entretanto, nem todos esses nucleotídeos são utilizados como código para produção da proteína. Uma parte do gene, denominada de íntron, ou DNA não codificante, não é aproveitada para essa atividade. Estudos recentes têm demonstrado que esse segmento de DNA não-codificante corresponde a maior parte do genoma humano, isto é, a maior parte do DNA humano não gera proteína, mas estaria de alguma forma, influenciando a expressão dos segmentos codificantes, denominados de éxons ou DNA codificante. Vejamos a seguir, a estrutura de um gene humano. Cada faixa vermelha representa um éxon, isto é, uma região codificante utilizada para a produção de proteína, e as faixas azuis, os íntrons. Neste exemplo, o gene possui 3 éxons. Figura 5. Estrutura de éxons e íntrons de um gene Fonte: Fundação Bradesco Como já sabemos, a função do gene é sintetizar uma proteína. O passo seguinte é entender como isso ocorre. E, qual será o efeito de uma mutação nesse processo? O que vamos aprender agora é conhecido como o dogma central da Biologia, e por isso, talvez seja um dos temas mais recorrentes no ENEM e nos vestibulares de todo o país. A produção de proteína obedece uma sequência de eventos moleculares, os quais são divididos em duas etapas: Transcrição e Tradução Gênica, observe o esquema a seguir. Figura 6 - Dogma Central da Biologia Fonte: Fundação Bradesco DNA RNA Proteínas Transcrição Tradução Exon Exon Exon Intron Intron 5 A primeira etapa é a Transcrição Gênica. Nesse processo, ocorre a formação de uma molécula de RNA (ácido ribonucleico) a partir de uma molécula molde de DNA. Com auxílio de proteínas nucleares, as fitas do DNA se separam e uma delas serve de molde para síntese de RNA, enquanto a outra fica inativa. Ao fim da transcrição, as fitas que foram separadas voltam a se unir. Um detalhe importante nesse processo é que a base nitrogenada timina (T) é substituída pela uracila (U) durante a síntese da molécula de RNAm (RNA mensageiro) e somente a região codificadora (éxons) é transcrita. Veja na figura abaixo: Figura 7 - Transcrição e Tradução Gênica Fonte: CECIERJ A segunda etapa é a Tradução Gênica. O processo de tradução gênica consiste em unir aminoácidos de acordo com a sequência de códons do RNAm. Códon é uma trinca de bases nitrogenadas do RNAm, que tem sua trinca complementar (anticódon) no RNA transportador (RNAt) correspondente. Como a sequência do RNAm é determinada pelo gene, então a síntese de proteína representa a tradução da informação genética, por isso é chamada de tradução gênica. A tradução em si, é um processo no qual haverá a leitura da mensagem contida na molécula de RNAm pelos ribossomos, decodificando a linguagem de ácido nucleico para a linguagem de proteína. 6 Cada RNAt liga-se a um determinado aminoácido, formando-se uma molécula chamada aminoacil-RNAt, que conterá, na extremidade correspondente ao anticódon, um trio de códon do RNAm. Para entendermos bem este processo, observe a ilustração abaixo, note que a síntese de um peptídeo (proteína) se dá a partir da leitura de um RNAm. A leitura (tradução) será efetuada por um ribossomo que se deslocará ao longo do RNAm. Em cada deslocamento, um códon é identificado e uma molécula de RNAt liga-se ao RNAm de forma complementar, incorporando à cadeia um novo aminoácido. Figura 8 – Tradução Gênica Fonte: César e Sezar Mutações Genéticas Através da divisão celular nosso corpo consegue produzir novas células, nesse processo o genoma é constantemente replicado, isto é, copiado para as células recém produzidas, esse fenômeno biológico é conhecido por “Replicação do DNA”. Nesse fenômeno, a fita de DNA é replicada de forma semiconservativa, ou seja, uma das fitas molde é conservada a cada replicação (Figura 9). 7 Figura 9 - Replicação do DNA Fonte: Portal ESE Apesar da existência de mecanismos de verificação que fiscalizam a integridade da informação gênica replicada para as novas células, erros podem acontecer, resultando em mutações. Suponha as situações 1 e 2, nos esquemas a seguir: Figura 10 – Mutação Gênica Fonte: Secretaria da Educação do Estado do Paraná DNA normal A sequência de três nucleotídeos citosina (C), timina (T), timina (T), formam um códon, que é transcrito no mRNA, tornando-se guanina, adenina, adenina. A sequência de cada códon será traduzida em um aminoácido na proteína. 