Metodos de estudo em patologia

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Faculdade Talentos Humanos
Disciplina de Patologia
Métodos de estudo em Patologia
Prof. George Kemil Abdalla
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 Sumarizar os principais métodos de estudo em Patologia;
 Descrever o procedimento básico para se fazer uma lâmina para microscopia;
 Sensibilizar o aluno sobre a importância de um bom trabalho técnico nos serviços de saúde;
 Apresentar as principais técnicas de biologia molecular aplicadas em Patologia.
OBJETIVOS
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INTRODUÇÃO
 Patologia recursos tecnológicos.
 Os conhecimentos sobre células progridem paralelamente ao aperfeiçoamento dos métodos de investigação.
Aparelhos com lentes
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INTRODUÇÃO
 Patologia recursos tecnológicos.
 Os conhecimentos sobre células progridem paralelamente ao aperfeiçoamento dos métodos de investigação.
Aparelhos com lentes
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INTRODUÇÃO
Microscópios
Carl Zeiss (Museu)
MO binocular Século XX
MO eletrônico Século XX
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INTRODUÇÃO
Micrótomo
C. Reichert - Austria
Modelo 2125 - Leica
Criostato - Leica
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INTRODUÇÃO
Técnicas de preparação e análise
 Exame de células vivas;
 Preparação de lâminas;
 Microscopia eletrônica;
 Técnicas aplicadas à Biologia Molecular.
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CÉLULAS VIVAS
É possível obter muitas informações microscópicas sobre a célula em plena atividade.
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 Cultura de células e tecidos;
 Esperma;
 Parasitas em fluidos do organismo (Trypanosoma cruzi em gota de sangue;
 Células em atividade e/ou em circulação, no organismo de pequenos animais
Micromanipulação ou microcirurgia.
CÉLULAS VIVAS
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CÉLULAS VIVAS
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CÉLULAS VIVAS
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Vantagem: células preservadas (fixadas e coradas)
Desvantagem: artefatos
Melhor demonstração de seus componentes
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Coleta do material
Citologia Esfoliativa
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Coleta do material
Citologia Esfoliativa
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Coleta do material
Biópsia por aspiração
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Coleta do material
Biópsia por agulha
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Coleta do material
Biópsia
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Coleta do material
Necropsia – Post mortem
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Coleta do material
Necropsia – Post mortem
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Coleta do material
A remoção de fragmentos nos procedimentos de biópsia e necropsia têm as seguintes finalidades:
 Biópsia:
 Elaborar diagnóstico;
 Avaliar a malignidade de certos tumores
 Avaliar margens cirúrgicas
 Necropsia:
 Evidenciar a causa mortis
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Processamento do material
O fragmento do material segue o seguinte processamento:
Fixação
Química
Física
Formaldeído 10%
Congelamento
Seco
Calor
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Processamento do material
O fragmento do material segue o seguinte processamento:
Fixação
Química
Formaldeído 10%
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Processamento do material
O fragmento do material segue o seguinte processamento:
Fixação
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Processamento do material
O fragmento do material segue o seguinte processamento:
Desidratação
Diafanização
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Processamento do material
O fragmento do material segue o seguinte processamento:
Infiltração
Fragmento do tecido bem endurecido
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Processamento do material
O fragmento do material segue o seguinte processamento:
Corte - 5µm
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Coloração e Montagem
Coloração com HE
Montagem da lâmina
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Coloração
 Hematoxilina – eosina (universal);
 Tricômico Masson (Fibras colágenas);
 Impregnação pela prata (Fibras reticulares);
 Grocott (Fungos);
 Ácido periódico de Schiff – PAS (Glicogênio);
 Ziehl Nielsen (BAAR);
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PREPARADOS PERMANENTES - LÂMINAS
Lâmina Pronta
Coração corado com HE
Coração corado com picrosirius
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IMUNOHISTOQUÍMICA
Localizam com precisão um determinado tipo de molécula, excluindo todas as outras, pois baseia-se na reação antígeno-anticorpo.
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IMUNOHISTOQUÍMICA
Localizam com precisão um determinado tipo de molécula, excluindo todas as outras, pois baseia-se na reação antígeno-anticorpo.
Rim corado com HE
Rim corado com IHQ
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MORFOMETRIA
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BIOLOGIA MOLECULAR
 Seqüenciamento do DNA;
 Reação em cadeia da polimerase (PCR);
 Hibridação in situ de ácidos nucléicos.
Técnicas do DNA recombinante
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BIOLOGIA MOLECULAR
São utilizados:
 Equipamentos apropriados;
 Enzima;
 Sondas.
Técnicas do DNA recombinante
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BIOLOGIA MOLECULAR
Reação em cadeia da Polimerase
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BIOLOGIA MOLECULAR
Reação em cadeia da Polimerase
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BIOLOGIA MOLECULAR
Reação em cadeia da Polimerase
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BIOLOGIA MOLECULAR
Hibridização in situ
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 Sumarizar os principais métodos de estudo em Patologia;
 Descrever o procedimento básico para se fazer uma lâmina para microscopia;
 Sensibilizar o aluno sobre a importância de um bom trabalho técnico nos serviços de saúde;
 Apresentar as principais técnicas de biologia molecular aplicadas em Patologia.
RESUMO
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MENSAGEM FINAL