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1) nas amostras de DNA isoladas de duas espécies não identificadas de bactéria a adenina perfez 32% e 17% do total das bases, respectivamente. Quais proporções relativas de adenina, guanina, timina e citosina você esperaria encontrar nas duas amostras de DNA? Que suposições você fez? Uma dessas bactérias foi isolada de uma fonte quente (64ºC). Qual DNA veio desta bactéria termofílica? Qual foi a base para sua resposta? Para o cálculo dos percentuais das bases foi usado a teoria da complementariedade das bases. Para que espécie sobreviva a temperatura elevadas, é importante que suas moléculas sejam mais resistentes a degradação por calor. Para uma molécula de DNA quanto maior o conteúdo par CG maior a temperatura de fusão, para que sejam amis resistentes a degradação pelo calor. Já que esse par de bases envolve três pontes de hidrogênio, enquanto o par de bases A=T envolve apenas duas pontes de Hidrogênio. 2) quais posições no anel da purina têm o potencial de formar pontes de hidrogênio, mas não estão envolvidas nas pontes de hidrogênio dos pareamentos de bases de Watson-Crick? 3) descreva a estrutura da dupla hélice de DNA. Quais são as interações que proporcionam estabilidade à molécula de DNA? Como estão ligados os nucleotídeos na molécula de DNA? 5) descreva os experimentos que confirmaram que o DNA é responsável pelo armazenamento da informação genética. Hershey e Chase estudaram bacteriófagos, ou vírus que atacam bactérias. Os fagos que usaram era simples partículas compostas de proteína e DNA, com as estruturas externas feitas de proteína e o núcleo interno consistindo de DNA. Hershey e Chase sabiam que os fagos se prendiam à superfície de uma célula bacteriana hospedeira e injetavam alguma substância (DNA ou proteína) no hospedeiro. Esta substância dava "instruções" que faziam a bactéria hospedeira iniciar a produção de muitos e muitos fagos - em outras palavras, era o material genético do fago. Antes do experimento, Hershey pensou que o material genético se provaria ser proteína. Para estabelecer se o fago injetava DNA ou proteína no interior da bactéria hospedeira, Hershey e Chase prepararam dois diferentes lotes de fagos. Em cada lote, os fagos eram produzidos na presença de elemento radiativo específico, que era incorporado nas macromoléculas (DNA e proteínas) sintetizadas pelos fagos. Uma amostra foi produzida na presença de, 35 S, um isótopo radioativo do enxofre. O enxofre é encontrado em muitas proteínas e está ausente do DNA, assim somente as proteínas dos fagos eram radioativamente marcadas por esse tratamento. A outra amostra foi produzida na presença de, 32 P, um isótopo radioativo de fósforo. O fósforo é encontrado no DNA, mas não em proteínas, então só o DNA do fago (e não as proteínas do fago) estava marcado radioativamente por este procedimento. Cada lote de fagos era usado para infectar uma cultura diferente de bactérias. Após a infecção, cada cultura era turbilhonada em um liquidificador, removendo qualquer fago remanescente e partes de fagos externas às células bacterianas. Finalmente, as culturas eram centrifugadas a alta velocidade, para separar as bactérias dos resíduos de fagos. A centrifugação faz o material mais pesado, tais como bactérias, moverem-se para o fundo do tubo e formarem um amontoado chamado sedimentado. O material mais leve, tais como o meio (caldo) usado para o crescimento de culturas, junto com fagos e partes de fagos, permanecem próximo à parte de cima do tubo e forma uma camada líquida chamada de sobrenadante. Quando Hershey e Chase mediram a radioatividade no sedimentado e no sobrenadante para ambos os experimentos, eles encontraram que uma grande quantidade, 32P apareceu no material sedimentado, enquanto quase todo o, S apareceu no sobrenadante. Com base neste e em experimentos similares, Hershey e Chase concluíram que o DNA, não a proteína, era injetado nas células hospedeiras e compunham o material genético dos fagos. 6 – Além de participar na estrutura do DNA, os nucleotídeos desempenham uma série de outras funções celulares. Descreva e exemplifique as mesmas. Os nucleotídeos encontram-se em vários processos metabólicos sendo conhecidos como subunidades dos ácidos nucléicos. Eles demonstram diferentes funções no organismo de um ser vivo como o homem. Entre as suas muitas tarefas evidenciam-se as seguintes: Têm uma participação ativa no transporte e na conservação de energia. São componentes de alguns co-fatores enzimáticos. Alguns destes ácidos têm a função de ser mensageiros químicos celulares São carregadores de energia química na forma de adenosina trifosfato (ATP). Atuam na constituição de enzimas, como é o caso da coenzima A. Actuam como molécula sinalizadora celular. Cooperam na construção dos ácidos desoxirribonucleico (DNA) e ribonucleico (RNA). 8) comente sobre as regras de CHARGAFF e suas implicações na estrutura da molécula de DNA. Outra informação chave relacionada à estrutura de DNA veio do bioquímico austríaco Erwin Chagaff. Chargaff analisou o DNA de diferentes espécies, determinando sua composição de bases A, T, C e G. Ele fez várias observações fundamentais: A, T, C e G não eram encontradas em quantidades iguais (como alguns modelos da época diziam) As quantidades de bases variavam entre as espécies, mas não entre indivíduos da mesma espécie A quantidade de A sempre igualava a quantidade de T, e a quantidade de C sempre igualava a quantidade de G (A = T e G = C) Esses resultados, chamados de regras de Chargaff, acabaram sendo cruciais para o modelo de Watson e Crick da dupla hélice de DNA.
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