1 Suponha que essa região tenha sido replicada de forma errada. Observe que no lugar de uma timina (T), temos uma adenina (A). Na transcrição, o códon formado será G-U-A. 2 DNA mutante 8 Podemos observar na ilustração acima, que na situação 2, houve uma alteração na sequência de nucleotídeos, no lugar da base nitrogenada timina (T), foi inserido uma adenina (A), essa mudança na sequência de nucleotídeo do DNA é conhecida como mutação genética. Mas, no que essas alterações resultariam? Vejamos as ilustrações: Outros tipos de mutações podem ocorrer, como a deleção ou uma inserção de um nucleotídeo, observe como seria uma deleção no exemplo abaixo: Como vimos anteriormente, cada códon (três nucleotídeos) fornece o código para um aminoácido específico. Na situação ilustrada acima, pode-se observar que houve uma troca do aminoácido glutamato por aminoácido valina, veja que essas moléculastêm formatos bem diferentes, que simbolizam as diferentes propriedades químicas que cada uma delas apresenta. A alteração de aminoácidos, mesmo que única, pode influenciar drasticamente na atividade proteica, alterando, por exemplo, a afinidade da proteína a seus ligantes ou substratos. Cada aminoácido tem características químicas específicas, por isso alterá-los significa alterar a função da proteína. Vejamos a seguir, a tabela de códons e seus ...... Figura 11 – Tipos de mutações genéticas Fonte: Fundação Bradesco Códon normal: “GAA” Códon mutante: “GUA” Situação 1 Aminoácidos Situação 2 Glutamato Valina ATG CGT AGC TCT GAA TGC GTA GCT CTG ATG GTA GCT CTG AAT GCG TAG CT CTG Deleção de nucleotídeo Mudança na sequência dos códons 9 respectivos aminoácidos, para a síntese de proteínas. Note, que existem mais de um códon codificando o mesmo aminoácido. Figura 12 – Tabela de aminoácidos Fonte: Microsoft O fenótipo e o genótipo A função de uma proteína ou o efeito que ela exerce no organismo é uma característica fenotípica (associado ao fenótipo). Em síntese, esse conceito engloba as características observáveis ou caracteres de um organismo ou população como, por exemplo: característica anatômicas, desenvolvimento, propriedades bioquímicas ou fisiológicas e até comportamento. 10 Atividades Utilize os conceitos desenvolvidos nessa aula e resolva as questões: 1 - (ENEM) Durante muito tempo, os cientistas acreditaram que variações anatômicas entre os animais fossem consequência de diferenças significativas entre seus genomas. Porém, os projetos de sequenciamento de genoma revelaram o contrário. Hoje, sabe- se que 99% do genoma de um camundongo é igual ao do homem, apesar das notáveis diferenças entre eles. Sabe-se também que os genes ocupam apenas cerca de 1,5% do DNA e que menos de 10% dos genes codificam proteínas que atuam na construção e na definição das formas do corpo. O restante, possivelmente, constitui DNA não codificante. Como explicar, então, as diferenças fenotípicas entre as diversas espécies animais? A resposta pode estar na região não codificante do DNA. S. B. Carroll et al. "O jogo da evolução". In: Scientific American Brasil, jun./2008 (com adaptações). A região não codificante do DNA pode ser responsável pelas diferenças marcantes no fenótipo porque contém a) as sequências de DNA que codificam proteínas responsáveis pela definição das formas do corpo. b) uma enzima que sintetiza proteínas a partir da sequência de aminoácidos que formam o gene. c) centenas de aminoácidos que compõem a maioria de nossas proteínas. O conjunto de genes de um organismo, ou os seus genótipos, são suas informações hereditárias contidas em seu genoma. Nem todos os organismos que apresentam os mesmos genótipos parecem ou agem da mesma forma, porque a aparência e os demais componentes do fenótipo, são modificados por condições ambientais e de desenvolvimento. Os gêmeos univitelinos são um exemplo disso, ambos possuem o mesmo patrimônio genético, são clones, pois se originaram do mesmo óvulo e espermatozoide, porém, apresentam fenótipos diferentes. Figura 13 - Gêmeos Fonte: Microsoft 11 d) informações que, apesar de não serem traduzidas em sequências de proteínas, interferem no fenótipo. e) os genes associados à formação de estruturas similares às de outras espécies. 2 - (ENEM) Os vegetais biossintetizam determinadas substâncias (por exemplo, alcaloides e flavonoides), cuja estrutura química e concentração variam num mesmo organismo em diferentes épocas do ano e estágios de desenvolvimento. Muitas dessas substâncias são produzidas para a adaptação do organismo às variações ambientais (radiação UV, temperatura, parasitas, herbívoros, estímulo a polinizadores etc.) ou fisiológicas (crescimento, envelhecimento etc.). As variações qualitativa e quantitativa na produção dessas substâncias durante um ano são possíveis porque o material genético do indivíduo a) sofre constantes recombinações para adaptar-se. b) muda ao longo do ano e em diferentes fases da vida. c) cria novos genes para biossíntese de substâncias específicas. d) altera a sequência de bases nitrogenadas para criar novas substâncias. e) possui genes transcritos diferentemente de acordo com cada necessidade. 3 - (ENEM) Nos dias de hoje, podemos dizer que praticamente todos os seres humanos já ouviram em algum momento falar sobre o DNA e seu papel na hereditariedade da maioria dos organismos. Porém, foi apenas em 1952, um ano antes da descrição do modelo do DNA em dupla hélice por Watson e Crick, que foi confirmado sem sombra de dúvidas que o DNA é material genético. No artigo em que Watson e Crick descreveram a molécula de DNA, eles sugeriram um modelo de como essa molécula deveria se replicar. Em 1958, Meselson e Stahl realizaram experimentos utilizando isótopos pesados de nitrogênio que foram incorporados às bases nitrogenadas para avaliar como se daria a replicação da molécula. A partir dos resultados, confirmaram o modelo sugerido por Watson e Crick, que tinha como premissa básica o rompimento das pontes de hidrogênio entre as bases nitrogenadas. GRIFFITHS, A. J. F. et al. Introdução à Genética. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2002. 12 Considerando a estrutura da molécula de DNA e a posição das pontes de hidrogênio na mesma, os experimentos realizados por Meselson e Stahl a respeito da replicação dessa molécula levaram à conclusão de que a) a replicação do DNA é conservativa, isto é, a fita dupla filha é recém-sintetizada e o filamento parental é conservado. b) a replicação de DNA é dispersiva, isto é, as fitas filhas contêm DNA recém-sintetizado e parentais em cada uma das fitas. c) a replicação é semiconservativa, isto é, as fitas filhas consistem de uma fita parental e uma recém-sintetizada. d) a replicação do DNA é conservativa, isto é, as fitas filhas consistem de moléculas de DNA parental. e) A replicação é semiconservativa, isto é, as fitas filhas consistem de uma fita molde e uma fita codificadora. 4 - (UFSC) Há na mídia uma grande quantidade de notícias envolvendo o DNA: testes de paternidade, engenharia genética, transgênicos, clonagem terapêutica e reprodutiva, terapia gênica, farmacogenômica etc. Para compreender essas notícias, é necessário conhecer a estrutura da molécula de DNA e entender seu funcionamento. Analise os dados dos quadros a seguir, e assinale a(s) proposição(ões) CORRETA(S). ______________________________________ I T A C C G G A T G C T T A T G G C C T A C G A A ______________________________________ II T A C C G G A T G C T T A U G G C C U A C G A A ______________________________________ III A U G G C C U A C G A A Metionina - Alanina - Tirosina - Ácido Glutâmico 13 01. Em I, observa-se que o pareamento das bases nitrogenadas do DNA é aleatório. 02. O quadro I mostra uma molécula de DNA cuja duplicação ocorre de forma semiconservativa, pois cada uma das fitas originais em I serve de molde para uma nova fita, gerando duas novas duplas hélices. 04. Em II, está indicado o processo de transcrição, através do qual formam-se moléculas que contêm as mesmas bases nitrogenadas presentes no DNA. 08. Em III, está indicado o processo de tradução, queresulta na formação de polipeptídios, cuja sequência de aminoácidos está codificada numa molécula de ácido nucléico. 16. A deleção de um dos pares de bases na sequência mostrada em I não alteraria significativamente a sequência de aminoácidos em III. A soma das sentenças corretas resulta no total de:________________ 5. (Vunesp) Um pesquisador descobriu que uma sequência errada de aminoácidos numa determinada enzima era a causa de uma grave doença em ratos. Supondo que fosse possível realizar uma terapia para corrigir permanentemente a sequência de aminoácidos, em que ponto do esquema esta terapia deveria atuar? Justifique. 14 ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ INDICAÇÕES No Portal EJ@, você poderá acessar no Mapa Curricular: Conteúdo Curricular: Genética. Ao acessar esse conteúdo curricular, aproveite para consultar as várias indicações de sites, vídeos e programas de áudio, tais como: Site - Genética Virtual Site - Genética Básica on line Vídeo - Primeira Lei de Mendel Vídeo - Projeto Genoma Vídeo - Novo Telecurso -Biologia/EM Áudio - Síndrome de Down Áudio - Mutações Áudio - Transmissão das características hereditárias Áudio - A História e os experimentos de Gregor Mendel. (Parte 1 e 2) Além dessas indicações, também sugerimos consultar na internet: Vídeo: Dogma Central: DNA RNA Proteína. Esse vídeo apresenta as etapas de síntese proteica: transcrição e tradução gênica. A narração está em inglês, mas a imagens ilustram bem cada etapa da transcrição e tradução gênica. Disponível em: <http://www.youtube.com/watch?v=GwsMYCUqVSE> Acesso em: 25 de maio 2016. 11h15min. Vídeo: Hereditariedade da mutação genética. Esse vídeo apresenta uma curta entrevista com uma portadora de mutação no gene BRCA1, associado ao desenvolvimento de câncer de mama, e uma declaração de uma médica geneticista 15 explicando como ocorre a transmissão hereditária do defeito genético. Disponível em: <http://www.youtube.com/watch?v=S2hCg0JptPo>. Acesso em: 25 maio 2016. 11h17min. Artigo: Código de Barras de DNA: uma atividade para entender a identificação de espécies. Revista Genética na Escola. Esse artigo comenta como pesquisadores utilizam a informação contida nos genes para realizar a identificação de espécies de seres vivos. Disponível em: <http://media.wix.com/ugd/b703be_f6df743bbe3d47b3a725f7f8c0e06d99.pdf>. Acesso em: 25 maio 2016. 11h20min. Artigo: Visão histórica sobre o conceito de gene. Revista Genética na Escola. Esse artigo apresenta uma linha do tempo como o conceito de gene mudou ao longo do tempo, através do avanço da genética, como Ciência. Disponível em: <http://media.wix.com/ugd/b703be_f6df743bbe3d47b3a725f7f8c0e06d99.pdf>. Acesso em: 25 maio 2016. 11h22min. Infográfico: Por dentro do genoma humano. Esse infográfico ilustra a organização do material genético nas células humanas. Disponível em: <http://ultimosegundo.ig.com.br/genomahumano/infografico+por+dentro+do+genoma/n 1237683385110.html>. Acesso em: 25 maio 2016. 11h35min. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS CARVALHO, W. Biologia em Foco –1ª ed. São Paulo: Editora FTD, 2002. CECIERJ. Transcrição e tradução gênica. Disponível em: <http://cederj.edu.br/ceja/>. Acesso em: 25 maio 2016. 15h16min. ESE. Replicação do DNA. Disponível em: <http://www.ese.ipvc.pt/biogeonet/dna.htm>. Acesso em: 25 maio 2016. 08h57min. SECRETARIA DE EDUCAÇÃO DO ESTADO DO PARANÁ. Mutação gênica. Disponível em: <http://www.biologia.seed.pr.gov.br/modules/galeria/detalhe.php?foto=3&evento=2>. Acesso em: 25 maio 2016. 08h55min. 16 THE AMAZING BIOLOGY. Estrutura da dupla hélice de DNA. Disponível em: <http://theamazingbiology.weebly.com/uploads/1/5/4/3/15438878/7469464_orig.jpg>. Acesso em: 24 maio 2016. 14h38min. WILLIAM S. KLUG; MICHAEL R. Cummings; Charlotte A. Spencer; Michael A. Palladino. Conceitos em Genética. Artmed Editora, 2009. Gabarito 1. Alternativa D. A região não codificante do DNA, também denominada de íntron, apesar de não codificar uma proteína, especula-se que interfira no estímulo para que haja expressão das regiões codificadoras, os éxons. 2. Alternativa E. No enunciado está explícito que a produção de proteínas, ou seja, substâncias, são sintetizadas conforme a necessidade do organismo. Portanto, a alternativa que completa a frase corretamente é: “possui genes transcritos diferentemente de acordo com cada necessidade”. 3. Alternativa C. Nesse exercício o aluno deverá considerar as características da replicação genética. Conforme descrito pelos pesquisadores, ao final de cada replicação, uma das fitas de DNA molde é conservada, enquanto que outra molécula complementar é sintetizada. Desta forma, dizemos que a replicação é semiconservativa, pois há uma fita original ligada por pontes de hidrogênio à uma outra fita recém- sintetizada. 4. Resposta: 10 Alternativas Corretas: 02 e 08 5. Para corrigir permanentemente a sequência de aminoácidos, a terapia deve atuar no gene (DNA). O gene é um segmento da fita do DNA que contém uma sequência de bases que codifica a produção de uma proteína.